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Biologia Molecolare - Virgolette Di Scienza

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Alberini Recenti Della Tribuna

 

Elementi traccianti Non radioattivi & Metodi Di Rilevazione

 

Metodi non radioattivi di rilevazione

Il vantaggio enorme dei tracciatori radioattivi è la loro sensibilità, ma ora gli elementi traccianti non radioattivi rivaleggiano con la sensibilità del loro radioattivo forebears. Ciò può essere un vantaggio significativo perché le sostanze radioattive propongono un rischio per la salute potenziale e deve essere maneggiata molto con attenzione.  Ancora, i tracciatori radioattivi creano gli effluenti radioattivi e l'eliminazione di tali rifiuti è sempre più difficile e costosa.  Come può un elemento tracciante non radioattivo competere alla sensibilità di radioattiva?  La risposta è, usando l'effetto moltiplicatore di un enzima.  Cioè se possiamo accoppiare un enzima ad una sonda che rileva la molecola che siamo interessati dentro, l'enzima produrrà molte molecole del prodotto, così amplificando il segnale.  Ciò funziona particolarmente buono se il prodotto dell'enzima è chemiluminescente (emissione chiara), perché ogni molecola emette molti fotoni, amplificando il segnale ancora.  La luce può essere rilevata da autoradiografia con la pellicola di raggi X, o da un phosphorimager.
Se desideriamo evitare la spesa di una pellicola di raggi X o del phosphorimager, possiamo usare i substrati degli enzimi che cambiano il colore invece di diventare chemiluminescenti.  Questi substrati cromogeni producono le fasce colorate che corrispondono alla posizione dell'enzima e quindi alla posizione della molecola che stiamo provando a rilevare.  L'intensità del colore direttamente è collegata con la quantità di nostra molecola di interesse, in modo da questo è un metodo quantitativo.

 

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