Fusione Di alta risoluzione

[Brotec]

Caro tutti,

Sono interessato nella fusione di alta risoluzione di nuova tecnica (HRM). Con questa tecnica desidero analizzare i prodotti di PCR per sembrare se contengono mutations/polymorphisms oppure no.

Fondendo il prodotto di PCR il meltcurve è fatto dal software misurando le caratteristiche ottiche. L'immagine della curva dipende dalla sequenza del prodotto di PCR. Quando ci è una variazione in questa sequenza, il meltcurve sarà influenzato e potrebbe essere distinto dai wildtypes.

Quel i sembr utili quando desiderate risparmiare i soldi (che ordinano i prodotti in serie di PCR è costosi). La maggior parte dei campioni non saranno influenzati dalle mutazioni e non devono essere analizzati dal continuatore. Quando il meltcurve di 1 prodotto di PCR è influenzato chiaramente, questo campione sarà ordinato per prendere uno sguardo che ordinamento della mutazione contiene.

Così qui una domanda. Avete certa esperienza di questa tecnica HRM?
E contribuisce a risparmiare i soldi ordinando meno campioni in serie? Ed alcuni tips/help sono molto benvenuti.

Sarò molto thankful per il vostro aiuto.
Grtz Brotec

[danfive]

Sono sicuro che potete trovare gli articoli molto su analisi della curva di fusione di PCR per la scoperta di mutazione o la classificazione dell'allele. E potete farli con tutta la macchina in tempo reale del pcr.

La vostra idea mi ricorda del prodotto da questo ---> http://www.idahotech.com/LightScanner/index.html dell'azienda

Il LightScanner è il primo e soltanto lo strumento per utilizzare i noleggi che si fondono™ per l'esame di mutazione e che genotyping in un sistema della piastra 384-well o di 96-. Questa tecnologia emozionante, autorizzata esclusivamente a tecnologia dell'Idaho, è basata su alle seguenti pubblicazioni di brevetto: 2005-02333335 (analisi nucleica e di fusione con le tinture di saturazione) e 2006-0019253, (analisi di fusione di Amplicon con le tinture di saturazione).

Il LightScanner è insuperato nei relativi tassi di controllo di temperatura e di aquisizione di dati. Con la sensibilità e la specificità superb, questo strumento è destinato per soddisfare le esigenze di alti progetti di esame di rendimento. Aggiunga semplicemente la tintura® di LCGreen alla reazione iniziale di PCR quindi trasferisca la piastra di PCR al LightScanner per fondersi. Il software intuitivo di analisi raggruppa i risultati e fornisce i risultati automatici.

[danfive]

Originalmente inviato da Brotec

Caro tutti,
Sono interessato nella fusione di alta risoluzione di nuova tecnica (HRM). Con questa tecnica desidero analizzare i prodotti di PCR per sembrare se contengono mutations/polymorphisms oppure no.

Buona idea, ho fatto il gene che traccio usando i gel (agarosi 3-4% più del tempo), ma le curve di fusione possono essere come esatte per la distinzione fra due fasce differente graduate. Egualmente ho usato l'analisi della curva di fusione per i prodotti di RT-PCR e molto sono stato soddisfatto, le curve di fusione possono osservare finchè realmente grande avete buona estrazione costante di DNA/RNA e di PCR ottimizzato (nessun fasce estranee).

Originalmente inviato da Brotec

Così qui una domanda. Avete certa esperienza di questa tecnica HRM?
E contribuisce a risparmiare i soldi ordinando meno campioni in serie? Ed alcuni tips/help sono molto benvenuti.

Sarò molto thankful per il vostro aiuto.
Grtz Brotec

Ovviamente non ordinare i non-mutanti in serie li salverà soldi e potete probabilmente risparmiare i soldi usando gli ingredienti convenzionali con SYBR, voi del pcr conoscete il pagamento del premio un kit.

[danfive]

Qui sono alcuni pdfs

Analisi Di Fusione del DNA: Benefici dei sistemi di alta risoluzione per il ---> http://www.idahotech.com/pdfs/LightS... efits%20of.pdf di esame e di Genotyping di mutazione

Noleggi che si fondono per l'esame di mutazione usando LCGreen più il ---> http://www.idahotech.com/pdfs/LightS ... enTechNote.pdf della tintura

Ottimizzazione di PCR per i noleggi che fondono il --> http://www.idahotech.com/pdfs/LightS ... ting_final.pdf di applicazioni

[Brotec]

Danfive caro,

Ringraziamenti per i collegamenti . Ho imparato molto più circa questa tecnica

Qui nel mio laboratorio ci sono gli apparecchi adatti per effettuare il HRM. 7500 il sistema veloce di tempo reale PCR dei biosistemi applicati. Ci è un software per HRM disponibile. Per comprare questo software molti soldi sono richiesti...

Sarebbe molto desiderabile sentire qualcuno avere esperienza positiva con l'apparecchio paragonabile ed il software da installare nel pc attuale.

Ringraziamenti in anticipo.