Bioinformatics, Protocolli, Proteina Proteomics del RNA del DNA
 |
|---|
Dovete registrare prima che possiate inviare sulle nostre tribune o usare le nostre caratteristiche avanzate. Registro Ora! Il relativi libero e veloce!
Già registrato? Inizio attività ora sotto.
Già registrato ed ha dimenticato la vostra parola d'accesso? Scatto qui sotto per recuperarlo.
Recuperi La Parola d'accesso Persa
Ora uniscasi - è veloce e libera!
La stazione molecolare è la più grande rete dei ricercatori, degli scienziati e degli amanti di scienza dovunque!
In un modo che abbina il fortuity, se non la conseguenza, del bagno del Archimedes e della mela del Newton, [ 3.6 milione anni ] le orme fossili finalmente sono state notate una sera nel mese di settembre del 1976 dalla collina del Andrew del paleontologist, che è caduto mentre evitava una sfera del dung dell'elefante lanciata lui dall'ecologo David occidentale. Lettore Del ~John, Collegamenti Mancanti: Il Cercare per l'uomo più in anticipo
L'analisi Enzima-Collegata dell'immunosorbente, o ELISA, è una tecnica biochimica usata pricipalmente in immunologia per rilevare la presenza di un anticorpo o di un antigene in un campione. Il ELISA è stato usato come strumento diagnostico nella medicina e la patologia vegetale, così come un controllo di qualità controlla in le varie industrie. Nei termini semplici, in ELISA un la quantità sconosciuta di antigene è affisso ad una superficie ed allora un anticorpo specifico è lavato sopra la superficie in moda da poterlo legarsi esso all'antigene. Questo anticorpo è collegato ad un enzima ed al punto finale una sostanza è aggiunta che l'enzima può convertire in certo segnale rilevabile. Così nel caso della fluorescenza ELISA, quando la luce è lucidata sul campione, tutti i complessi di antigen/antibody saranno flourescenti in moda da potere misurare la quantità di antigene nel campione.
L'effettuazione del ELISA coinvolge almeno un anticorpo con la specificità per un antigene particolare. Il campione con una quantità sconosciuta di antigene è immobilizzato su un supporto solido (solitamente una piastra di microtitolo del polistirolo) non-specifically (via adsorbimento alla superficie) o specificamente (via il bloccaggio da un altro anticorpo specifico allo stesso antigene, "in un panino" ELISA). Dopo che l'antigene sia immobilizzato l'anticorpo di rilevazione è aggiunto, formante un complesso con l'antigene. L'anticorpo di rilevazione può in covalenza essere collegato ad un enzima, o la latta in se è rilevata da un anticorpo secondario che è collegato ad un enzima con il bioconjugation. Fra ogni punto la piastra è lavata tipicamente con una soluzione detersiva delicata per eliminare tutti i proteine o anticorpi che specificamente non sono limitati. Dopo che il punto finale della lavata la piastra sia sviluppato aggiungendo un substrato enzimatico per produrre un segnale visibile, che indica la quantità di antigene nel campione. Più vecchio ELISAs utilizza i substrati cromogeni, benchè le più nuove analisi impieghino i substrati fluorogenic con la sensibilità molto più alta.
Poiché il ELISA può essere effettuato per valutare la presenza dell'antigene o la presenza dell'anticorpo in un campione, è uno strumento utile sia per la determinazione le concentrazioni nell'anticorpo del siero (quale con il HIV test[1 ] o del virus ad ovest del Nilo) che anche per la rilevazione della presenza dell'antigene. Egualmente ha trovato le applicazioni nell'industria alimentare nella rilevazione degli allergeni potenziali quale latte, arachidi, noci, mandorle dell'alimento ed eggs.[2 ] ELISA può anche essere usato in tossicologia come schermo presuntivo veloce per determinati codici categoria delle droghe.
La prova di ELISA, o l'enzima immunoassay (EIA), era la prima prova di selezione impiegata comunemente per il HIV. Ha un'alta sensibilità. In una prova di ELISA, il siero della persona è 400-fold diluito ed applicato ad una piastra a cui gli antigeni del HIV sono stati fissati. Se gli anticorpi al HIV sono presenti nel siero, possono legarsi a questi antigeni del HIV. La piastra allora è lavata per rimuovere tutti i altri componenti del siero. "un anticorpo secondario" specialmente preparato — un anticorpo che si lega agli anticorpi umani — allora si applica alla piastra, seguita da un'altra lavata. Questo anticorpo secondario chimicamente è collegato in anticipo ad un enzima. Così la piastra conterrà l'enzima in proporzione alla quantità di anticorpo secondario limitata alla piastra. Un substrato per l'enzima è applicato e la catalisi dall'enzima conduce ad un cambiamento a colori o la fluorescenza. I risultati di ELISA sono segnalati come numero; la funzione più discutibile di questa prova sta determinando il punto "di taglio" fra un risultato positivo e negativo.
Un metodo di determinazione del punto di taglio è in confronto uno standard conosciuto. Per esempio, se una prova di ELISA sarà usata nella selezione della droga del posto di lavoro, una concentrazione di taglio (per esempio, 50 ng/mL della droga) sarà stabilita e un campione sarà preparata che contiene quella concentrazione di analyte. Gli sconosciuti che generano un segnale che è più positivo di il campione conosciuto sono chiamati "positive" e quelli che generano un segnale meno positivo che il campione conosciuto sono chiamati "negazione.
Prima dello sviluppo del EIA/ELISA, l'unica opzione per la condotta del immunoassay era radioimmunoanalisi, una tecnica usando gli antigeni o gli anticorpi radioattivo-identificati. Nella radioimmunoanalisi, la radioattività fornisce il segnale che indica se un antigene o un anticorpo specifico è presente nel campione. La radioimmunoanalisi in primo luogo è stata descritta in un documento scritto di Rosalyn Sussman Yalow ed in Solomon Berson pubblicato in 1960[3 ].
Poiché la radioattività propone una minaccia di salute, un'alternativa più sicuro è stata cercata. Un'alternativa adatta alla radioimmunoanalisi sostituirebbe un segnale non radioattivo al posto del segnale radioattivo. Quando determinati enzimi (quale perossidasi) reagiscono con i substrati adatti (quali ABTS o 3.3’, 5, 5’- Tetramethylbenzidine), possono provocare i cambiamenti a colori, che può essere usato come segnale. Tuttavia, il segnale deve essere associato con la presenza dell'anticorpo o dell'antigene, che è perchè l'enzima deve essere collegato ad un anticorpo adatto. Questo processo di collegamento è stato sviluppato indipendentemente da Stratis Avrameas e da G.B. Pierce[4 ]. Poiché è necessario da eliminare tutto l'anticorpo o antigene non legato lavandosi, l'anticorpo o l'antigene deve essere riparato alla superficie del contenitore, cioè l'immunosorbente deve essere preparato. Una tecnica per compire questo è stata pubblicata da Wide e da Porath in 1966[5 ]
In 1971, in Peter Perlmann ed in Eva Engvall all'università de Stoccolma in Svezia, come pure Anton Schuurs e Bauke van Weemen nei Paesi Bassi, carte indipendentemente pubblicate che hanno sintetizzato questa conoscenza nei metodi per effettuare EIA/ELISA[6][7 ]
Video Di Analisi di ELISA
Video di analisi di ELISA. La determinazione di Chlorpyriphos metile nei campioni del frumento dall'enzima ha collegato l'analisi ELISA dell'immunosorbente da zuhaitz77.
Aggiunto vicino: oBWhat
Modifiche: immunosorbente collegato enzima elisay
di analisi
Data: 2008-05-04
Diniego/termini di servizio &
Politica Di Segretezza& ©2005-2007 Station.com molecolare, tutti i diritti
riservati.
Trasmetta questa pagina ad un amico
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
