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Flusso Cytometry

A flusso cytometry, troverete le informazioni di base e gli articoli sul metodo cytometry di flusso, sui protocolli dettagliati, sugli strumenti bioinformatic di analisi e su una tribuna cytometry di flusso per tutte le vostre domande e discussioni di ricerca di biologia delle cellule.

Priorità bassa Di Cytometry Di Flusso

Il flusso cytometry (anche chiamato FCM) è un metodo molecolare di biologia che è usato comunemente per contare, cellule di ordinamento e rapidamente esamina, analizza o persino particelle microscopiche sospese in liquido. I cytometers di flusso permettono un'analisi multiparametric simultanea delle caratteristiche fisiche e/o chimiche delle celluli o delle particelle che fluiscono oltre un'apparecchiatura ottica e/o elettronica di rilevazione, in un flusso fluido usando un fascio della luce di laser.

Il termine cytometry deriva dalle parole greche per la misura (metry) e dalla cellula (cyto) che dà "a flusso cytometry" la misura delle celluli mentre fluiscono oltre un rivelatore.

Il flusso o l'ordinamento delle cellule è una possibilità funzionale ulteriore di flusso cytometry permettendo la separazione dei tipi di cellule con l'uso delle forze elettriche o meccaniche raccogliere le popolazioni delle cellule con una o più caratteristica del prodotto chimico o fisica regolata dall'utente.

Applicazioni Di Cytometry Di Flusso

Il flusso cytometry è usato comunemente nell'analisi del ciclo delle cellule, rilevazione ed analisi del apoptosis o necrosi, l'ordinamento delle cellule, rilevazione di superficie dell'antigene delle cellule per l'immunologia ed analisi della cellula formativa.

Misure Di Cytometry Di Flusso

Il flusso Cytomers può essere usato per misurare i seguenti parametri, secondo la macchina, il fluorophore e l'altro:

• volume delle cellule
• caratteristiche morfologiche delle cellule
• antigeni di superficie delle cellule (serie di ingranaggi degli indicatori di differenziazione (CD))
• rilevazione dei pigmenti delle cellule (cioè clorofilla o ficoeritrina)
• apoptosis (quantificazione, misura di degradazione del DNA, potenziale mitocondriale della membrana, cambiamenti di permeabilità, attività di caspase)
• analisi di attuabilità delle cellule
• valuti il DNA (per esempio nell'analisi del ciclo delle cellule, nella cinetica delle cellule, nella proliferazione)
• valuti il RNA
• analisi ed ordinamento cromosomici (per la costruzione della libreria del DNA o la pittura del cromosoma)
• valuti per l'espressione e la localizzazione della proteina
• prodotti transgenic in vivo, specialmente la proteina fluorescente verde o le proteine fluorescenti riferite
• attività enzimatica
• e molti altri parametri

Come Lavoro Di Cytometers Di Flusso?

Un fascio luminoso (solitamente luce di laser) di singola lunghezza d'onda è diretto su un flusso dal punto di vista idrodinamico messo a fuoco di liquido. Un certo numero di rivelatori sono puntati su il punto dove il flusso attraversa il raggio di luce; uno in conformità con il raggio di luce (spargimento di andata o FSC) e parecchio perpendicolare ad esso (spargimento laterale (SSC) ed uno o più rivelatori fluorescenti). Ogni particella sospesa che passa attraverso il fascio sparge la luce in qualche modo ed i prodotti chimici fluorescenti trovati nella particella o fissati alla particella possono essere eccitati nell'emissione della luce ad una frequenza più bassa che la fonte di luce. Questa combinazione di luce sparsa e fluorescente è presa dai rivelatori ed analizzando le fluttuazioni nella luminosità ad ogni rivelatore (uno per ogni picco fluorescente dell'emissione) è allora possibile estrapolare i vari tipi di informazioni sulla struttura fisica e chimica di ogni particella specifica. FSC correla con il volume delle cellule e SSC dipende dalla complessità interna della particella (cioè figura del nucleo, della quantità e del tipo di granelli citoplasmici o di rugosità della membrana). Alcuni fluiscono cytometers sul mercato hanno eliminato l'esigenza della fluorescenza ed usano soltanto lo spargimento chiaro per la misura. Altro fluisce immagini della forma di cytometers della fluorescenza di ogni cellule, della luce sparsa e della luce trasmessa.