Western Blot वेस्टर्न ब्लाट
Membrane Stripping and Re-probing Protocol - Western Blotting झिल्ली स्ट्रिपिंग और पुनः जांच प्रोटोकॉल -- पश्चिमी सोख्ता
Membrane Stripping and Reprobing Protocol for Western Blotting झिल्ली स्ट्रिपिंग और Reprobing प्रोटोकोल के लिए पश्चिमी सोख्ता
Stipping and re-probing blots Stipping और फिर से जांच blots
- add 280 μl of 2-beta-mercaptoethanol per 40 mL of stripping buffer (to a final concentration of 100 mM) 280 जोड़ने के μ l - 2 - बीटा mercaptoethanol प्रति 40 एम एल के विपठ्ठन बफर ( करने के लिए एक अंतिम एकाग्रता की 100 मिमी )
- Wash membrane in TBST (1 X 5 min) धोएँ झिल्ली में TBST ( 1 एक्स न्यूनतम 5 )
- Incubate membrane in stripping buffer for 30 min at 50-60°C (use a heating oven for this - and keep the oven door closed due to smell) झिल्ली में विपठ्ठन बफर सेने के लिए 30 मिनट पर 50-60 डिग्री सेल्सियस ( भट्टी का उपयोग गर्म करने के लिए इस है -- और दरवाजा बंद रखने के तन्दूर गंध के कारण )
- Wash in TBST (2 X 5 min) धोएँ में TBST ( 2 एक्स न्यूनतम 5 )
- Block membrane for 1 h in 5% blocking milk ब्लॉक झिल्ली के लिए 1 h रोकने के दूध में 5 %
- Follow normal protocol for developing western blots. सामान्य प्रोटोकॉल का पालन के विकास के लिए पश्चिमी blots .
- Membrane Stripping Buffer Recipe: झिल्ली स्ट्रिपिंग बफर पकाने की विधि :
- Stripping buffer: 62.5 mM Tris-HCl (pH 6.8), 2% SDS. स्ट्रिपिंग बफर : 62,5 मिमी Tris - एचसीएल ( पीएच 6.8 ) , 2 % SDS . (add 280 ul of 2-beta merceptoethanol or a final concentration of 0.1 M 2-Mecaptoethanol). ( 280 उल जोड़ने के 2 - बीटा merceptoethanol या किसी अंतिम एकाग्रता की 0,1 एम 2 - Mecaptoethanol ) .
- See our Western Blotting Protocol देखें हमारे पश्चिमी सोख्ता प्रोटोकॉल
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