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Science is facts; just as houses are made of stones, so is science made of facts; but a pile of stones is not a house and a collection of facts is not necessarily science. विज्ञान तथ्य है , जैसे घर पत्थरों से बने हैं , इसलिए है विज्ञान ने तथ्यों की , लेकिन एक पत्थरों के ढेर में एक घर में नहीं है और तथ्यों का संग्रह है , जरूरी नहीं कि विज्ञान की है . ~Henri Poincaré हेनरी पोंकारे ~
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In nature, plant cells often live in close association with cerain bacteria, which may provide a convenient vehicle for introducing cloned DNA into plants. Agrobacterium tumefaciens, for example, attaches to the cells of dicotledonous plants and causes the formation of plant tumours known as galls. This bacterium introduces a circular DNA molecule called the Ti (tumour-inducing) plasmid into the plant cell in a manner similar to bacterial conjugation. The plasmid DNA then recombines with the plant DNA. Since the Ti plasmid has been isolated, new genes can be inserted into it using recombinant DNA techniques and the Ti genes causing tumours can be disrupted. The resulting recombinant plasmid can then transfer desired genes into plant cells. प्रकृति में , संयंत्र में रहते हैं अक्सर कोशिकाओं के निकट सहयोग से cerain बैक्टीरिया है , जो एक सुविधाजनक वाहन उपलब्ध करा सकता है क्लोन शुरू करने के लिए डीएनए में पौधों . Agrobacterium tumefaciens , उदाहरण के लिए , शर्ट की कोशिकाओं के dicotledonous पौधों और कारणों के गठन के संयंत्र ट्यूमर के नाम से जाना जाता वाइरल . जीवाणु इस परिचय के नाम से एक परिपत्र डीएनए अणु ती ( अर्बुद - प्रेरित ) प्लाज्मिड संयंत्र में एक सेल में बैक्टीरिया के समान तरीके से लाइपोप्रोटीन . प्लास्मिड डीएनए के साथ संयंत्र फिर recombines डीएनए . ती प्लाज्मिड के बाद से पृथक कर दिया गया है , नए जीन कर सकते हैं डालनी हो रिकॉम्बीनेंट डीएनए तकनीक का उपयोग करके इसे और ट्यूमर ती जीन के कारण बाधित किया जा सकता है . रिकॉम्बीनेंट प्लाज्मिड परिणाम में स्थानान्तरण कर सकते हैं तो संयंत्र की कोशिकाओं में जीन वांछित है .
An especially useful characteristic of plants for transgenic studies is the ability of cultured plant cells to give rise to mature plants. meristemativ (growing) cells from dissected plant tissue or cells within excised parts of a plant will grow in culture to form callus tissue, an undifferntiated lump of cells. Under the influence of plant growth hormones, different plant parts (roots, stems, and leaves) develop from the callus and eventually grow into whole fertile plants. When an agrobacterium containing a recombinant Ti plasmid infects a cultured plant cell, the newly incorporated foreign gene is carried into the plant genome. A. tumefaciens readily infects dicots (petunia, tobacco, carrot) but not monocots; reliable techniques for introducing genes into monocots are still being developed. Direct introduction of DNA by electroporation has been successful in rice plants, (which are monocots), and the future looks bright for the manipulation of other commercially important monocotyledonous crop plants. Also available for gene transfer experiments are cells of a tiny, rapidly growing memberof the mustard family called Arabidopsis thaliana. This plant appears to be well suited to geentic analysis of a variety of developmental and physiological processes. It takes up little space, is easy to grow, and has a small genome, and genes defined by mutations can be cloned by positional cloning strategies. एक लक्षण के पौधों के लिए विशेष रूप से उपयोगी है ट्रांसजेनिक अध्ययन की क्षमता के संयंत्र संवर्धित करने के लिए कोशिकाओं को जन्म दे परिपक्व पौधों . meristemativ ( बढ़ती ) dissected कोशिकाओं से संयंत्र के ऊतक या कोशिकाओं के भीतर excised भागों में एक संयंत्र में वृद्धि होगी कैलोस ऊतक संस्कृति के रूप में , एक undifferntiated कोशिकाओं की गांठ है . अंतर्गत हार्मोनों के प्रभाव में वृद्धि संयंत्र , संयंत्र के विभिन्न भागों ( जड़ों , उपजी है , और पत्तियों ) से विकसित कैलोस और अंततः पौधों की वृद्धि में सारी उपजाऊ है . जब एक agrobacterium हैं जिसमें एक रिकॉम्बीनेंट ती प्लाज्मिड infects सभ्य संयंत्र सेल , नए जीन विदेशी शामिल किया जाता है संयंत्र में जीनोम . ए tumefaciens तत्काल infects dicots ( petunia , तंबाकू , गाजर ) नहीं है लेकिन monocots ; शुरू करने के लिए विश्वसनीय तकनीक monocots जीन में अभी भी विकसित किया जा रहा है . प्रत्यक्ष परिचय डीएनए के द्वारा किया गया है electroporation सफल पौधों में चावल , ( जो monocots हैं ) , और उज्ज्वल भविष्य के लिए महत्वपूर्ण व्यावसायिक monocotyledonous में हेरफेर अन्य पौधों की फसल है . जीन हस्तांतरण के प्रयोगों के लिए भी उपलब्ध हैं कोशिकाओं के एक छोटे से , तेजी से बढ़ रही memberof सरसों के परिवार के नाम से Arabidopsis thaliana . यह संयंत्र अच्छा लगता है कि करने के लिए अनुकूल geentic विश्लेषण के कई प्रकार की शारीरिक और विकास की प्रक्रिया है . यह छोटी जगह ले लेता है , विकसित करना आसान है , और एक छोटे से जीनोम है , और जीन म्यूटेशन द्वारा परिभाषित किया जा सकता है क्लोन के द्वारा स्थितीय क्लोनिंग रणनीति है .
Foreign DNA can be incorporated into the Drosophila germ-line genome by the technique of P-element transformation. This technique makes use of a segment of the P element, a highly mobile DNA element, which can transpose from an extrachromosomal element into a chromosome. Generally, this procedure results in incorporation of a single copy of the transgene into the Drosophila genome. In contrast, transgenic mice carry multiple copies of the transgene incorporated into their chromosomes. In both organisms, however, the chromosomal insertion site is highly variable. विदेश डीएनए में शामिल किया जा सके Drosophila जर्म लाइन जीनोम द्वारा इस तकनीक के पी परिवर्तन तत्व है . बनाता है इस तकनीक के उपयोग की एक खंड के पी तत्व है , एक उच्च मोबाइल डीएनए तत्व है , जो कर सकते हैं transpose से एक तत्व को एक extrachromosomal गुणसूत्र . आम तौर पर इस प्रक्रिया में शामिल करने का परिणाम एक प्रति के transgene में Drosophila जीनोम . इसके विपरीत , ट्रांसजेनिक ले चूहों के कई प्रतियाँ transgene में उनके शामिल क्रोमोसोम . जीवधारी दोनों बहरहाल , इस साइट chromosomal प्रविष्टि चर है .
Flies that develop from injected embryos will carry some germ cells that have incorporated the transgene; some of their progeny will carry the transgene in all somatic and germ-line cells, giving rise to pure transgenic lines. Individuals carrying the transgene are recognized by expression of a marker gene (eg, one affecting eye color) that is also present on the donor DNA. Although the transgenes in Drosophila and mice insert in chromosomal sites different from the position of the corresponding endogeneous gene, they usually are expressed in the right tissue and right time during development. मक्खियों है कि इंजेक्शन से विकसित भ्रूणों ले जाएगा कि कुछ जर्म कोशिकाओं के transgene शामिल हैं , उनके कुछ progeny के transgene में ले जाएगा और दैहिक सभी लाइन जर्म कोशिकाओं को जन्म देने के शुद्ध ट्रांसजेनिक लाइन है . व्यक्तियों को ले जाने की अभिव्यक्ति के द्वारा मान्यता प्राप्त हैं transgene मार्कर एक जीन ( जैसे , किसी एक को प्रभावित आँखों का रंग ) पर मौजूद भी है कि डीएनए के दाता . यद्यपि transgenes में Drosophila और chromosomal चूहों में डालने की स्थिति से अलग साइटों की इसी endogeneous जीन , वे आमतौर पर अधिकार में व्यक्त कर रहे हैं और ऊतक सही समय के दौरान विकास है .
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