Welcome to Molecular Station! आण्विक स्टेशन में आपका स्वागत है !

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. आपने को रजिस्टर करने से पहले आप हमारी मंचों पर पोस्ट कर सकते हैं या हमारे उन्नत सुविधाओं का उपयोग करें . Register Now! रजिस्टर अब ! Its Free and Fast! इसके स्वतंत्र और फास्ट !

Already registered? पहले से पंजीकृत है ? Login now below. लॉगिन अब नीचे है .

User Name: प्रयोक्ता नाम :

Password: पासवर्ड :

Remember Me? मुझे याद रखें ?

Already registered and Forgot your password? पहले से पंजीकृत है और अपना कूटशब्द भूल गये ? Click below to recover it. वसूल करने के लिए नीचे क्लिक करें .

Recover Lost Password कूटशब्द खो पुनर्प्राप्त

Join now - it's fast and free! अब सम्मिलित हों -- यह तेज और मुफ़्त है !

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! आण्विक स्टेशन के नेटवर्क के शोधकर्ताओं का सबसे बड़ा है , वैज्ञानिकों और विज्ञान प्रेमियों कहीं भी !

Recent Forum Posts हाल के मंच डाक

DNA Protocols डीएनए प्रोटोकॉल

DNA Encyclopedia डीएनए विश्वकोश

DNA Bioinformatics डीएनए Bioinformatics

DNA Forum डीएनए फोरम

DNA Blog डीएनए ब्लॉग

DNA News डीएनए समाचार

DNA Books डीएनए पुस्तकें

SAP Shrimp Alkaline Phosphatase Protocol एसएपी चिंराट Alkaline Phosphatase प्रोटोकॉल

Shrimp alkaline phosphatase or SAP, is an enzyme which catalyzes the dephosphorylation of 5’ phosphates from nucleic acid dephosphorylating RNA or DNA ends. चिंराट alkaline phosphatase या एसएपी है , जो एक एंजाइम catalyzes के dephosphorylation के 5 ' phosphates से nucleic अम्ल या डीएनए dephosphorylating शाही सेना पूरी हो जाती है .

Note that PCR products and also primers do not have phosphatases on their free ends, and therefore need to be phosphorylated prior to cloning if you are going to use a de-phosphorylated vector! ध्यान दें कि पीसीआर उत्पादों और भी प्राइमरों की जरूरत नहीं है उनके मुक्त phosphatases पर समाप्त हो जाती है , और इसलिए करने की आवश्यकता है phosphorylated यदि आप पहले क्लोनिंग का उपयोग करने जा रहे हैं de - phosphorylated सदिश !

SAP is temperature unstable are therefore you can easily deactivate this enzyme (compared to CIP!). तापमान अस्थिर है एसएपी हैं इसलिए आप आसानी से निष्क्रिय कर सकते हैं इस एंजाइम ( तुलना में CIP ! ) . SAP is deactivated with 65°C water bath incubation for 15 minutes. एसएपी 65 डिग्री सेल्सियस है निष्क्रिय के साथ नहाने का पानी की सेना के लिए 15 मिनट तक चली .

You get virtually no reaction. आप वास्तव में प्राप्त प्रतिक्रिया नहीं है . SAP requires at least 10mM MgCl2 (but optimal enzyme activity of shrimp alkaline phosphatase is at 20-25mM MgCl2) and it works well at pH 8.0. कम से कम 10mM MgCl2 एसएपी की आवश्यकता होती है ( लेकिन इष्टतम एंजाइम की गतिविधि alkaline phosphatase चिंराट 20 25mM MgCl2 पर है ) और यह अच्छी तरह से काम करता है 8,0 पीएच .

To dephosphorylate 1 pmol of DNA ends dephosphorylate करने के लिए डीएनए के समाप्त होने पर 1 pmol

To dephosphorylate 1 pmol of DNA ends (2.5 ug of 3 Kb plasmid), for 1hr at 37°C you need: dephosphorylate करने के लिए 1 pmol डीएनए के समाप्त हो जाती है ( 2,5 स्नातकीय प्लाज्मिड केबी के 3 ) , 1hr पर 37 डिग्री सेल्सियस के लिए आपको :

0.1 units of SAP for 5' overhangs, 0.2 units for blunt and 0.5 units for 3' over hangs. एसएपी 0,1 इकाइयों के लिए 5 ' overhangs , 0,2 इकाइयों के लिए मुँहफट 0,5 और 3 इकाइयों के लिए ' अधर से अधिक है .
Enzyme comes 1 unit per ul, Thus to be safe you can use approx.0.5 units for 2 ug. 1 प्रति इकाई उल एनजाइम आता है , इस प्रकार का उपयोग कर सकते हैं आप को सुरक्षित approx.0.5 इकाइयों के लिए 2 स्नातकीय .

TIPS: SAP Enzyme can be added directly to restriction digest! सुझाव : एसएपी एनजाइम जोड़ा जा सकता है सीधे प्रतिबंध डाइजेस्ट ! Thus the whole proceeding including restriction enzyme digestion, dephosphorylation, enzyme inactivation, ligation or 5’ end-labeling can be performed in one single tube by just adding the appropriate reagents. इस प्रकार की कार्यवाही सहित पूरे प्रतिबंध एंजाइम पाचन , dephosphorylation , एंजाइम inactivation , या बांधना 5 ' का प्रदर्शन किया जा सकता है लेबलिंग अंत में एक ट्यूब के द्वारा सिर्फ जोड़ने के अभिकर्मकों उपयुक्त है . This will allow you to save time and be efficient! इससे आप को बचाने के लिए समय और कुशल हो !

Troubleshooting SAP Shrimp Alkaline Phosphatase? विघ्ननिवारण एसएपी चिंराट Alkaline Phosphatase ?

Discuss and post questions about it in the Shrimp Alkaline Phosphatase and DNA Cloning Forum ! इसके बारे में चर्चा करें और प्रश्न पोस्ट में चिंराट Alkaline Phosphatase और डीएनए का क्लोनिंग फोरम !

Other DNA Protocols and Methods डीएनए और अन्य तरीके प्रोटोकॉल

DNA Cloning Guide डीएनए गाइड का क्लोनिंग

DNA Gel Electrophoresis डीएनए जैल वैद्युतकणसंचलन

Restriction Enzyme Digestion - all you need to know ! प्रतिबंध एनजाइम पाचन -- आप सभी जानते हैं करने की आवश्यकता है !

Genomic DNA Isolation Protocol जीनोमिक डीएनए अलगाव प्रोटोकॉल

Baceteria DNA Isolation Baceteria डीएनए अलगाव

DNA Transformation - Contains History of DNA डीएनए परिवर्तन -- में डीएनए का इतिहास

Find other protocols at our DNA Protocols external resource directory or see our DNA protocols . अन्य प्रोटोकॉल का पता लगाएं , पर हमारे डीएनए प्रोटोकॉल बाह्य स्रोत देखें या निर्देशिका हमारे डीएनए प्रोटोकॉल .

Related: पन्ने से जुडे :

DNA Microarray Protocols डीएनए माइक्रोएरे प्रोटोकॉल

PCR Protocols पीसीआर प्रोटोकॉल

DNA Bioinformatics डीएनए Bioinformatics

Visit DNA Bioinformatics . पर जाएँ डीएनए Bioinformatics .

DNA-Related News डीएनए से संबंधित समाचार

DNA News डीएनए समाचार