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Subculturing Cells - Cell Culture Subculturing कोशिकाओं -- सेल संस्कृति
Cell Culture सेल संस्कृति
Cell Subculture Protocol सेल Subculture प्रोटोकॉल
SUBCULTURING CELLS SUBCULTURING कोशिकाओं
Get DMEM media 4C; Trypsin-20C; BSA-20C; 4C मीडिया प्राप्त DMEM ; Trypsin - 20C ; BSA - 20C ; Put in 36mL of DMEM into conical tube plastic 36mL में डाल के DMEM शंक्वाकार में प्लास्टिक की नली Add 4mL of BSA media to 36mL DMEM; जोड़ें 4mL के BSA मीडिया को 36mL DMEM ; Get syringe and filter; सीरिंज प्राप्त करें और फिल्टर ; Suck up media with syringe. Add filter. चूसना तक मीडिया के साथ सीरिंज . फ़िल्टर जोड़ें . Push out media through filter on syringe. पुश से बाहर मीडिया के माध्यम से फिल्टर पर सीरिंज . Repeat twice to get all of volume. दो बार दोहराएँ प्राप्त करने के लिए सभी मात्रा . Put into new plastic tube conical. प्लास्टिक की नली डाल में नई शंक्वाकार . Remove old media by dumping into beaker; DO NOT USE ASPIRATOR (get contamination!!) पुराने निकालें मीडिया द्वारा डंपिंग में बीकर ; वातशोषक का प्रयोग न करें ( प्राप्त संदूषण ! ! ) Add 3mL typsin to culture. Trypsin with pull cells off the culture container. 3mL typsin संस्कृति को जोड़ें . Trypsin खींचने की कोशिकाओं के साथ बंद कंटेनर की संस्कृति है . Put container into incubator. Wait 2 min; Take out; look into microscope. incubator कंटेनर में रखें . 2 मिनट प्रतीक्षा करें ; निकाल लें ; विचार सूक्ष्मदर्शी . Try to get less clumps. More individual cells. कम clumps प्राप्त करने की कोशिश करें . अधिक व्यक्तिगत कोशिकाओं . Remove most of trypsin by dumping into beaker. निकालें अधिकांश trypsin द्वारा डंपिंग में बीकर . Put back into incubator. पीठ में डाल incubator . Check frequently. अक्सर जाँच करें . Slap container on sides to check bottom for less clumps; look into microscope. कंटेनर पर तमाचा पक्षों को रोकने के लिए नीचे के लिए कम clumps ; विचार सूक्ष्मदर्शी . When see many individual cells floating along; Great! जब देखने के कई व्यक्तिगत कोशिकाओं के साथ चल ; महान है ! Add media to larger container; 1:5/ 1:3 dilution (3-5 containers larger). मीडिया को बड़े जोड़ें कंटेनर ; 1:5 / 1:3 के कमजोर पड़ने ( 3-5 बड़े कंटेनर ) . Add 10mL to (T75)large container, 5mL to (T25)small container. 10mL को जोड़ें ( T75 ) बड़े कंटेनर , 5mL करने के लिए ( T25 ) छोटे कंटेनर . Suck out Most (5mL of cells from T25). चूसना से अधिकांश ( 5mL की कोशिकाओं से T25 ) . Add to T75. T75 में जोड़ें . Leave some cells in small container. Add media to small container. Check in microscope for single cells; Incubate in 37C incubator. कुछ छोटे से कंटेनर में कोशिकाओं को छोड़ दें . जोड़ें करने के लिए मीडिया के छोटे से कंटेनर . की जाँच के लिए एकल कोशिकाओं में सूक्ष्मदर्शी ; सेने में 37C incubator . See other Cell-protocols at our Cell Biology and Cell Culture Protocol Directory . अन्य सेल के प्रोटोकॉल पर देखें हमारे सेल बायोलॉजी और संस्कृति सेल प्रोटोकॉल निर्देशिका है .