Protocoles de transfection

Protocole de transfection de cellules de COS. Inclut des solutions : Dextrane de DEAE et chloroquine 1000X - [protocole lu de transfection de cellules de COS]

Protocole de transfection utilisé dans la précipitation Dlgh1 dans les lymphocytes primaires d'OT-1 T. - [Précipitation Dlgh1 lue dans les lymphocytes primaires d'OT-1 T : Protocole de transfection]

Le protocole devrait être visualisé comme point de départ pour l'optimisation systématique de la transfection atténuée par lipofecting des agents. Une fois qu'un signal positif a été obtenu à partir d'un plasmide transfected portant un gène standard de journaliste, des conditions optimales pour la transfection peuvent être établies par la variation des paramètres systématique tels que la densité initiale de cellules, la quantité et la pureté de l'ADN, les medias et le sérum, et le temps d'exposition des cellules au complexe cationique-lipide-ADN. - [Transfection lue d'ADN négociée par Lipofection Protocol]

Polybrene et DMSO peuvent être employés pour réaliser la transformation stable de plusieurs types de cellules par plasmid DNA. Le rendement de transformants est le fois jusqu'à 15 plus grand avec Polybrene qu'avec le coprecipitation de phosphate-ADN de calcium. Cependant, il n'y a aucune différence entre les deux méthodes dans l'efficacité de la transformation des cellules par l'ADN à poids moléculaire élevé. - [Transfection lue d'ADN utilisant le protocole de Polybrene]

Le protocole décrit la transfection de l'ADN de plasmide dans des variétés de cellule mammifères utilisant l'électroporation, un processus par lequel l'application externe des impulsions électriques induisent la perméabilité du membrane de cellules. Les cellules en suspension et les petites cellules de volume sont difficiles au transfect, tandis que les cellules adhérentes et les cellules de large volume sont relativement faciles. Indépendamment de la taille de cellules ou du phénotype, augmentations d'efficacité de transfection avec une concentration élevée des cellules d'un petit volume. - [Electrotransfection de optimalisation lu de protocole in vitro de cellules mammifères]

Le procédé suivant est pour la transfection et l'électrodéposition simultanées des 264.7 cellules CRUES. Ce protocole a comme conséquence approximativement la viabilité de cellules de 50% à de 70%, et de ces cellules viables, 20% à 40% transfected en utilisant pEYFP-N1 de Clontech. Incluez : Procédure pour dédoubler des cellules avant transfection ; Procédure pour préparer Lipofectamine 2000 et ADN ; Préparation des 264.7 cellules CRUES pour la transfection. - [Cellules CRUES lues de Transfecting et d'électrodéposition 264.7 avec protocole 2000 de Lipofectamine]

le Deae-dextrane est généralement employé pour obtenir un éclat de l'expression transitoire des gènes copiés après la transfection des cellules mammifères. Beaucoup de variantes de la technique ont été décrites, qui recherchent à maximiser la prise de l'ADN et à réduire au minimum les effets cytotoxiques du Deae-dextrane. Dans ce protocole des cellules sont exposées brièvement à une concentration élevée de Deae-dextrane-ADN et puis au diphosphate de chloroquine, qui est un facilitant de transfection. - [La transfection lue a négocié par Deae-Dextrane : Protocole à haute efficacité de méthode]

Transfection des cellules d'IMEC utilisant le protocole de réactif de transfection de SuperFect. Le protocole inclut des considérations de plan d'expérience. - [Transfection lue des cellules d'IMEC utilisant le protocole de réactif de transfection de SuperFect]

Le protocole décrit une méthode pour la livraison des siRNAs dans les cellules mammifères en l'absence des plasmides de journaliste. Ceci mieux est réalisé avec des réactifs de transfection développés pour la livraison des oligodeoxynucleotides antisens. Les quantités de réactifs indiqués ci-dessous sont calculées pour la transfection d'une bien des 24 plats de puits. - [La transfection lue des cellules mammifères avec le siRNA duplexe le protocole]