Protocoles de cellules de tige

La combinaison de l'identification/de isolement éventuels des ancêtres de moelle et de RT-PCR quantitatif est un outil puissant pour comprendre l'hématopoïèse fondamentale de mécanisme moléculaire. Ici, nous avons décrit nos procédures standard de l'ancêtre myéloïde murin souillant pour les cellules lancées par fluorescence triant (FACS) et les méthodes de purification d'ARN. - [Cellule lue souillant pour trier des cellules de tige hématopoïétiques et des ancêtres myéloïdes et isoler l'ARN]

Ce protocole décrit la dérivation des variétés de cellule de SOLIDES TOTAUX de 3.5 blastocysts de souris du coitum de poteau de jours (DPC). Le procédé est semblable à la dérivation des variétés de cellule embryonnaires de la tige (es). Cependant, l'indice de réussite est considérablement plus haut, et moins d'expertise est exigée pour identifier les colonies cellulaires pluripotent de SOLIDES TOTAUX. - [Dérivation lue des variétés de cellule Trophoblast de tige (SOLIDES TOTAUX) de protocole de Blastocysts]

Les cellules de Pluripotent es peuvent se développer en beaucoup de types de tissus différenciés si elles sont placées de nouveau dans un environnement de différenciation. Souvent, le montant de différentiation par une étape intermédiaire a appelé le corps d'embryoid (eb). EBs peut être manipulé plus loin pour produire des types plus différenciés de cellules. Ce protocole décrit une méthode pour la différentiation des cellules d'es dans EBs. - [Lu différenciant les cellules embryonnaires de tige (es) dans le protocole de corps d'Embryoid]

Protocole pour l'électroporation des cellules d'es. Des cellules sont par habitude passées pendant deux jours avant d'electroporating. Habituellement un plat de 10 cm au confluency approximativement de 80% fournira assez de cellules pour 1-2 électroporations. - [Électroporation lue de protocole de cellules d'es]

Ce protocole décrit une méthode pour geler et dégeler des cellules d'es utilisant des cryovials. Il est important de geler des stocks de cellules d'es aussitôt que possible pour réduire le temps qu'ils sont dans la culture. Un enregistrement soigneux devrait être gardé du nombre de fois où des cellules sont passées et l'emplacement des cryovials. - [Congélation et dégel lus des cellules embryonnaires de tige (es) utilisant le protocole de Cryovials]

Ce protocole décrit le passage des cellules d'es. Elles devraient être dédoublées à 1:3 à 1:7 tous les 2 ou 3 jours selon leur taux de croissance quand elles atteignent le confluency de 70%. Elles devraient ne jamais être permises de se développer après le confluency de 90%, mais plutôt elles devraient former les colonies étroitement emballées ne se touchant pas. - [Passage lu de protocole embryonnaire de cellules de tige (es)]

Ce protocole décrit une méthode de préparation d'ADN à partir des cellules d'es dans des 24 plats bons. - [Préparation lue de l'ADN des cellules dans le protocole de plats de culture de tissu 24-Well]

Le protocole de Ths décrit la préparation des cellules d'es, qui peuvent alors être agrégées avec les embryons diploïdes ou tétraploïdes pour produire des chimères d'agrégation. - [Lu préparant les cellules embryonnaires de tige (es) pour le protocole d'agrégation]

Ce protocole décrit une méthode pour la préparation rapide de l'ADN des cellules dans 96 boîtes de Pétri bonnes de tissu. - [Préparation rapide lue de l'ADN des cellules dans le protocole de boîtes de Pétri de tissu 96-Well]

La cellule de Transfected es de cueillette copie le protocole

Ce protocole un protocole sur la façon dont se produire transfected les clones embryonnaires de cellules de la tige (es). Le protocole précédent de cette série est le protocole pour l'électroporation des cellules d'es. Le prochain protocole de la série est le protocole relatif à la désagrégation, à l'expansion, et à la congélation des clones de Transfected es.

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Pipette de Microinjection tirant le protocole

Un protocole simple pour la traction de pipette de microinjection.

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Microinjection de lavage acide introduit à la pipette le protocole

Le lavage acide du microinjection en verre introduit à la pipette le protocole.

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Microinjection introduit à la pipette le protocole

Microinjection introduit à la pipette le protocole de préparation.

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