protocoles de suspension

Catégorie : Protocoles de culture de cellules : Protocoles de culture de cellules d'insecte

Ce protocole est conçu pour adapter les cellules élevées de Five™ (BTI-Tn-4) à la culture de suspension sans sérum dans le SFX-Insecte de HyQ dans 5 passages. Les prises entières de procédé d'adaptation approximativement deux semaines et les cellules adaptées en résultant ont des temps de doublement de 16 et 20 heures et minimaux groupant en suspension la culture en masse compacte. - [Adaptation lue des cellules élevées de Five™ au support d'insecte de HyQ© SFX]

Catégorie : Signalisation des protocoles de transduction de signal

L'analyse des cytokines dans des supernatants de culture de tissu décrit un alignement liquide de suspension pour la quantification des cytokines en supernatants ou sérum de culture de tissu. Avec cette analyse, il est possible de profiler le niveau des cytokines multiples dans un puits simple. Le principe de cette analyse de cytokine est semblable à un immunoessai de sandwich à saisie. Inclut : Préparation pour l'analyse, l'analyse de Cytokine, les réactifs et les matériaux. - [Analyse lue de Cytokines dans culture Supernatants de tissu]

Catégorie : Immunologie : Immunoessais

La Bio-Plex analyse de cytokine utilise un alignement liquide de suspension pour la quantification des cytokines en supernatants ou sérum de culture de tissu. Utilisant ce micro-titre de 96 puits analyse plateformatted, il est possible de profiler le niveau des cytokines multiples dans un puits simple. - [Analyse lue de Cytokines dans le protocole de Supernatants de culture de tissu]

Catégorie : Protocoles de culture de cellules : Cellule souillant des protocoles

Une méthode simple pour manipuler des cellules de suspension est de les attacher à un substrat plein avant la fixation, et l'one-way pour faire ceci est d'utiliser un cytocentrifuge. - [Lu attachant des cellules de suspension aux glissières utilisant un protocole de Cytocentrifuge]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules

Des techniques de fractionnement de cellules sont présentées pour la conception des systèmes de gradient pour séparer un ou plusieurs types de cellules des lavages des cavités de corps ou de mécaniquement ou des tissus enzymatique-dissociés. Inclut : Préparation de suspension de cellules pour le chargement de gradient ; Fractionnement par densité flottable ; Fractionnement sur la base de taille de cellules. - [Fractionnement lu de cellules d'une population mélangée des cellules]

Catégorie : Immunologie : Protocoles d'immunoprécipitation : Protocoles d'immunoprécipitation de chromatine

Le protocole décrit l'utilisation de la technologie d'immunoprécipitation de chromatine (puce) d'analyser des interactions des protéines ou des complexes de protéine avec de l'ADN in vivo. Dans cette approche, le matériel est fixé avec du formaldéhyde pour préserver l'ADN-protéine et les associations de protéine-protéine, les cellules sont lysées, et la chromatine est coupée et solubilisée. La suspension de chromatine immunoprecipitated avec de l'anticorps contre les protéines d'intérêt, et les fragments coimmunoprecipitated d'ADN sont analysés. - [Immunoprécipitation lue de chromatine (puce) de protocole de complexes de protéine]

Catégorie : Protocoles de cellules de tige : Protocoles de culture de cellules de tige

La différentiation in vitro des cellules d'es se produit quand les cellules sont permises d'agréger en suspension la culture en l'absence des conducteurs embryonnaires du fibroblaste de souris (force expéditionnaire des Marines) et du facteur inhibiteur de leucémie (LIF). Les baisses s'arrêtantes fournissent une taille globale uniforme, qui est alors augmentée par la culture continue de croissance en suspension. Les corps d'embryoid sont alors plaqués et permis de différencier plus loin dans la culture. - [Différentiation lue des cellules embryonnaires de tige (es) suivre la méthode s'arrêtante de baisse]

Catégorie : Formation image moléculaire : Protocoles de microscopie électronique

Protocole chimique de fixation de protocoles de microscopie électronique… pour les cellules Suspension-Cultivées d'usine pour TEM ; Fixation standard de glutaraldéhyde pour TEM des protocoles de microscopie électronique d'animal…. Le service d'UBC BioImaging - le rayonnement Bio-Rad plus le microscope Confocal - démarrant vers le haut, paginent 1 - [les protocoles lus de microscopie électronique]

Catégorie : Immunologie : Protocoles mononucléaires d'isolement de cellules

Protocole pour l'enrichissement de PBMCs avec des monocytes. La suspension de cellules obtenue après ce protocole contient 40-70% monocytes. Cette suspension de cellules est qu'utilisée pour la séparation positive ou négative d'IMPERS. - [Enrichissement lu de PBMCs avec le protocole de monocytes]

Catégorie : Protocoles de culture de cellules : Protocoles de fixation de cellules

Le traitement des cellules avec du paraformaldéhyde mène à l'établissement des réticulations chimiques entre les groupes aminés libres. Quand les réticulations joignent différentes molécules, un treillage des interactions se produit qui tient l'architecture globale de la cellule ensemble. - [Cellules de réparation lues de suspension avec le protocole de paraformaldéhyde]

Catégorie : Protocoles de cytogénétique : Protocole in situ fluorescent de POISSONS d'hybridation

Protocole pour l'hybridation in situ de fluorescence d'une sonde réitérée d'ADN aux chromosomes humains en suspension. Technique d'hybridation qui n'a pas besoin du sulfate de formamide et de dextrane. Comme système modèle, nous avons utilisé le pUC spécifique réitéré 1.77 de sonde d'ADN d'humain, étiqueté lui avec digoxigenin-11-dUTP par entaille-traduction, et hybridé lui aux chromosomes de métaphase en suspension. Ces chromosomes ont été isolés par des techniques standard des lymphocytes humains. - [Hybridation in situ lue de fluorescence d'une sonde réitérée d'ADN aux chromosomes humains en suspension]

Catégorie : Immunologie : Protocoles d'Immunocytochemistry

Souillant des cellules en suspension, souillant des cellules enduites sur des glissières. Technique immunofluorescente. Systèmes de recherche et développement. - [Protocole lu Immunocytochemistry de fluorescence]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de cycle de cellules : Protocoles de phase de G

Ce protocole fournit une méthode pour la synchronisation d'une culture de couche unitaire des cellules de CHO dans G1 utilisant la privation d'isoleucine. Puisque des cellules de CHO peuvent également être adaptées pour élever en suspension la culture, ce procédé peut être employé pour obtenir de plus grandes quantités de cellules. Quand l'isoleucine est substituée, les cellules reprennent la croissance et commencent à entrer dans la phase de S ~4 heures plus tard. Cette méthode arrête presque 100% des cellules de CHO dans G1, et sur l'inversion, mène à la reprise rapide de la croissance de cellules et de la viabilité très élevée de cellules. - [Synchronisation G1 lue des cellules de CHO par protocole d'Isoleucine Deprivation]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement : Protocoles d'analyse de cycle de cellules

Ce protocole fournit une méthode pour la synchronisation d'une culture de couche unitaire des cellules de CHO dans G1 utilisant la privation d'isoleucine. Puisque des cellules de CHO peuvent également être adaptées pour élever en suspension la culture, ce procédé peut être employé pour obtenir de plus grandes quantités de cellules. Quand l'isoleucine est substituée, les cellules reprennent la croissance et commencent à entrer dans la phase de S ~4 heures plus tard. Cette méthode arrête presque 100% des cellules de CHO dans G1, et sur l'inversion, mène à la reprise rapide de la croissance de cellules et de la viabilité très élevée de cellules. - [Synchronisation G1 lue des cellules de CHO par protocole d'Isoleucine Deprivation]

Catégorie : Formation image moléculaire : Microscopie d'immunofluorescence

Les cellules de B ou de T en suspension, les cellules adhérentes sur les coverglass chambrés ou les chamberslides, sections de cryostat de défaire, OCT. ont encastré le tissu. Susan Anderson. - [Immunofluorescence lue/microscopie confocal]

Catégorie : Protocoles de biologie moléculaire : Protocoles d'hydrate de carbone

Immunofluorescence de mesure de méthode indirecte couplée au deuxième anticorps. Le meilleur pour des antigènes de membrane en plus d'intra- et extracellulaires antigènes, peut être appliqué aux sections gelées de tissu, aux cellules en suspension, et aux cellules attachées aux plaques en verre ou aux lamelles. Tadashi Tai~Head, service de l'immunologie de tumeur, l'institut métropolitain de Tokyo de la Science médicale, Tokyo, Japon - [Immunohistochemistry lu utilisant des anticorps d'Anti-Ganglioside]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de cytotoxicité : La toxicité de foie analyse des protocoles

La perfusion de collagènase du foie de rat rapporte une suspension de hepatocyte qui peut être exposée aux composés d'essai afin d'évaluer leurs effets sur la viabilité de cellules et la fuite d'enzymes. - [Isolement lu de protocole de Hepatocytes de rat]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Souillure de Leukostat des préparations de Cytospin pour détecter Apoptosis. La souillure de Shailaja Kasibhatla et autres Leukostat est employée pour visualiser les modifications nucléaires et la formation apoptotic de corps qui sont caractéristiques de l'apoptosis. Des cellules sont visualisées sous un photomicroscope et comptées pour mesurer l'apoptosis. Ce protocole peut être utilisé pour les cellules qui se développent en suspension et pour les cellules adhérentes. - [Souillure lue de Leukostat des préparations de Cytospin pour détecter Apoptosis]

Catégorie : Protocoles de la livraison de gène : Protocoles d'ADN Nanoparticles

Lipoplex (complexe liposome-ADN cationique) est formé par l'intermédiaire de l'interaction électrostatique des acides nucléiques anioniques avec des liposomes cationiques. Une couche mince des lipides est séchée sur le bas d'un tube en verre et réhydratée dans un soluté. La suspension en résultant de liposome est passée par des filtres de polycarbonate de taille désirée de pore. Ce protocole décrit également la préparation, les propriétés physiques, et l'activité biologique des nanoparticles liposome-polycation-ADN (LPD). - [Lipoplex et LPD lus Nanoparticles pour le protocole in vivo de la livraison de gène]

Catégorie : Protocoles de microscopie

Protocole pour le volume de mesure. Le matériel exigé inclut : Microscope, Hemacytometer et lamelle, suspension de levure. - [Protocole de mesure lu de volume]

Catégorie : Protocoles de cytogénétique

Protocole pour les préparations mitotic de chromosome à partir des cultures mammifères de cellules de suspension. - [Préparations lues de chromosome de Mitotic à partir de protocole mammifère de cultures de cellules de suspension]

Catégorie : Protocoles de transfection

Le protocole décrit la transfection de l'ADN de plasmide dans des variétés de cellule mammifères utilisant l'électroporation, un processus par lequel l'application externe des impulsions électriques induisent la perméabilité du membrane de cellules. Les cellules en suspension et les petites cellules de volume sont difficiles au transfect, tandis que les cellules adhérentes et les cellules de large volume sont relativement faciles. Indépendamment de la taille de cellules ou du phénotype, augmentations d'efficacité de transfection avec une concentration élevée des cellules d'un petit volume. - [Electrotransfection de optimalisation lu de protocole in vitro de cellules mammifères]

Catégorie : Protocoles de transfection : Protocoles de Sonoporation d'électroporation

Le protocole décrit la transfection de l'ADN de plasmide dans des variétés de cellule mammifères utilisant l'électroporation, un processus par lequel l'application externe des impulsions électriques induisent la perméabilité du membrane de cellules. Un certain nombre de facteurs peuvent affecter l'efficacité d'electrotransfection. Généralement les cellules en suspension et les petites cellules de volume sont difficiles au transfect, tandis que les cellules adhérentes et les cellules de large volume sont relativement faciles. - [Electrotransfection de optimalisation lu de protocole in vitro de cellules mammifères]

Catégorie : Formation image moléculaire : Microscopie d'immunofluorescence

Préparation de cytospin de la suspension unicellulaire. Université de Columbia. Laboratoire de Cattoretti. - [Préparation lue de cytospin de la suspension unicellulaire]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocole de transfection de cellules

hygromycin, sélection de néomycine des cellules stables en suspension. Laboratoire de Suprya Jayadev/Dr.Hannun Dr.Obeid, BCMB, la Caroline du Sud. - [Sélection lue des cellules de suspension de Transfected]