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Catégorie : Protocoles de Mycètes : Protocoles d'Aspergille

La technique se sert d'une contrainte d'Escherichia coli exprimant les red?ss ? operon sous la commande d'un instigateur induisible. Ceci permet à la contrainte d'effectuer la recombinaison homologue avec le point d'ébullition seulement 50-60 de l'ordre homologue. Le procédé n'exige aucune ligature d'ADN et est très rapide. Il permet un gène ou une région simple sur un cosmid à substituer par un repère sélectionnable Bi-fonctionnel (ayant un E. coli et un repère de fumigatus de A.). - [lu une méthode rapide pour produire des suppressions de gène dans le protocole de fumigatus d'aspergille]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis

Une méthode sensible pour la détection de l'apoptosis par écoulement simple Cytometry de laser. - [méthode sensible lue de A pour la détection de l'apoptosis par laser simple FACS]

Catégorie : Protocoles de Purification d'Acide Nucléique

Protocole pour une méthode en pas à pas pour la préparation simultanée de l'ADN, de l'ARN, et de la protéine des cellules et des tissus. Le rendement d'ARN total dépend de la source de tissu ou de cellules, mais il est généralement dans l'intervalle de 4-7 µg/mg commençant le tissu ou 5-10 cellules µg/106.  IMPORTANT : Préparez tous les réactifs utilisés dans ce protocole avec du pyrocarbonate diéthylique (H2O DEPC)-traité. - [lu une méthode en pas à pas pour la préparation simultanée de l'ADN, de l'ARN, et de la protéine des cellules et du tissu]

Catégorie : La génétique et Génomique : Protocoles de Genotyping : Protocoles De Détection de Mutation

Décrit une croix expérimentale dans les souris qui peuvent être employées pour définir et tracer la germe-ligne induite mutations qui tracent à un chromosome simple. La croix est une modification et une extension d'un écran récessif de mutagénèse de trois-génération conventionnelle. Inclut : La Mutagénèse Multipliant Le Plan ; Contraintes de Consomic ; Produire des Mutations ; Se produire et femelles de Genotyping G2 ; Progéniture de Genotyping G3 ; Progéniture de Phenotyping G4 ; etc.. - [lu un écran visé pour détecter les mutations récessives qui ont le protocole quantitatif d'effets]

Catégorie : Protocoles de PCR : Protocoles Renversés de Transcriptase RT-PCR

Le protocole emploie une polymérase thermostable simple d'ARN pour exécuter la haut-spécificité RT-PCR.  Une réaction à hautes températures de droite est suivie de l'amplification de PCR de l'ADN en utilisant un poymerase thermostable simple, l'enzyme de l'ARN PCR de GeneAmp AccRT des biosystèmes appliqués.  La haute température de la réaction de droite met en valeur la spécificité de l'attache d'amorce et réduit également la structure secondaire dans le descripteur, augmentant de ce fait l'efficacité de la polymérisation. - [amplification lu de l'ARN : Transcription renversée à hautes températures et amplification d'ADN avec du magnésium]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Un procédé intégrateur pour l'identification et la mesure d'Apoptosis. Yingyu Cui Lab/Group : Laboratoire principal national de l'ingénierie de protéine et de la génétique d'usine, université des sciences de vie. J'ai téléchargé un procédé intégrateur par lequel un résultat relativement satisfaisant peut être obtenu après une étape simple de culture de cellules et de traitement passager de cellules, puis détection avec différents instruments. Ceci raccourcit le temps d'expérience. - [Lu Un Procédé Intégrateur Pour l'Identification et La Mesure d'Apoptosis]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement : Protocoles d'Analyse de Données de Cytometry D'Écoulement

Fournit plusieurs approches pour couler analyse de données cytometry. Des déterminations de fréquence basées sur l'analyse des histogrammes de fluorescence de simple-paramètre et des traçages de découpe de duel-paramètre sont présentées. Des étapes sont décrites pour calculer des valeurs pour des taux signal/bruit quand l'amplification logarithmique est utilisé pour la collecte de données. - [analyse lue de protocole de données de Cytometry d'écoulement]

Catégorie : Protocoles Viraux de Manipulation : Protocoles Bactériophages de la Manipulation M13

Une méthode rapide pour analyser la taille de l'ADN simple-échouée des recombinants M13. - [l'analyse lue du bactériophage de recombinaison M13 copie le protocole]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement

Une méthode sensible pour la détection de l'apoptosis par l'écoulement simple de laser cytometry. La méthodologie inclut : Souillant pour la détection de l'apoptosis, procédé de souillure direct, procédé de souillure indirect, protocole pour l'usage de l'actinomycine D (ANNONCE) sur les échantillons qui ont été souillés avec 7-AAD pour l'apoptosis et fixés en formaldéhyde. - [Protocole Lu de Détection d'Apoptosis Par Écoulement Cytometry de Single Laser]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement : Protocoles d'Apoptosis Cytometry

Un procédé intégrateur par lequel un résultat relativement satisfaisant peut être obtenu après une étape simple de culture de cellules et de traitement passager de cellules, puis détection avec différents instruments. Ceci raccourcit le temps d'expérience. - [protocole lu d'identification et de mesure d'Apoptosis]

Catégorie : Analyses de Gène de Journaliste : Protocoles d'Analyse de B-Galactosidase

Cette analyse est utilisée en travaillant avec des vecteurs bactériophages portant le gène bêta-gallon. Si l'événement de clonage perturbe une copie normalement fonctionnelle du gène dans le vecteur les plaques résultantes sembleraient claires dans l'analyse. Si les bactériophages contiennent un gène bêta-gallon fonctionnel ils formeront les boucles bleues autour de leurs plaques. N'importe quelle contrainte qui n'est pas un overproducer de bêta-gallon fonctionnera en tant que bactéries de centre serveur d'indicateur ; une copie chromosomique simple du gène n'est pas un problème. - [analyse lue pour le bactériophage contenant le gène de Bêta-galactosidase]

Catégorie : Signalisation Des Protocoles de Transduction de Signal

L'analyse des cytokines dans des supernatants de culture de tissu décrit un alignement liquide de suspension pour la quantification des cytokines en supernatants ou sérum de culture de tissu. Avec cette analyse, il est possible de profiler le niveau des cytokines multiples dans un puits simple. Le principe de cette analyse de cytokine est semblable à un sandwich à saisie immunoassay. Inclut : Préparation pour l'analyse, l'analyse de Cytokine, les réactifs et les matériaux. - [analyse lue de Cytokines dans culture Supernatants de tissu]

Catégorie : Immunologie : Immunoassays

La Bio-Plex analyse de cytokine utilise un alignement liquide de suspension pour la quantification des cytokines en supernatants ou sérum de culture de tissu. L'utilisation de ce micro-titre 96-well plateformatted l'analyse, il est possible de profiler le niveau des cytokines multiples dans un puits simple. - [analyse lue de Cytokines dans le protocole de Supernatants de culture de tissu]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles In vitro de Reconstitution

Ce protocole décrit une analyse in vitro de transcription qui tient compte d'un rond simple de transcription de chromatin assemblé in vitro. Comparer l'activité d'un coactivator de récepteur ou de transcriptional dans une analyse qui mesure seulement un rond simple de transcription avec les résultats des ronds multiples de la transcription peut aider à élucider le mécanisme du lancement de transcriptional par ces facteurs. - [Assay:Single lu rond de la transcription in vitro des descripteurs assemblés de Chromatin en utilisant une cellule hela ex]

Catégorie : Protocoles De Clonage

Les adaptateurs sont des oligonucléotides synthétiques bicaténaires courts qui portent un site interne d'identification de ribonucléase de restriction et des queues simple-échouées à une ou les deux extrémités. Des adaptateurs sont utilisés aux sites de restriction de change aux termini des molécules linéaires d'ADN. Ils peuvent être achetés dans phosphorylé et unphosphorylated des formes. - [lu attachant des adaptateurs au protocole saillant de termini]

Catégorie : Protocoles d'elegans de C. : Protocoles de la génétique d'elegans de C.

Le procédé est mutagenize une grande population des vers avec trimethylpsoralen et la irradiation PAR UV, a installé 1152 sous-populations, ADN d'écran faite à partir de cette bibliothèque pour des suppressions dans les gènes spécifiques par PCR emboîté, et récupérer alors les vers simples portant les suppressions par un procédé de sib-sélection. - [protocole lu de coup de grâce de gène d'elegans de C.]

Catégorie : Protocoles De Cytogénétique : Protocoles In situ d'Hybridation

Choix de la bonne méthode étiquetante pour votre expérience d'hybridation. Inclut : Méthodes étiquetantes homogènes pour l'ADN ; Méthodes étiquetantes homogènes pour l'ARN ; Stabilité d'interaction de sonder-cible ; Étiqueter non radioactif des oligonucléotides ; Bicaténaire contre les sondes simple-échouées. - [lu choisissant la bonne méthode étiquetante pour votre expérience d'hybridation]

Catégorie : Protocoles De Biologie d'Usine : Protocoles de la Génétique d'Arabidopsis

La méthode est pour préparer des chromosomes des bourgeons simples de fleur du thaliana de A.. Elle ne détruit pas les usines permettant la détermination de leur nombre de chromosome dans tout le développement. Inclut : Préparations d'Arabidopsis ; Préparation de chromosome ; Souillure des Chromosomes. - [diffusions lues de chromosome des bourgeons de fleur de protocole de thaliana d'Arabidopsis]

Catégorie : Protocoles Viraux de Manipulation : Protocoles Bactériophages de la Manipulation M13

Le protocole décrit trois méthodes standard pour construire des recombinants du bactériophage M13 : (1) ligature de l'ADN d'insertion à un vecteur linéarisé, préparé par le fendage de M13 rf avec de l'enzyme simple de restriction ; (2) en utilisant la phosphatase alkaline pour supprimer art de l'auto-portrait-ligation du vecteur linéarisé, et (3) en utilisant M13 rf fendu avec deux enzymes de restriction pour le clonage directionnel. - [le clonage lu dans le bactériophage M13 dirige le protocole]

Catégorie : Protocoles d'ADN : ADN Ordonnançant des Protocoles

Le protocole décrit d'abord la préparation de vecteur et, ensuite, décrit la préparation d'insertion.  Essentiel d'avoir un excellent vecteur afin de produire une bibliothèque d'ordonnancement.  Le protocole utilise le coliphage mâle-spécifique M13 comme vecteur d'ordonnancement.  M13 est un bactériophage filamenteux avec un génome simple-échoué et circulaire.  M13 est largement répandu comme vecteur parce que beaucoup de versions sont disponibles commercialement et parce que M13 a certains avantages. - [construction lue du protocole d'ordonnancement de bibliothèque]

Catégorie : Protocoles De Cytogénétique

CGH fournit une image complète de tous les gains et pertes chromosomiques dans une expérience simple. Contrairement à l'analyse de bandes, CGH n'exige d'aucune préparation des chromosomes de métaphase des cellules d'être analysée (qui dans certains types de tumeur peuvent être difficiles ou même impossible). - [détection lue des déséquilibres chromosomiques en utilisant DOP-PCR et hybridation comparative de Genomic (CGH)]

Catégorie : Protocoles D'Électrophorèse d'Acide Nucléique : Protocoles D'Électrophorèse d'ADN : L'électrophorèse d'ADN dans l'agarose gélifie des protocoles

La méthode la plus commode et généralement la plus utilisée pour visualiser l'ADN en gels d'agarose souille avec du bromure d'éthidium fluorescent de colorant.  Le bromure d'éthidium peut être employé pour détecter les deux acides nucléiques bicaténaires de singleand (ADN et ARN).  Cependant, l'affinité du colorant pour l'acide nucléique simple-échoué est relativement basse et le rendement fluorescent est comparativement pauvre. - [la détection lue de l'ADN dans l'agarose gélifie le protocole]

Catégorie : La génétique et Génomique : Protocoles de la Génétique de Cancer : Protocoles Simples de Conformational de Brin Polymorphism(SSCP)

polymorphisme de conformational de Simple-brin (SSCP), une de plusieurs méthodes employées pour balayer des segments de l'ADN pour des mutations, exploits les différences électrophorétiques dans les mobilities entre le mutant simple-échoué et sauvage-type DNAs. - [détection lue des mutations par protocole de polymorphisme de Conformational de Simple-brin]

Catégorie : Protocoles De Mycètes : Protocoles de la Génétique de Mycètes

Procédure habituelle d'opération pour la détermination du fardeau fongique de tissu utilisant la réaction en chaîne de polymérase en temps réel quantitative (QPCR). Cette procédure habituelle d'opération fournira des informations sur la façon dont évaluer le fardeau fongique de tissu des animaux infectés au moyen d'une copie simple (FKS) ou du gène multicopie (ARN 18s) pour évaluer le nombre de noyaux fongiques de cellules actuels. - [détermination lue du fardeau fongique de tissu utilisant la réaction en chaîne de polymérase en temps réel quantitative]

Catégorie : Protocoles d'ADN : ADN Ordonnançant des Protocoles : Dideoxy Négocié Ordonnançant des Protocoles

Le protocole décrit l'ADN-ORDONNANCEMENT des descripteurs simple-échoués d'ADN dans les réactions catalysées par Sequenase. - [Lu Dideoxy-négocié Ordonnançant des Réactions En utilisant Le Protocole de Polymérase d'ADN de Bactériophage T7 (Sequenase)]