protocoles sensibles

Catégorie : Protocoles Moléculaires de Biologie : Protocoles d'Hydrate de carbone

La méthode permet la détection et la quantification de l'activité de glycosyltransferase en utilisant un procédé ELISA-basé et des anticorps monoclonaux hydrate de carbone-spécifiques. Évite l'utilisation des substrats radioactifs. Bruce A. Macher~Professor de chimie et de biochimie, université de l'Etat de San Francisco, San Francisco, CA - [lu une analyse ELISA-Basée sensible pour Glycosyltransferases]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis

Une méthode sensible pour la détection de l'apoptosis par écoulement simple Cytometry de laser. - [méthode sensible lue de A pour la détection de l'apoptosis par laser simple FACS]

Catégorie : Protocoles de Biologie d'Usine : Protocoles de Génétique Végétale

AFLP a été conçu comme méthode extrêmement sensible pour que l'empreinte digitale d'ADN soit utilisée dans une variété de zones. Nous employons cette technologie pour produire des repères basés par ADN pour des gènes de clonage impliqués dans des réponses phototropic à de plus hautes usines qui seulement ont été identifiées génétiquement par phénotype de mutant. Le protocole inclut : Produisez de la population F2 (ou F3) de recombinaison polymorphe ; Isolez l'ADN genomic ; Restriction de l'ADN ; Ligature des adaptateurs ; Pré-amplification de l'ADN de descripteur ; AFLP-PCR ; etc... - [AFLP Lu Pour Le Clonage de position]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles de Mitochondries

La technique de JC-1 souillant a été développée avec l'intention pour détecter DY dedans intact, cellules viables. À cette fin JC-1 agit en tant que repère d'activité mitochondrique, depuis la formation des J-agrégats, qui donnent l'émission rouge, est réversible. Les cellules avec haut DY sont ceux qui forment des J-agrégats, de ce fait montrant la fluorescence rouge élevée. D'autre part, les cellules avec bas DY sont ceux dans lesquelles JC-1 met à jour (ou re-saisissez) la forme monomérique, de ce fait qui montrent seulement la fluorescence verte. - [analyse lue de potentiel mitochondrique de membrane avec la sonde fluorescente sensible JC-1]

Catégorie : Microbiologie : Concentration en antibiotiques dans les medias livre

Concentrations et solutions fonctionnantes d'actions et qui les antibiotiques sont sensibles léger. Préparation des solutions courantes et de l'outil de calculatrice pour calculer des concentrations pour les solutions courantes. Biologie Moléculaire Pratique. - [antibiotiques lus et outils courants de calculatrice d'antibiotiques]

Catégorie : Protocoles de Drosophile

les réactifs Enzyme-joints donnent l'excellente sensibilité et utilisent un photomicroscope simple pour la détection. Un intervalle des enzymes est disponible, mais pour souiller in situ, la peroxydase de raifort conviendra à la plupart des besoins. La diaminobenzidine (TAPE) est l'un des substrats les plus sensibles pour la peroxydase de raifort. Elle rapporte un produit brun intense qui est insoluble en eau et alcool. Elle peut être rendue plus sensible en ajoutant des sels en métal tels que le cobalt ou le nickel à la solution de substrat. - [ajout lu d'anticorps aux spécimens de drosophile et détection en utilisant le protocole Enzyme-Joint de réactifs]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement

Une méthode sensible pour la détection de l'apoptosis par l'écoulement simple de laser cytometry. La méthodologie inclut : Souillant pour la détection de l'apoptosis, procédé de souillure direct, procédé de souillure indirect, protocole pour l'usage de l'actinomycine D (ANNONCE) sur les échantillons qui ont été souillés avec 7-AAD pour l'apoptosis et fixés en formaldéhyde. - [Protocole Lu de Détection d'Apoptosis Par Écoulement Cytometry De Single Laser]

Catégorie : Signalisation Des Protocoles de Transduction de Signal : Protocoles de Mesure de Calcium

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations de calcium cytoplasmique libre, [ Ca2+]i, en 264.7 cellules CRUES adhérentes cultivées, en utilisant un format de plat 96-well. Cet objectif est accompli en utilisant le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, fluo-3, qui imprègne des membranes de cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à sa forme acide de Ca2+-sensitive. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire en 264.7 cellules CRUES]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement : Protocoles Intracellulaires de Mesure d'Ion

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations du calcium cytoplasmique libre (Ca2+) en 264.7 cellules CRUES cultivées. Cet objectif est accompli avec le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, fluo-3, qui imprègne des cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à sa forme acide de Ca2+-sensitive. La fluorescence est mesurée avec le temps avec les cellules adhérentes qui ont été lavées exempt du colorant extracellulaire. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire en 264.7 cellules CRUES pour le protocole d'écran de Ligand]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement : Protocoles Intracellulaires de Mesure d'Ion

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations de calcium cytoplasmique libre, [ Ca2+]i, en 264.7 cellules CRUES adhérentes cultivées, en utilisant un format de plat de puits 96-. Cet objectif est accompli en utilisant le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, fluo-3, qui imprègne des membranes de cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à sa forme acide de Ca2+-sensitive. La fluorescence pour les cellules adhérentes est mesurée avec le temps en utilisant un bas lu d'un plat 96-well, avec les cellules qui ont été lavées. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire en 264.7 cellules CRUES chargées avec protocole Fluo-3]

Catégorie : Signalisation Des Protocoles de Transduction de Signal : Protocoles de Mesure de Calcium

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations de calcium cytoplasmique libre, [ Ca2+ ], en 264.7 cellules CRUES adhérentes cultivées, en utilisant un format du plat 96-well. Cet objectif est accompli en utilisant le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, fura-2, qui imprègne des membranes de cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à sa forme acide de Ca2+-sensitive. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire en 264.7 cellules CRUES chargées avec Fura-2 (avec FLEXstation)]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement : Protocoles Intracellulaires de Mesure d'Ion

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations de calcium cytoplasmique libre, [ Ca2+]i, en 264.7 cellules CRUES adhérentes cultivées, en utilisant un format de plat de puits 96-. Cet objectif est accompli en utilisant le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, fura-2, qui imprègne des membranes de cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à sa forme acide de Ca2+-sensitive. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire en 264.7 cellules CRUES chargées avec protocole Fura-2]

Catégorie : Signalisation Des Protocoles de Transduction de Signal : Protocoles de Mesure de Calcium

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations du calcium cytoplasmique libre (Ca2+) en cellules de B spléniques de souris dans l'absence et la présence des ligands pour des récepteurs de surface de cellules. Cet objectif est accompli avec le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, Fluo-3, qui imprègne des cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à sa forme acide sensible de Ca2+. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire en cellules de B suspendues]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement : Protocoles Intracellulaires de Mesure d'Ion

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations du calcium cytoplasmique libre (Ca2+) en cellules de B spléniques de souris dans l'absence et la présence des ligands pour des récepteurs de surface de cellules. Cet objectif est accompli avec le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, Fluo-3, qui imprègne des cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à son Ca2+ - forme acide sensible. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire dans le protocole suspendu de cellules de B]

Catégorie : Immunologie : Protocoles de Cellules de B

Ce protocole décrit une méthode pour évaluer des concentrations du calcium cytoplasmique libre (Ca2+) en cellules de B spléniques de souris dans l'absence et la présence des ligands pour des récepteurs de surface de cellules. Cet objectif est accompli avec le colorant fluorescent de Ca2+-sensitive, Fluo-3, qui imprègne des cellules comme ester et est hydrolysé dans la cellule à son Ca2+ - forme acide sensible. - [analyse lue de calcium libre intracellulaire dans le protocole suspendu de cellules de B]

Catégorie : Protocoles De la Livraison de Gène : Protocoles d'ADN Nanoparticles

Ce protocole décrit un procédé par étapes pour préparer les acides nucléiques encapsulés dans un polyéthylène glycol (nanolipoparticle PEG)-protégé (NLP) qui contiennent un lipide et un ligand bioresponsive. Ce processus fournit plusieurs avantages pour la livraison systémique de gène. Le temps in vivo de circulation est étendu. En outre, les bas lipides pH-sensibles mettent en valeur l'éclatement d'ADN et l'évasion endosomal. En conclusion, les ligands insérés dans la surface de NLP peuvent viser la livraison de gène aux tissus ou aux cellules spécifiques in vivo. - [vésicules neutres lues de lipide de charge visées par Bioresponsive pour le protocole systémique de la livraison de gène]

Catégorie : Protocoles De Transfection : Protocoles de Transfection de Phosphate de Calcium

Cette méthode de transfection de phosphate de calcium fonctionne mieux dans les lignes de cellules qui sont 1) fortement transformé et 2) l'adhérent (hela, U2OS, SAOS2, AdAH, NPC-KT et obtiennent de l'efficacité 20% à 100% de transfection selon la ligne de cellules). Des travaux bien pour des expériences passagères mais des précautions devraient être utilisés dans la conception et la traduction des expériences basées sur la discussion ci-dessous. Travaille en outre très bien pour produire des lignes stables de cellules. Cette méthode est tout à fait sensible à la quantité de plasmide d'entrée. - [Méthode Lue de Transfection de Phosphate de Calcium]

Catégorie : La génétique et Génomique : Protocoles de la Génétique de Cancer

Les investigateurs peuvent utiliser l'inactivation de chromosome de X (méthylation) pour déterminer le mode de clonality d'une tumeur ou d'une lésion premalignant dans les femelles. La technique est basée sur une enzyme de restriction et une analyse méthylation-sensibles d'un lieu polymorphe sur le chromosome de X. Les populations clonales de cellules montreront la "perte" de l'allèle non-méthylé après que sommaire de restriction. L'analyse peut être exécutée sur l'ADN récupérée de microdissected des échantillons. Le tissu congelé et le tissu fixe-encastré peuvent être utilisés. - [Clonality Lu - Protocole d'Analyse d'Inactivation de Chromosome de X]

Catégorie : Protocoles d'ELISA : Protocoles d'Analyse du Sandwich ELISA

Le sandwich ELISA à Cytokine sont des immunoassays sensibles d'enzymes qui peuvent spécifiquement détecter et dosent la concentration des protéines solubles de cytokine et de chemokine. Biosciences de BD - [Protocole Lu de Cytokine ELISA]

Catégorie : Protocoles De Technologie de RNAi : Protocoles d'elegans de RNAi C.

Le protocole emploie la protection de RNase pour détecter RNAs sous peu d'intervention (siRNAs) dans des préparations d'ARN à partir des elegans de Caenorhabditis.  SiRNAs peut également être détecté par la tache nordique.  Cependant, l'analyse de protection de RNase semble être plus sensible. - [détection lue de siRNA dans des elegans de C. en utilisant le protocole de protection de RNase]

Catégorie : Protocoles De Culture de Cellules : Protocoles de Culture de Cellules d'Insecte

En utilisant cette méthode, des cellules d'insecte devraient être adaptées au SFX-Insecte de HyQ dans 4-8 passages. Cependant, il y a quelques lignes de cellules et copie qui sont plus sensibles aux changements physiochimiques et alimentaires, et dans certains cas cela peut prendre plus longtemps que 8 passages pour l'adaptation. - [adaptation directe lue des cellules d'insecte au SFX-Insecte© de HyQ ? Support]

Catégorie : Protocoles De Détection d'Acide Nucléique

Le protocole décrit la quantitation de l'ADN en utilisant Hoechst 33258, un colorant fluorescent qui lie à l'ADN bicaténaire.  La fluorométrie est simple et plus sensible que la spectrophotométrie, et permet la détection des quantités de nanogram d'ADN.  L'analyse peut seulement être employée pour mesurer la concentration de DNAs dont les tailles excèdent ~1 KB, comme Hoechst 33258 grippages mal à de plus petits fragments d'ADN. - [quantitation fluorométrique lue de l'ADN en utilisant le protocole de Hoechst 33258]

Catégorie : Protocoles De E Coli : Protocoles de la génétique de E coli

Protocole pour la génération des suppressions de gène et des remplacements de gène dans Escherichia coli O157:H7 en utilisant un système des échanges allelic thermo-sensible. La technologie exige de l'ADN de flanquement d'être copiée dans un vecteur thermo-sensible mais le clone résultant permet la grande flexibilité pour davantage de modification de l'ordre de cible. Il donc est fortement convenu à l'étude des gènes dans lesquels plusieurs ronds des changements sont envisagés. - [génération lue des suppressions de gène et des remplacements de gène dans le protocole d'Escherichia coli]

Catégorie : Protocoles De Levure : Protocoles de la Génétique de Levure : Protocoles de YACs

Le protocole décrit des méthodes pour l'isolement de l'ADN d'une contrainte de S. cerevisiae portant un YAC de recombinaison. Puisque les YAC linéaires DNAs sont sensibles aux forces de cisaillement, des pipettes avec des extrémités larges devraient être utilisées pour transférer DNAs. La méthode convient à préparer l'ADN qui sera utilisée pour l'électrophorèse de gel d'agarose, éponger méridional, subcloning, la construction genomic de bibliothèque, le PCR, ou d'autres méthodes qui n'exigent pas l'ADN à poids moléculaire élevé intacte. - [croissance lue de S. cerevisiae et préparation de protocole d'ADN]

Catégorie : Protocoles Moléculaires de Biologie : Protocoles d'Hydrate de carbone

La chromatographie sur couche mince de chromatogrammes d'Immunostaining est une technique très sensible de détection des ligands fonctionellement actifs d'hydrate de carbone des récepteurs de protéine. Des structures d'hydrate de carbone sont détectées en glycolipides des mélanges complexes des molécules extraites à partir du tissu approprié de cible. Les protéines analysées peuvent être des anticorps, des protéines chimériques d'Ig, des selectins, des lectins, des toxines, et d'autres protéines obligatoires d'hydrate de carbone. John L. Magnani~GlycoTech Corporation, Rockville, Le Maryland - [Chromatogrammes Lus d'Immunostaining Des Glycolipides]