protocoles requis

Catégorie : Protocoles de Microscopie : Protocoles de Formation image de Vivre-Cellule

Protocole relatif aux détails requis de la construction de glissière de support pour une préparation scellée pour des observations à long terme des cellules cultivées. - [lu une préparation scellée pour des observations à long terme des cellules cultivées : Construction de Glissière de Support]

Catégorie : Protocoles de Protéine : Protocoles de Concentration de Quantitation de Protéine

Les analyses d'absorbance sont rapides et commodes, puisqu'aucun réactif ou incubation supplémentaire n'est exigé.  Aucune protéine standard ne doit être préparée.  L'analyse ne consomme pas la protéine.  La relation de l'absorbance à la concentration en protéine est linéaire.  Puisque les différentes protéines et les acides nucléiques ont des caractéristiques considérablement variables d'absorption il peut y avoir erreur considérable, particulièrement pour des inconnus ou des mélanges de protéine. - [analyse lue 280 nm d'absorbance]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Analyse de fragmentation d'ADN en utilisant l'électrophorèse Shailaja Kasibhatla et autres de gel d'agarose. Ce protocole fournit une méthode qualitative pour évaluer la mort de cellules en détectant des fragments d'ADN en utilisant l'électrophorèse de gel d'agarose. Un des dispositifs classiques de l'apoptosis est le fendage de l'ADN genomic dans les fragments oligonucleosomal représentés par des multiples du point d'ébullition 180-200. La visualisation de ces fragments peut faciliter en caractérisant un événement apoptotic. Peut être combiné avec des méthodes plus quantitatives. - [analyse lue de fragmentation d'ADN en utilisant électrophorèse de gel d'agarose (abonnement requis)]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Analyse de fragmentation d'ADN en utilisant l'analyse de BOURRAGE. Par Shailaja Kasibhatla et autres, l'analyse de BOURRAGE est basée sur étiqueter l'ADN nucléaire des cellules de cycle avec [ des échantillons de 3H]thymidine et de moisson sur des filtres de fibres de verre. Apoptosis produira des fragments d'ADN assez petits pour passer par le filtre de fibres de verre, ayant pour résultat la radioactivité diminuée de l'échantillon particulier. Le massacre communiqué par les cellules de cytotoxicité ou de cellules négocié par les lymphocytes cytotoxiques de T (CTL) peut également être mesuré par cette technique. - [Analyse Lue de Fragmentation d'ADN En utilisant l'Analyse de BOURRAGE (Abonnement Requis)]

Catégorie : Protocoles de Culture de Cellules : Protocoles Stériles de Technique

Des cellules mammifères cultivées sont utilisées intensivement dans des études de biologie de cellules ; elle exige un certain nombre de qualifications spéciales afin de pouvoir préserver la structure, la fonction, le comportement et la biologie des cellules. Cette unité décrit les qualifications de base exigées pour mettre à jour et préserver des cultures de cellules : technique aseptique, caractéristiques moyennes, passage, congélation et mémoire, récupération des stocks congelés, et compte des cellules viables. - [techniques de base lues pour le protocole de culture de tissu de cellules mammifères]

Catégorie : Isolement de cellules primaires et protocoles de culture : Protocoles de Culture de Cellules Mammifères

Des cellules mammifères cultivées sont utilisées intensivement dans des études de biologie de cellules ; elle exige un certain nombre de qualifications spéciales afin de pouvoir préserver la structure, la fonction, le comportement et la biologie des cellules. Cette unité décrit les qualifications de base exigées pour mettre à jour et préserver des cultures de cellules : technique aseptique, caractéristiques moyennes, passage, congélation et mémoire, récupération des stocks congelés, et compte des cellules viables. - [techniques de base lues pour le protocole de culture de tissu de cellules mammifères]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Analyse Biochimique de la Mort de Cellules En utilisant La Quantification Colorimétrique du Lancement de Caspase (Abonnement Requis). Analyse biochimique de la mort de cellules en utilisant la quantification colorimétrique du lancement Shailaja Kasibhatla et autres de Caspase, - [analyse biochimique lue de la mort de cellules en utilisant la quantification colorimétrique de lancement de Caspase (Subscrip]

Catégorie : Protocoles de Cytogénétique : Protocoles de Sonde Étiquetés Par Biotine de FOUILLE

Ce protocole décrit comment employer le Chem-Lien de FOUILLE pour étiqueter directement n'importe quelle ADN [ par exemple plasmides, produits de PCR, ADN préparée à partir du mRNA ] ou ARN (par exemple ARN total, mMRNA de poly(A)+). Le Chem-Lien de FOUILLE ou le Chem-Lien de biotine peut également être employé pour étiqueter des oligonucléotides. Inclut : Pureté requise des descripteurs de Chem-Lien de FOUILLE ; Dirigez étiqueter de FOUILLE du mRNA ou de l'ADN avec le Chem-Lien de FOUILLE ; Produit clé requis pour étiqueter direct de l'ADN ou de l'ARN ; Estimer le rendement d'acides nucléiques Creuser-étiquetés. - [étiqueter lu de Chem-Lien de l'ADN ou de l'ARN avec la FOUILLE ou le protocole de biotine]

Catégorie : Protocoles d'ADN : Protocoles de Bibliothèque d'ADN de Genomic

Cette étape récapitule comment construire une bibliothèque d'ADN dans un vecteur mammifère, en utilisant les kits commerciaux. Ces kits sont fournis par plusieurs constructeurs et incluent généralement tous les réactifs exigés. - [construction lue des bibliothèques d'ADN dans des vecteurs d'expression d'Eukaryotic pour la construction et le criblage]

Catégorie : Protocoles De Cellules de Tige

Cette dérivation de decribes de protocole des lignes de cellules de SOLIDES TOTAUX des blastocysts de souris de coitum du poteau 3.5-days (dpc). Le procédé est semblable à la dérivation des lignes embryonnaires de cellules de la tige (es). Cependant, la cadence de succès est considérablement plus haute, et moins d'expertise est exigée pour identifier les colonies pluripotent de cellules de SOLIDES TOTAUX. - [dérivation lue des lignes de cellules de tige de Trophoblast (SOLIDES TOTAUX) de protocole de Blastocysts]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Détection de phosphatidylsérine Externalization pendant l'Apoptosis. Shailaja Kasibhatla et autres. Un événement tôt dans l'apoptosis est l'externalization de la phosphatidylsérine (picoseconde), un phospholipide normalement limité au feuillet intérieur de la membrane de plasma. Cet événement apoptotic peut être surveillé en utilisant Annexin V, une protéine obligatoire Picoseconde-spécifique. Ce protocole utilise Annexin V-FITC comme sonde, mais la V-biotine d'Annexin est également disponible, et lier peut être indiqué en utilisant le streptavidin-FITC ou l'oth - [détection lue de phosphatidylsérine Externalization pendant l'Apoptosis (abonnement requis)]

Catégorie : Protocoles De Chromatographie : Chromatographie d'Affinité d'ARN d'ADN

La chromatographie d'affinité d'ADN, chromatographie d'affinité d'ADN peut être une méthode de bas-technologie en utilisant l'écoulement par gravité résine à 4°C, à une colonne jetable de chromatographie, et d'ADN à affinité préparée dans le laboratoire (voir la préparation d'une colonne d'affinité d'ADN). Incluez le glycérol 10-20% et 0.025-0.1% NP-40 dans les mémoires tampons de colonne pour supprimer des pertes dues à l'adsorption non spécifique de la protéine des surfaces. Chargez la protéine dans une mémoire tampon qui est compatible avec l'attache de la protéine à son site de cible. Keith Brocklehurst et autres - [chromatographie lue d'affinité d'ADN en utilisant l'écoulement par gravité - abonnement requis]

Catégorie : Protocoles Moléculaires de Biologie : Protocoles de Ligature d'ADN

Description et protocole des étapes requises pour joindre ensemble le plasmide et pour insérer des fragments pour créer un nouveau plasmide. Paul Kaufman, Univ La Californie. - [Ligature Lue d'ADN]

Catégorie : Protocoles De Biologie d'Usine : Protocoles de la Génétique d'Arabidopsis

Le SME est utilisé aux concentrations qui induisent des mutations multiples de point à chaque usine, telles que des allèles de mutant d'un lieu spécifique sont trouvés à une cadence de ~1 aux usines de 2000-5000 m2. Cette cadence élevée de la mutagénèse rend le criblage possible de relativement peu d'usines pour trouver ceux avec le phénotype d'intérêt, un avantage particulier si l'écran est laborieux ou si seulement un nombre restreint de gènes subissent une mutation au phénotype exigé. - [mutagénèse lue de SME de protocole de graine d'Arabidopsis]

Catégorie : Protocoles d'ADN Microarray

Ce protocole décrit les étapes exigées pour produire une ADN microarray. l'ADN Gène-spécifique est produite par amplification de PCR de plasmide épuré DNAs de descripteur à partir d'ESTs copié. Le produit de PCR est épuré par la précipitation d'éthanol, complètement resuspendue dedans - [protocole lu de fabrication pour ADN Microarrays]

Catégorie : Protocoles de PCR : Protocoles de Synthèse d'ADN

Ce système de synthèse d'ADN simplifie votre travail excessivement.  Tous les composants de réaction sont pré-mélangés et lyophylised.  Vous devez ajouter votre ARN et (pour les petits programmes Votre-Principaux) l'amorce.  Un autre avantage du système est un petit nombre d'étapes introduisantes à la pipette exigées, et a donc réduit le risque de contamination de RNase et de dégradation d'ARN. - [la première synthèse lue d'ADN de brin avec Prêt-À-Vont protocole de petits programmes]

Catégorie : Protocoles De Biologie d'Usine : Protocoles de la Génétique d'Arabidopsis

La génétique vers l'avant est employée pour identifier les gènes qui sont en particulier des processus biologiques impliqués. Par exemple, des gènes exigés pour la résistance de la maladie peuvent être trouvés en identifiant des mutants avec la résistance réduite ou accrue de la maladie, les gènes que le développement de fleur de commande peut être identifié en recherchant des mutants avec la morphologie modifiée de fleur, et des gènes encodant des enzymes pour la biosynthèse de tryptophane peuvent être identifiés en recherchant les mutants qui exigent le tryptophane exogène pour la croissance. - [la génétique vers l'avant lue dans Arabidopsis : Trouvant les mutations qui causent le protocole particulier de phénotypes]

Catégorie : Protocoles Compétents de Cellules

C'est un protocole facile et franc qui donne des efficacités de 106 à 107 cfu/mg de l'ADN de plasmide.  Une courbe de croissance est exigée pour chaque contrainte qui est préparée.
- [préparation de FCC de rendement élevé et protocole lus de Tx]

Catégorie : Protocoles d'Immunohistochemistry

Protocole pour immunohistochemistry sur les sections fixes et paraffine-encastrées. Cette méthode est largement appliquée et s'applique à la détection de la majorité accablante d'antigènes, à peu d'exceptions pour lesquelles la recherche enzymatique est exigée. La méthode utilise un agent de chélation fort, EDTA. Inclut : Double AP indirect ; Solution de se développer de AP ; Immunohistochemistry indirect avec de l'avidine-biotine et le HRP ; Solution de se développer de HRP. - [Immunohistochemistry lu sur le protocole fixe et Paraffine-Encastré de sections]

Catégorie : Protocoles De Purification d'Acide Nucléique : Protocoles d'Isolement d'ADN : Isolement d'ADN dans des protocoles de cellules mammifères

Méthode de choix quand de grandes quantités d'ADN mammifère sont exigées, par exemple, pour éponger méridional (isolement rapide de l'ADN mammifère, isolement rapide de l'ADN de levure, éponger méridional : Transfert capillaire de l'ADN aux membranes) ou pour la construction des bibliothèques genomic dans des vecteurs du bactériophage {lambda}.  Le µg approximativement 200 d'ADN mammifère, 100-150 KBS de longueur, est obtenu à partir de 5 x 107 cellules mammifères cultivées d'aneuploid (par exemple, cellules hela). - [isolement lu de l'ADN à poids moléculaire élevé des cellules mammifères en utilisant protéinase K et protocole de phénol]

Catégorie : Isolement de cellules primaires et protocoles de culture : Protocoles de Microdissection de Saisie de Laser

La technologie de LCM peut moissonner les cellules d'intérêt directement ou peut isoler les cellules spécifiques en coupant les cellules non désirées parties pour donner les populations enrichies histologiquement pures de cellules. Une variété d'applications descendant existent : ADN genotyping et perte--heterozygosity de l'analyse (LOH), etc... Le protocole fournit à une description complète des techniques de LCM, une emphase sur des extrémités et le conseil de dépannage dérivés des utilisateurs de LCM. Tout le temps requis pour effectuer ce protocole est en général 1-1.5 h. - [Lu Laser-capturez Le Protocole de Microdissection]

Catégorie : Protocoles De Culture de Cellules : Enregistrer de cellules et protocoles de congélation de cellules

Aucun traitement spécial n'est exigé pour préparer un lysate pour la collection active. Le procédé suivant devrait être utilisé pour l'entreposage à long terme du lambda copie dans les collections archivistiques. Le bactériophage sont dilués dans les medias contenant 7% DMSO et gelés à -80 degrés C. - [Protocole Bactériophage À long terme Lu de Mémoire de Lambda]

Catégorie : Protocoles De Microscopie

Protocole pour le volume de mesure. Le matériel exigé inclut : Microscope, Hemacytometer et lamelle, suspension de levure. - [Protocole De Mesure Lu de Volume]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Medias de Croissance de Culture de Cellules : Protocoles de Medias de Croissance de Culture de Cellules Mammifères

Protocole pour des medias et des solutions requis pour le protocole courant de culture de cellules d'es. - [medias lus et solutions requis pour le protocole courant de culture de cellules d'es]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Techniques de Culture de Cellules : Ligne Congélation de Cellules de Conservation

Après la propagation à 1 x 108 cellules, des cellules lymphoblastoïdes sont commodément enregistrées à -80 degrés C pour préserver l'ADN de poids dans les cellules jusqu'à ce que l'ADN soit purifiée. Ce procédé décrit les étapes exigées pour moissonner et geler le c - [méthode lue : Préparation de granule de cellules de lymphocyte pour la mémoire]