protocoles de protéines

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires : Protocoles de Microdissection de saisie de laser : Préparation de tissu pour des protocoles de LCM

Les cellules ou les tissus spécifiques d'isolats de LCM des échantillons ont monté sur des glissières de microscope. Les échantillons sont visualisés par un film thermoplastique qui est fixé à un couvercle de tube de microcentrifuge. La chaleur localisée, provoquée par l'application d'une impulsion de laser, fond la membrane aux cellules d'intérêt, qui peuvent alors être moissonnées pour l'analyse approfondie. L'ARN et les protéines peuvent être épurés des cellules d'isolement, permettant l'analyse détaillée de l'expression de gène. Ce protocole est divisé en trois étapes. - [Lu (LCM) : Préparation et sectionnement des blocs gelés de tissu et purification de l'ARN du cel d'isolement]

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires : Protocoles de Microdissection de saisie de laser

Protocole pour la 2-D électrophorèse de gel de polyacrylamide. Inclut : 50 mémoire tampon de lysis de ml IEF ; mémoire tampon courante de l'électrophorèse 10X (10 L) ; Actions d'acrylamide de 30% (1 litre) ; Séparation du gel d'acrylamide ; mémoire tampon I d'équilibration de 50 ml ; mémoire tampon II d'équilibration de 50 ml ; Mémoire tampon de transfert ; Préparation témoin ; Traitement de tissu ; Reswelling ; Préparez le gel d'acrylamide de gradient (9-18%) ; Transfert et ordonnancement des protéines. - [2-D protocole lu d'électrophorèse de gel de polyacrylamide]

Catégorie : Bio-informatique

Utilisant AFPredictor, on l'a expliqué que le `a commandé les carbones extérieurs (OSCs) sont un dispositif de distinction d'AFPs et, plus spécifiquement, leurs surfaces glace-contraignantes. AFPredictor a identifié AFPs d'un grand ensemble de structures avec la spécificité plus considérablement que de 99%. En outre, il a été employé pour identifier une protéine glace-contraignante originale en protégeant une bibliothèque des structures modelées par homologie basées sur des ordres de cDNA obtenus à partir du seigle d'hiver froid-acclimaté (cereale de sécale). - [Lu un protocole de calcul de criblage pour l'antigel/protéines Glace-Structurantes]

Catégorie : Protocoles d'ARN : purification ARN-contraignante de protéine

Une méthode élevée de purification d'affinité de rendement pour les protéines ARN-contraignantes spécifiques : isolement du facteur de normalisation de fer du placenta humain. Neupert 1990. - [Méthode élevée lue de purification d'affinité de rendement d'A pour les protéines ARN-contraignantes spécifiques.]

Catégorie : Protocoles de biologie moléculaire : Protocoles d'hydrate de carbone

Le protocole dissolvant de partition permet l'isolement des gangliosides de petits échantillons et des échantillons où les concentrations en ganglioside sont basses, particulièrement relativement à la concentration de souiller potentiellement des protéines et d'autres grandes espèces de poids moléculaire. Directeur de Stephan Ladisch, centre pour le Cancer et biologie de greffe, le centre médical national des enfants, Washington, C.C - [lu une méthode pour l'isolement de micro-échelle et la purification des gangliosides]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles de concentration de quantitation de protéine

Les analyses d'absorbance sont rapides et commodes, puisqu'aucun réactif ou incubation supplémentaire n'est exigé.  Aucune protéine standard ne doit être préparée.  L'analyse ne consomme pas la protéine.  La relation de l'absorbance à la concentration en protéine est linéaire.  Puisque les différentes protéines et les acides nucléiques ont des caractéristiques considérablement variables d'absorption il peut y avoir erreur considérable, particulièrement pour des inconnus ou des mélanges de protéine. - [Analyse lue 280 nanomètre d'absorbance]

Catégorie : Signalisation des protocoles de transduction de signal : Protocoles de MAPK

Protocoles de MAPK. Protéines phosphorylées de résolution de MAPK PAGE par SDS†« , analyse obligatoire de filtre pour le ³ lancé de MAPK Î - incorporation 32P de MAPK. Stratagene - [pdf lancé lu de Stratagene de protocoles de kinase de CARTE]

Catégorie : Protocoles viraux de culture et d'isolement : Protocoles viraux d'isolement

Le protocole décrit la grande réplique d'ADN de fragment par des protéines d'Adenovirus utilisant TP-DNA comme descripteur. - [Protocole lu d'analyse de réplique d'ADN d'adénovirus]

Catégorie : Protocoles d'ARN : purification ARN-contraignante de protéine

Purification magnétique de programme de Chromotography d'affinité des protéines ARN-contraignantes du cerveau de rat. Scaturro et autres 2003. - [Purification magnétique lue de programme de Chromotography d'affinité des protéines ARN-contraignantes du cerveau de rat.]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie d'affinité

La protéine de recombinaison ou un fragment bioactif chimiquement synthétisé est immobilisée sur la résine et employée comme une sonde pour saisir les protéines de interaction directement d'un extrait de cellules.  des protéines Affinité-épurées sont fractionnées par l'électrophorèse de gel et visualisées par la souillure de Coomassie.  Des protéines qui agissent l'un sur l'autre spécifiquement sont identifiées en comparant ce profil de gel à un obtenu à partir des lysates de cellules passés au-dessus d'une résine de commande manquant de la protéine immobilisée de sonde. - [Purification lue d'affinité des protéines de interaction du protocole de Lysates de cellules]

Catégorie : Protocoles de protéine : Électrophorèse de protéine

Un excellent guide sur l'analyse des protéines sur des gels de SDS-PAGE, par la souillure avec le colorant bleu de coomassie et l'analyse occidentale de tache. Analyse des gels de protéine (SDS-PAGE). David R. Caprette, université de riz. - [Analyse lue de gels de protéine (SDS-PAGE)]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles d'immunoprécipitation

des complexes d'Anticorps-antigène sont retirés de la solution par l'ajout d'une forme insoluble d'une protéine obligatoire d'anticorps telle que la protéine A, la protéine G ou le deuxième anticorps. Protocoles d'immunoprécipitation/méthodologie et information de formation technique. P.J. ha - [analyse lue des protéines par Immunoprecipitation]

Catégorie : Protocoles de Proteomic : 2-D Électrophorèse de gel

Analyse des protéines utilisant électrophorèse de gel de petit format la 2D. Laboratoire d'argent comptant - [analyse lue des protéines utilisant électrophorèse de gel de petit format la 2D]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement : Protocoles d'Apoptosis Cytometry

Annexin V, appartenant à une famille récemment découverte des protéines, les annexins, avec des propriétés d'anticoagulant s'est avéré être un outil utile en détectant les cellules apoptotic puisqu'il lie préférentiellement négativement - les phospholipides chargés comme la picoseconde en présence de Ca2+ et affiche l'attache minimale à la phosphatidylcholine et au sphingomyeline. Change en asymétrie de picoseconde, qui est analysée en mesurant Annexin V liant à la membrane de cellules, ont été détectés avant les modifications morphologiques liées à… - [Protocole lu d'Annexin V]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles d'expression de protéine

Production de Baculovirus pour les protéines de recombinaison. Le protocole est une version modifiée du kit de Baculogold de pharmingen. Brian Dynlacht. Laboratoire de tinctorial de Mike A. - [Production lue de Baculovirus pour les protéines de recombinaison]

Catégorie : Protocoles d'organelle de cellules : Protocoles sous-cellulaires de fractionnement : Protocoles d'isolement de Peroxisome

Peroxisomes de plus hauts eukaryotes, glycosomes des kinetoplastids, et glyoxysomes des usines sont des organelles microbody relatives qui remplissent des fonctions métaboliques différentes conçues en fonction leurs environnements cellulaires. Le rapport évolutionnaire étroit de ces organelles le plus clair est démontré par l'économie des protéines impliquées dans l'importation et la biogénèse de protéine de matrice. glycosome peut être visualisé comme ramification de la lignée peroxisomal avec des fonctions métaboliques supplémentaires, spécifiquement glycolysi - [biogénèse et fonction lues de Peroxisomes et de Glycosomes]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles de concentration de quantitation de protéine : Protocoles d'analyse de protéine de Bradford

Inclut des étapes d'abréviations, de fond, et de procédé utilisant BSA. L'analyse de protéine de Bradford (1) est l'une de plusieurs méthodes simples utilisées généralement pour déterminer la concentration en protéine totale d'un échantillon.  La méthode est basée sur l'attache proportionnelle du colorant Coomassie aux protéines. L'analyse est colorimétrique ; à mesure que la concentration en protéine augmente, la couleur de l'échantillon d'essai devient plus foncée.  Coomassie absorbe à 595 nanomètre.  - [Analyse lue de concentration en protéine de Bradford]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement

Le protocole utilise les anticorps spécifiques couplés à un de quatre fluorochromes : isothiocyanate de fluorescéine (FITC), R-phycoérythrine (PE), chlorophylle-un de peridinin (PcP), et allophycocyanin (RPA). Ces fluorochromes peuvent être employés simultanément pour souiller et analyser les configurations d'expression de quatre protéines différentes dans le même échantillon. Les populations souillées par fluorochrome de cellules sont analysées utilisant un cytometer d'écoulement de duel-laser de FACSCalibur. - [Caractérisation lue des cellules par protocole de Cytometry d'écoulement]

Catégorie : Immunologie : Protocoles de cellules de B

Des fluorochromes peuvent être employés simultanément pour souiller et analyser les configurations d'expression de quatre protéines différentes dans le même échantillon. Les populations souillées par fluorochrome de cellules sont analysées utilisant un cytometer d'écoulement de duel-laser de FACSCalibur. - [Caractérisation lue des cellules par protocole de Cytometry d'écoulement]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles immobilisés de chromatographie d'affinité d'ion en métal

La chromatographie d'affinité immobilisée d'ion en métal (IMAC) exploite l'affinité d'une molécule pour les ions chélatés en métal.  L'histidine d'acide aminé actuelle en beaucoup de protéines forme des complexes avec des ions en métal de transition tels que Cu2+, Zn2+, Ni2+ et Fe3+.  Sepharose™ de chélation coulent rapidement avec un ion immobilisé approprié en métal donc maintiendra sélectivement des protéines avec de l'histidine exposée. - [la sépharose de chélation lue coulent rapidement le protocole]

Catégorie : Protocoles d'ADN : Protocoles d'immunoprécipitation de chromatine

La méthode pour identifier les cibles genomic d'ADN-lier factorise. L'analyse d'immunoprécipitation de chromatine (puce) sur le microarray de haut-débit a basé des méthodes pour découvrir des régions genomic occupées par les protéines ADN-contraignantes humaines. Oberley et Farnham. - [Puce lue sur le pdf de protocole de puce]

Catégorie : Immunologie : Protocoles d'immunoprécipitation : Protocoles d'immunoprécipitation de chromatine

Le protocole décrit l'utilisation de la technologie d'immunoprécipitation de chromatine (puce) d'analyser des interactions des protéines ou des complexes de protéine avec de l'ADN in vivo. Dans cette approche, le matériel est fixé avec du formaldéhyde pour préserver l'ADN-protéine et les associations de protéine-protéine, les cellules sont lysées, et la chromatine est coupée et solubilisée. La suspension de chromatine immunoprecipitated avec de l'anticorps contre les protéines d'intérêt, et les fragments coimmunoprecipitated d'ADN sont analysés. - [Immunoprécipitation lue de chromatine (puce) de protocole de complexes de protéine]

Catégorie : Epigenetics et protocoles de méthylation : Protocoles d'immunoprécipitation de chromatine de puce

Protocole d'immunoprécipitation de chromatine pour la chromatine de modification d'histone et les protéines associées. Roderick O’Sullivan et martres de Joost. Des expériences d'immunoprécipitation de chromatine (puce) sont par habitude exécutées dans beaucoup de laboratoires autour du monde pour examiner l'occupation des protéines ou des modifications de chromatine au-dessus des bouts droits particuliers du génome. - [Protocole lu d'immunoprécipitation de chromatine pour la chromatine de modification d'histone et les protéines associées]

Catégorie : Protocoles d'ADN : Protocoles d'immunoprécipitation de chromatine

Traçant des interactions de Protein/DNA par Cross-Linking Examining la distribution des protéines de Telomeric et de réparation d'ADN par ChrIP et ACP en temps réel - [protocole Chromatine-IP (ChrIP) lu]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie sur colonne

Protocole de chromatographie sur colonne d'exclusion de taille. Pdf. Dans ce protocole vous apprendrez comment utiliser trois types de chromatographie sur colonne : Exclusion de filtration ou de taille au gel (sec), échange ionique (le CEI), et affinité (courant alternatif) afin de purifier des protéines et des enzymes basées sur les propriétés physiques de ces biomolécules. Université Arizona, biochimie. - [Protocole lu de chromatographie sur colonne]