protocoles de protéine

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires : Protocoles de Microdissection de saisie de laser : Préparation de tissu pour des protocoles de LCM

Protocole pour la fixation d'éthanol de 70% pour la reprise de l'ADN, de l'ARN, et de la protéine. - [Fixation lue d'éthanol de 70% pour la reprise de l'ADN, de l'ARN, et du protocole de protéine]

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires

Protocole pour la fixation d'éthanol de 70% pour la reprise de l'ADN, de l'ARN et de la protéine. - [Fixation lue d'éthanol de 70% pour la reprise de l'ADN, de l'ARN, et du protocole de protéine]

Catégorie : Bio-informatique

Utilisant AFPredictor, on l'a expliqué que le `a commandé les carbones extérieurs (OSCs) sont un dispositif de distinction d'AFPs et, plus spécifiquement, leurs surfaces glace-contraignantes. AFPredictor a identifié AFPs d'un grand ensemble de structures avec la spécificité plus considérablement que de 99%. En outre, il a été employé pour identifier une protéine glace-contraignante originale en protégeant une bibliothèque des structures modelées par homologie basées sur des ordres de cDNA obtenus à partir du seigle d'hiver froid-acclimaté (cereale de sécale). - [Lu un protocole de calcul de criblage pour l'antigel/protéines Glace-Structurantes]

Catégorie : Protocoles de biologie d'usine : Protéines végétales, peptides et antigènes

Le pH est un paramètre important contrôlant beaucoup de voies métaboliques et signalantes en cellules vivantes. Les indicateurs de pH fluorescents de recombinaison (pHluorins) ont hérité la mode pour la surveillance pH cellulaire. Ils sont dérivés de l'Aequorea le plus populaire Victoria GFP (Poids du commerce-GFP). Ici, nous présentons un journaliste fluorescent original de pH que la protéine de l'orange seapen le gurneyi de Ptilosarcus (Pinte-GFP) et comparons ses propriétés aux pHluorins pour l'expression et l'usage aux usines. - [Lu une sonde fluorescente originale de pH pour l'expression aux usines]

Catégorie : Protocoles d'organelle de cellules : Protocoles sous-cellulaires de fractionnement

Le protocole décrit les systèmes dans lesquels on permet aux les membranes de flotter par un gradient de densité d'une zone dense de chargement. C'est un format idéal. - [Lu un gradient Self-generated pour distinguer un emplacement cytosolique ou de membrane de grand complexe de protéine]

Catégorie : Protocoles de purification d'acide nucléique

Protocole pour une méthode en pas à pas pour la préparation simultanée de l'ADN, de l'ARN, et de la protéine des cellules et des tissus. Le rendement d'ARN total dépend de la source de tissu ou de cellules, mais il est généralement dans l'intervalle de 4-7 µg/mg commençant le tissu ou 5-10 cellules µg/106.  IMPORTANT : Préparez tous les réactifs utilisés dans ce protocole avec du pyrocarbonate diéthylique (DEPC) - H2O traité. - [Lu une méthode en pas à pas pour la préparation simultanée de l'ADN, de l'ARN, et de la protéine des cellules et du tissu]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles de concentration de quantitation de protéine

Analyse d'absorbance à 280 nanomètre.  Cette méthode est juste comme commode que pour l'absorbance à 280 nanomètre.  Il peut préférer s'il y a de contamination excessive par les acides nucléiques, puisque les acides nucléiques absorbent le rayonnement très petit à 205 nanomètre.  L'établissement de la longueur d'onde est un peu rusé puisque 205 nanomètre est exact sur l'épaule de la crête de protéine. - [Analyse lue 205 nanomètre d'absorbance]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles de concentration de quantitation de protéine

Les analyses d'absorbance sont rapides et commodes, puisqu'aucun réactif ou incubation supplémentaire n'est exigé.  Aucune protéine standard ne doit être préparée.  L'analyse ne consomme pas la protéine.  La relation de l'absorbance à la concentration en protéine est linéaire.  Puisque les différentes protéines et les acides nucléiques ont des caractéristiques considérablement variables d'absorption il peut y avoir erreur considérable, particulièrement pour des inconnus ou des mélanges de protéine. - [Analyse lue 280 nanomètre d'absorbance]

Catégorie : Protocoles de protéine : Précipitation Procols de protéine

Précipitation d'acétone de protéine de la mémoire tampon RLT ou de la mémoire tampon RLT. QIAGEN. - [Précipitation lue d'acétone de protéine de mémoire tampon RLT ou de mémoire tampon RLT]

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires : Protocoles de culture de cellules mammifères

Il y a beaucoup de voies d'adapter des variétés de cellule aux medias sans sérum. On présente cinq méthodes qui sont conçues pour adapter des hybridomes à un support sans protéines. Ces protocoles peuvent exiger quelques modifications pour votre variété de cellule et conditions particulières. - [Lu adaptant des cellules à un protocole sans sérum d'environnement]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie d'Immunoaffinity

Purification d'anticorps (antisérum ou ascite par la chromatographie de Protein A/G). Les espèces et le type de protéine G d'IgG de moutons de la protéine G de la souris IgG3 de la protéine A ou de la protéine G de la souris IgG2 de la protéine G de la souris IgG1 de la protéine A ou de la protéine G d'IgG de lapin d'agarose d'anticorps mais lie faiblement la protéine G d'IgG de rat mais la protéine d'IgG de cobaye de grippages faiblement une protéine d'IgG de chien une protéine d'IgG de porc de la protéine G d'IgG de chèvre une protéine G. d'IgG de hamster. Par Millipore. - [Purification lue d'anticorps d'affinité de la chromatographie de protéine A/G]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie d'affinité

La protéine de recombinaison ou un fragment bioactif chimiquement synthétisé est immobilisée sur la résine et employée comme une sonde pour saisir les protéines de interaction directement d'un extrait de cellules.  des protéines Affinité-épurées sont fractionnées par l'électrophorèse de gel et visualisées par la souillure de Coomassie.  Des protéines qui agissent l'un sur l'autre spécifiquement sont identifiées en comparant ce profil de gel à un obtenu à partir des lysates de cellules passés au-dessus d'une résine de commande manquant de la protéine immobilisée de sonde. - [Purification lue d'affinité des protéines de interaction du protocole de Lysates de cellules]

Catégorie : La génétique et génomique : Protocoles de la génétique de Cancer

Décrivez les méthodes pour identifier et doser la transcription spécifique d'A/E9a dans t (8 ; 21) échantillons de patients relativement à la transcription d'AML1-ETO encodant 752 la protéine intégrale bien connue de l'acide aminé AML1-ETO (EA). Inclut : Préparation d'ARN et RT-PCR ; Quantitation relative de l'AE9a et des transcriptions des EA. - [Lu un Isoform alternativement épissé de t (8 ; 21) La transcription favorise Leukemogenesis]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de titrages de l'enzyme

Le protocole fournit une voie rapide d'analyser pour l'activité ARN-dépendante d'ARN polymérase (RdRP) dans des échantillons de protéine brute.  Les produits de transcription de RdRP restent à l'origine pendant la chromatographie sur papier. - [Lu une analyse pour le protocole ARN-Dépendant d'activité d'ARN polymérase]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Un procédé intégrateur pour l'identification et la mesure d'Apoptosis. Laboratoire/groupe de Yingyu Cui : Laboratoire principal national de l'ingénierie de protéine et du génie génétique d'usine, université des sciences de la vie. J'ai téléchargé un procédé intégrateur par lequel un résultat relativement satisfaisant peut être obtenu après une étape simple de culture de cellules et de traitement passager de cellules, puis détection avec différents instruments. Ceci raccourcit le temps d'expérience. - [Lu un procédé intégrateur pour l'identification et la mesure d'Apoptosis]

Catégorie : Protocoles de biologie moléculaire : Protocoles d'hydrate de carbone

La chromatographie d'affinité liquide de haute performance (HPLAC) est un procédé utile pour l'étudier des interactions entre la protéine obligatoire d'hydrate de carbone et leurs ligands. Les impératifs techniques sont semblables à la CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE SOUS HAUTE PRESSION conventionnelle. HPLAC peut examiner et séparer les ligands normaux des mélanges biologiques complexes. WeiTong Wang~GlycoTech Corporation, Rockville, le Maryland - [analyse lue des Ligands d'oligosaccharide par la chromatographie d'affinité liquide de haute performance]

Catégorie : Protocoles de protéine : Électrophorèse de protéine

Un excellent guide sur l'analyse des protéines sur des gels de SDS-PAGE, par la souillure avec le colorant bleu de coomassie et l'analyse occidentale de tache. Analyse des gels de protéine (SDS-PAGE). David R. Caprette, université de riz. - [Analyse lue de gels de protéine (SDS-PAGE)]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles de phosphorylation de protéine

Méthodes de description de papier pour surveiller l'activité de kinase, spécificité de substrat de kinase†de investigation la « , la phosphorylation de examen dans le planta et la détermination des sites de phosphorylation dans une protéine. En outre, des considérations stratégiques pour le plan d'expérience et les variables seront discutées. Picotin de Scott C., le journal d'usine. - [Analyse lue de phosphorylation de protéine : pdf de méthodes et de stratégies]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles d'immunoprécipitation

des complexes d'Anticorps-antigène sont retirés de la solution par l'ajout d'une forme insoluble d'une protéine obligatoire d'anticorps telle que la protéine A, la protéine G ou le deuxième anticorps. Protocoles d'immunoprécipitation/méthodologie et information de formation technique. P.J. ha - [analyse lue des protéines par Immunoprecipitation]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles de purification d'anticorps

Purification d'anticorps (antisérum ou ascite par la chromatographie de Protein A/G). Préparation de mémoire tampon, préparation d'une protéine une colonne d'affinité d'agarose ou d'agarose de la protéine G, versant la colonne d'affinité de la protéine A/G, la préparation de l'antisérum ou l'ascite pour la chromatographie d'affinité, chromatographie d'affinité utilisant l'agarose de la protéine A/G. - [Purification lue d'anticorps - antisérum ou ascite par la chromatographie de Protein A/G]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie d'Immunoaffinity

PURIFICATION d'ANTICORPS par la chromatographie d'affinité. Par Beth, laboratoire UCSF de Mullins. À l'affinité purifiez les anticorps, produisent d'un bon nombre de lysate d'Escherichia coli qui contient votre antigène. Si la protéine peut tenir le gel dégelant, alors pour avancer et pour épurer la protéine du lysate d'Escherichia coli et pour la maintenir congelée jusqu'à ce que vous deviez la coupler à une colonne de Ch-sépharose. - [PURIFICATION d'ANTICORPS lue par la chromatographie d'affinité]

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles de purification d'anticorps

PURIFICATION D'ANTICORPS SUR LA COLONNE DE LA PROTÉINE G. Laboratoire de Jorker, Caltech. - [PURIFICATION d'ANTICORPS lue SUR la COLONNE de PROTÉINE G]

Catégorie : Immunologie : Antigène

Conception d'antigène et purification de sérums. Antisérums faits sur commande. Sigma Aldrich. Sélection et conception de peptide, stratégie de accouplement # choisissant le porteur de protéine, peptides antigéniques multiples (cartes), choix de serveur, adjuvant, immunisation, et sérums collection, purification d'antisérums, précipitation de sulfate d'ammonium, protéine A/G, purification d'Immunoaffinity. - [Conception d'antigène et purification lues de sérums]

Catégorie : Protocoles de transfection : Protocoles stables de transfection

L'AFCS utilise la technologie antisens pour manipuler l'expression de protéine de signalisation dans les 264.7 CRUS macrophage-comme la variété de cellule. Ceci peut être réalisé par la transfection des oligonucléotides antisens gène-spécifiques (ASOs). Le procédé suivant implique la transfection d'ASOs dans les 264.7 cellules CRUES utilisant le réactif de transfection de FuGENE 6. Ultérieurement, le tout le ARN ou protéine d'isolement de ces cellules transfected peut être employé pour évaluer le niveau de la précipitation d'ADN messagère ou de protéine, respectivement. - [Transfection antisens lue d'oligonucléotide des 264.7 cellules CRUES avec FuGENE 6 dans un paraboloïde 24-Well]

Catégorie : Analyses de gène de journaliste : Protocoles d'analyse de B-Galactosidase

La méthode décrit comment un extrait brut est préparé, et l'activité est normalisée à la quantité de protéine analysée. Cette méthode est particulièrement appropriée à comparer les cellules qui sont développées dans des conditions très différentes ou qui ont différents milieux génétiques. - [Analyse lue de ß-Galactosidase en levure : Analyse des extraits de brut]