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Il y a en fait deux choses, sciences et opinions ; l'ancien engendre la connaissance, la dernière ignorance. médecin grec des ~Hippocrates (c460-c.377 BCE).
Recherchez les résultats : phosphate
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Traitement de phosphatase alkaline du protocole d'ADN
de vecteur du bactériophage lambda -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3976 Catégorie : Protocoles Viraux De Manipulation : Protocoles Bactériophages de Manipulation De Lamda Le déplacement des groupes 5'-phosphate des termini internes des bras du bactériophage {lambda} est employé pour empêcher art de l'auto-portrait-ligation et pour supprimer le fond des bactériophages nonrecombinant pendant le clonage. - [traitement lu de phosphatase alkaline de protocole d'ADN de vecteur de bactériophage lambda] |
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CALCIUM PHOSPATE TRANSFECTION DES CELLULES HUMAINES -
HTTP://OMRF.OUHSC.EDU/~FRANK/$APO4TRANSFE.HTML Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocole de Transfection de Cellules Transfection simple en utilisant le chlorure de calcium et le phosphate.Dr. Contreseing. Programme d'arthrite et d'immunologie, ville d'Oklahoma. Base de Recherches Médicales. - [CALCIUM Lu PHOSPATE TRANSFECTION DES CELLULES HUMAINES] |
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Phosphate de calcium Tranfection pour des cellules de
MDCK -
http://www.its.caltech.edu/%7Ebjorker/Ca-P_Transfection_MDCK.pdf Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocole de Transfection de Cellules Le protocole pour le transfection de cellules, le criblage de clone et la cellule de cueillette copie. Groupe de Bjorkman. La Californie I.T - [phosphate de calcium lu Tranfection pour des cellules de MDCK] |
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Méthode de Transfection de phosphate de calcium -
http://www.flemingtonlab.com/Protocols/CalciumPhosphateTransf.pdf Catégorie : Protocoles de Transfection : Protocoles de Transfection de Phosphate de Calcium Cette méthode de transfection de phosphate de calcium fonctionne mieux dans les lignes de cellules qui sont 1) fortement transformé et 2) l'adhérent (hela, U2OS, SAOS2, AdAH, NPC-KT et obtiennent de l'efficacité 20% à 100% de transfection selon la ligne de cellules). Des travaux bien pour des expériences passagères mais des précautions devraient être utilisés dans la conception et la traduction des expériences basées sur la discussion ci-dessous. Travaille en outre très bien pour produire des lignes stables de cellules. Cette méthode est tout à fait sensible à la quantité de plasmide d'entrée. - [Méthode Lue de Transfection de Phosphate De Calcium] |
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Phosphate de calcium Transfection des neurones dans la
culture primaire -
http://gweb1.ucsf.edu/labs/finkbeiner/Protocol/protocol_list/Ca_P_TX_R.shtml Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocole de Transfection de Cellules Protocole et méthodes neuronaux détaillés de transfection de cellules. Steven Finkbeiner. UCSF. - [phosphate de calcium lu Transfection des neurones dans la culture primaire] |
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Transfection Calcium-phosphate-négocié des cellules
avec de l'ADN à poids moléculaire élevé de Genomic -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3872 Catégorie : Protocoles de Transfection : Protocoles de Transfection de Phosphate de Calcium Ce protocole, est basé sur la méthode vénérable de Graham et de van der Eb (1973). Le procédé est employé principalement pour produire des lignes stables des cellules portant les copies chromosomiquement intégrées du transfected l'ADN. - [Transfection Calcium-phosphate-négocié lu des cellules avec de l'ADN à poids moléculaire élevé de Genomic] |
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Transfection Calcium-phosphate-négocié des cellules
d'Eukaryotic avec le plasmide DNAs -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3871 Catégorie : Protocoles de Transfection : Protocoles de Transfection de Phosphate de Calcium Le phosphate de calcium forme un précipité insoluble avec de l'ADN, qui attache à la surface de cellules et est prise dans les cellules par endocytosis. Le protocole est facilement adapté pour l'usage avec d'autres types de cellules, adhérentes et nonadherent. Ce protocole est une version modifiée d'une méthode éditée par la Jordanie et autres (1996) qui les méthodes calcium-phosphate-basées rigoureusement optimalisées de transfection pour les cellules chinoises d'ovaire de hamster et la ligne 293 des cellules embryonnaires humaines de rein. - [Transfection Calcium-phosphate-négocié lu des cellules d'Eukaryotic avec plasmide DNAs] |
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CaPO4 Transfection pour des cellules de Chromaffin -
http://medicine.ucsd.edu/hypertension/list_of_protocols/15_CaPO4_Transfect_sw.htm Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocole de Transfection de Cellules Transfection de l'ADN dans des cellules en utilisant le phosphate de PIBS, d'ADN, de CaCl2 et de calcium. Daniel o'Connor, cellule d'UCSD Chromaffin et recherche d'hypertension - [CaPO4 lu Transfection pour des cellules de Chromaffin] |
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Analyse colorimétrique pour identifier les gènes
putatifs de Ribofuranosylaminobenzene 5'-Phosphate Synthase - http://76.162.25.80/bpo/arts/1/48/m48.pdf Catégorie : Protocoles de E Coli : Protocoles de la génétique de E coli Protocole pour que l'analyse colorimétrique identifie les gènes putatifs de Ribofuranosylaminobenzene 5'-Phosphate Synthase. La production du synthase actif de RFAP du thermautotrophicus de Methanothermobacter a été réalisée par le coexpression du gène MTH0830 avec un chaperone moléculaire. C'est la première identification biochimique directe d'un gène de methanogen ce des codes pour un synthase actif de RFAP. - [analyse colorimétrique lue pour identifier les gènes putatifs de Ribofuranosylaminobenzene 5'-Phosphate Synthase] |
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Construisant et exprimant les protéines de fusion de
GFP -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/abstract/2006/30/pdb.prot4649 Catégorie : Analyses de Gène de Journaliste : Protocoles d'Analyse de GFP Le protocole suivant peut être utilisé pour le développement des lignes stables de cellules exprimant des protéines de fusion de GFP. Bien que les procédures optimales de transfection (par exemple, phosphate de calcium, electroporation, ou FuGENE 6 [ la Science appliquée de Roche ]) changent selon le type de cellules, ce procédé général de transfection a été réussi pour le transfection stable de hela, des cellules A-431, U2OS, BHK, et HT1080. - [construction lue et exprimer des protéines de fusion de GFP] |
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Détection de phosphorylation de protéine dans les
tissus et le protocole de cellules -
https://catalog.invitrogen.com/index.cfm?fuseaction=iProtocol.unitSectionTree&objectId=6677CD53C088A0E7A7B22F422FFCDC12&treeNodeId=9E6639B7FED0C828BBFE860A8E957694 Catégorie : Immunologie : Protocoles d'Immunoprécipitation : Immunoprécipitation des protocoles radioactifs de cellules Le plus puissant et convaincre la méthode de déterminer si une protéine spécifique est phosphorylée d'une façon physiologiquement appropriée doit analyser la phosphorylation in situ. Le procédé décrit implique d'incuber les cellules cultivées (par exemple, les cultures neuronales primaires ou transfected des cellules) ou les préparations de tissu (par exemple, parts hippocampal) de [ 32P]orthophosphate, qui est alors pris par les cellules ou les tissus et incorporé à la position de ?-phosphate du triphosphate d'adénosine. - [détection lue de phosphorylation de protéine dans les tissus et le protocole de cellules] |
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Hybridation in situ d'ADN avec un système fluorescent
Phosphatase-Basé alkalin de détection -
http://www.roche-applied-science.com/PROD_INF/MANUALS/InSitu/pdf/ISH_124-126.pdf Catégorie : Protocoles De Cytogénétique : Protocoles de Sonde Étiquetés Par Biotine de FOUILLE Le protocole décrit ici un procédé indirect de détection de sensibilité élevée pour les sondes Creuser-étiquetées d'hybridation. Le procédé emploie les composants du positionnement fluorescent de détection de HNPP pour former un précipité fluorescent de HNPP (phosphate de 2-hydroxy-3-naphthoic acid-2'-phenylanilide) et pour jeûner TR rouge au site de l'hybridation. Inclut : Hybridation in situ avec les sondes Creuser-étiquetées ; Détection des sondes Creuser-étiquetées ; Microscopie de fluorescence. - [hybridation in situ lue d'ADN avec un système fluorescent Phosphatase-Basé alkalin de détection] |
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Hybridation in situ d'ADN avec un protocole
fluorescent Phosphatase-Basé alkalin de système de détection -
http://www.roche-applied-science.com/PROD_INF/MANUALS/InSitu/pdf/ISH_124-126.pdf Catégorie : Protocoles De Modification d'Acide Nucléique : La Biotine de FOUILLE Étiquetée Sonde des Protocoles Le protocole décrit un procédé indirect de détection de sensibilité élevée pour les sondes Creuser-étiquetées d'hybridation. Le procédé emploie les composants du positionnement fluorescent de détection de HNPP pour former un précipité fluorescent de HNPP (2-hydroxy-3-naphthoic acid-2’- phosphate de phenylanilide) et pour jeûner TR rouge au site de l'hybridation. Ce procédé peut être employé pour détecter des ordres de copie simple aussi petits que 1 KB sur les chromosomes humains de métaphase. de de de de - [hybridation in situ lue d'ADN avec un protocole fluorescent Phosphatase-Basé alkalin de système de détection] |
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ADN Transfection par Electroporation -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3751 Catégorie : Protocoles De Transfection : Protocoles Stables de Transfection Des champs électriques pulsés peuvent être employés pour présenter l'ADN dans une grande variété de cellules animales. Electroporation fonctionne bien avec les lignes de cellules qui sont réfringentes à d'autres techniques, telles que le coprecipitation de phosphate-ADN de calcium. Mais, comme avec d'autres méthodes de transfection, les conditions optimales pour electroporating l'ADN dans les lignes non essayées de cellules doivent être déterminées expérimentalement. - [ADN lue Transfection par Electroporation] |
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ADN Transfection En utilisant Le Protocole de
Polybrene -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3875 Catégorie : Protocoles De Transfection Polybrene et DMSO peuvent être employés pour réaliser la transformation stable de plusieurs types de cellules par plasmid DNA. Le rendement de transformants est jusqu'à 15-fold plus grand avec Polybrene qu'avec le coprecipitation de phosphate-ADN de calcium. Cependant, il n'y a aucune différence entre les deux méthodes dans l'efficacité de la transformation des cellules par l'ADN à poids moléculaire élevé. - [ADN Lue Transfection En utilisant Le Protocole de Polybrene] |
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Protocole Nordique d'Hybridation -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3723 Catégorie : Protocoles De Détection d'Acide Nucléique : Protocoles Épongeants d'Acide Nucléique Protocole pour l'hybridation nordique. Le protocole décrit comment effectuer l'hybridation nordique à la raideur élevée dans les phosphate-SDS-MÉMOIRES tampons. Bien qu'une grande variété de formats soient disponible, l'hybridation est habituellement exécutée dans les sacs, les bouteilles de rouleau, ou des boîtes en plastique thermoscellables, comme décrit ici. - [Protocole Nordique Lu d'Hybridation] |
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Diagramme de solution tampon de phosphate (sodium) -
http://wheat.pw.usda.gov/~lazo/methods/lazo/phosphat.html Catégorie : Medias de mémoires tampons, et solutions Diagramme de solution tampon de phosphate (sodium). Facile d'installer des mémoires tampons en utilisant ce diagramme. Gerard R. Lazo - [diagramme lu de solution tampon de phosphate (sodium)] |
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Proclamez un protocole pour les cultures primaires de
HUVECs -
http://www.huvec.com/documents/Protocol-HUVECs.pdf Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles Endothéliaux de Cellules Protocole pour les cultures primaires de HUVECs. Inclut : Mémoires tampons et réactifs (sérum foetal de veau, solution tampon de phosphate saline (PBS), collagènase, mémoire tampon pour l'économie et transport des cordons ombilicaux, du milieu de culture) ; Culture de cellules. - [protocole lu pour les cultures primaires de HUVECs] |
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Hybridation méridionale des sondes radioactives aux
acides nucléiques immobilisés sur le protocole de membranes -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot4044 Catégorie : Protocoles De Détection d'Acide Nucléique : Protocoles Épongeants d'Acide Nucléique Protocole pour l'hybridation méridionale des sondes radioactives aux acides nucléiques immobilisés sur des membranes. Le protocole décrit comment effectuer des hybridations méridionales à la raideur élevée dans les mémoires tampons phosphate-SDS. Bien qu'une grande variété de formats soient disponible, la plupart des hybridations méridionales sont effectuées dans les sacs, les bouteilles de rouleau, ou des boîtes en plastique thermoscellables. - [hybridation méridionale lue des sondes radioactives aux acides nucléiques immobilisés sur le protocole de membranes] |
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Neurones de Hippocampal cultivés par Transfecting
avec un plasmide d'Actine-GFP -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/abstract/2007/3/pdb.prot4664 Catégorie : Protocoles de Transfection : Protocoles de Transfection de Phosphate de Calcium Ce protocole décrit deux méthodes de transfection pour exprimer l'actine GFP-étiquetée dans des neurones primaires. La méthode du réactif DOTAP (diagnostic de lipide de Roche) produit actine-GFP-exprimer les neurones hippocampal qui survivent bien pendant de longues périodes dans la culture. La méthode de phosphate de calcium peut être utilisée aux neurones de transfect qui déjà s'étaient développés sur des lamelles in vitro. Des cellules de Transfected appropriées à la formation image peuvent être obtenues en cultures jusqu'à 15 jours in vitro. - [neurones lus de Hippocampal cultivés par Transfecting avec un plasmide d'Actine-GFP] |
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Transfection des neurones de Hippocampal avec de l'ADN
de plasmide en utilisant le phosphate de calcium Coprecipitation -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/abstract/2006/1/pdb.prot4445 Catégorie : Protocoles de Transfection : Protocoles de Transfection de Phosphate de Calcium Ce protocole décrit le transfection de l'ADN de plasmide dans les neurones hippocampal primaires en utilisant le coprecipitation de DNA/calcium-phosphate (CaPO4). Le pH précis du support de transfection et la période d'incubation des cellules avec le coprécipité sont critiques pour le transfection reproductible et efficace. Une fois que ces paramètres sont optimalisés pour un plasmide donné, la méthode est facilement adaptée pour le transfection d'autres lignes établies de cellules. - [Transfection lu des neurones de Hippocampal avec de l'ADN de plasmide en utilisant phosphate de calcium Coprecipitation] |
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Transfection passager dans les cellules 293T -
http://www.cbrinstitute.org/labs/sauteur/protocols/jun_293T.html Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocole de Transfection de Cellules Transfection passager dans le transfection de protocole des cellules 293T, phosphate de calcium, overexpression, production de protéine. Juin Takagi - [transfection passager lu dans cellules 293T] |
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Analyse occidentale en utilisant le protocole
chimioluminescent du substrat CSPD de phosphatase alkaline -
http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/16/pdb.prot4256 Catégorie : Protocoles Occidentaux de Tache : Protocoles de Méthodes de Détection d'Antigène L'utilisation du phosphate chemiluminescence-producteur du substrat 3-(4-methoxyspiro[1,2-dioxetane-3,2'-tricyclo-[3.3.1.1(3,7)]decan]-4-yl)phenyl de phosphatase alkaline (AMPPD, également connue sous le nom de phosphate d'adamantyl-1,2-dioxetane), ou ses parents de dioxetane fournit une augmentation substantielle selon les substrats colorimétriques d'excédent de sensibilité et les méthodes radiochimiques actuel utilisés pour la détection des complexes d'antigène-anticorps immobilisés sur le nylon ou les membranes de PVDF. - [analyse occidentale lue en utilisant le protocole chimioluminescent de substrat CSPD de phosphatase alkaline] |
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Membrane H+ - Protocole de Plasma de Levure d'Essai De
Toxcity d'ATPASE -
http://embryo.ib.amwaw.edu.pl/invittox/prot/34.htm Catégorie : Protocoles De Levure Des membranes de plasma sont isolées dans la levure saccharomyces cerevisiae. Le mur de cellules est au commencement assimilé par le helicase, suivi de lysis et d'homogénéisation hypoosmotic. Des membranes sont préparées par centrifugation différentielle ultérieure. L'activité du H+-ATPase est alors déterminée en mesurant la quantité de phosphate inorganique libérée à partir du triphosphate d'adénosine. - [Membrane Lue H+ - Protocole de Plasma de Levure d'Essai de Toxcity d'ATPASE] |
Protocole de Transfection de Cellules de DrosophileUne méthode simple de transfection de cellules de culture de tissu de drosophile. |
Protocole Traduit In vitro d'Analyse de Kinase de MOS De XenopusProtocole Traduit In vitro d'Analyse de Kinase De MOS de Xenopus. En réponse à la progestérone, les oocytes non mûrs de Xenopus mûrissent aux oeufs qui peuvent être fertilisés. La protéine kinase de MOS est essentielle pour la maturation d'oocyte, très probablement en raison de sa capacité de lancer la cascade de kinase de CARTE. Cette cascade de kinase de CARTE mène par la suite au lancement de Cdc2/cyclin B et entrée dans la phase de M. Dans ce protocole, la kinase étiquetée de MOS est traduite in vitro, immunopurified, et utilisé dans une analyse de kinase. |
Protocole Bactériophage Immobilisé De Sélection d'Anticorps d'AntigèneUn protocole pour la sélection des anticorps bactériophages en utilisant l'antigène immobilisé. Cette méthode décrit la sélection des anticorps des bibliothèques d'anticorps de bactériophage qui identifient un antigène spécifique. La bibliothèque bactériophage d'affichage des particules bactériophages d'anticorps-affichage est exposée à l'antigène attaché à un substrat de solide (Nunc immuno ? tubes). Les particules bactériophages avec l'affinité pour l'antigène lient à l'antigène immobilisé et sont choisies parmi la bibliothèque du bactériophage exprimant des anticorps. |
Cystéine de couplage contenant des peptides à la protéine de porteur pour l'immunisation et l'anticorps de PolyclonalCe protocole est utilisé dans la production des anticorps de polyclonal qui identifient un ordre de peptide d'intérêt. |
Protocole de Ligature d'ADNLe protocole de ligature d'ADN décrit ici contient les étapes exigées pour se joindre ensemble en utilisant des fragments d'ADN de plasmide d'enzymes de ligase et d'ADN d'insertion afin de créer un nouveau plasmide. Ce nouveau plasmide ligaturé peut être transformé ensuite en bactéries compétentes pour produire l'ADN pour mini, le Midi ou l'isolement de maxi-prep. |
Analyse d'Activité De Kinase de l'Histone H1Protocole d'Analyse d'Activité De Kinase de l'Histone H1. Ce protocole décrit analyser l'activité de kinase d'une kinase putative en utilisant l'histone H1 comme substrat. L'histone H1 est le substrat canonique de kinase dans ce type d'analyse. La phosphorylation de l'histone H1 est évaluée par l'électrophorèse de gel de SDS-SDS-Polyacrylamide suivie de l'autoradiographie. |
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