protocoles opposés

Catégorie : Protocoles de Clonage : Protocoles de Mutagénèse

Protocole pour la mutagénèse in vitro en utilisant les descripteurs bicaténaires d'ADN. Deux oligonucléotides sont employés pour amorcer la synthèse d'ADN catalysée par une polymérase thermostable de haute fidélité sur un descripteur dénaturé de plasmide. Les deux oligonucléotides contiennent la mutation désirée et occupent les mêmes commencer et positions de fin sur les brins opposés de l'ADN de plasmide. - [Mutagénèse In vitro Lue En utilisant Les Descripteurs Bicaténaires d'ADN : Sélection des mutants avec DpnI]

Catégorie : Protocoles de Protozoaires de Tetrahymena

Les cellules mûres de Tetrahymena des types d'accouplement opposés sont affamées dans des états appropriés de sel. Les types d'accouplement sont alors combinés au costimulate par l'interaction de cellule-cellule. Les paires lâches et affermissent alors, des paires irréversibles de cellules des types d'accouplement opposés forment. Cette méthode a uniformément comme conséquence un pourcentage élevé de l'appareillement (80% habituellement plus grand que) et de bon synchrony. - [induction lue de conjugaison dans le protocole de Tetrahymena]

Catégorie : PCR En temps réel : l'Information En temps réel de PCR

Les oligonucléotides avec les colorants fluorescents aux extrémités opposées fournissent un système éteint de sonde utile pour détecter l'hybridation de produit de PCR et d'acide nucléique. Livak et autres, 1995. - [les oligonucléotides lus avec les colorants fluorescents aux extrémités opposées fournissent un système éteint de sonde utile pour d]

Catégorie : Protocoles Viraux de Manipulation : Protocoles Bactériophages de Manipulation de Lamda

Beaucoup de vecteurs de remplacement (par exemple, la série d'EMBL, {lambda}2001, et {lambda}DASH) contiennent une série de sites de restriction, disposée dans des orientations opposées, à chaque extrémité du fragment central de stuffer. Digestion de ces vecteurs avec deux de restriction de rendements d'enzymes bras différents à gauche et à droite, un fragment de stuffer, et des segments courts des sites polycloning. Ceux-ci peuvent facilement être retirés des bras par la précipitation différentielle avec la chromatographie d'isopropanol ou de tourner-colonne. - [préparation lue de l'ADN de bactériophage lambda fendue avec le protocole de deux enzymes de restriction]

Catégorie : Protocoles de Détection d'Acide Nucléique : Protocoles Épongeants d'Acide Nucléique

Protocole pour éponger méridional : transfert simultané de l'ADN à partir d'un gel simple d'agarose à deux membranes. L'ADN peut être simultanément transférée à partir des côtés opposés d'un gel simple d'agarose à deux membranes.  Le transfert bidirectionnel se produit rapidement au début, mais ralentit bientôt pendant que le gel devient déshydraté.  Puisque l'efficacité du transfert est basse, la méthode fonctionne mieux quand les ordres de cible sont présents dans la concentration élevée - [éponger méridional lu : Transfert simultané de l'ADN à partir d'un gel simple d'agarose au protocole de deux membranes]