protocoles de gène

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires : Protocoles de Microdissection de saisie de laser : Préparation de tissu pour des protocoles de LCM

Les cellules ou les tissus spécifiques d'isolats de LCM des échantillons ont monté sur des glissières de microscope. Les échantillons sont visualisés par un film thermoplastique qui est fixé à un couvercle de tube de microcentrifuge. La chaleur localisée, provoquée par l'application d'une impulsion de laser, fond la membrane aux cellules d'intérêt, qui peuvent alors être moissonnées pour l'analyse approfondie. L'ARN et les protéines peuvent être épurés des cellules d'isolement, permettant l'analyse détaillée de l'expression de gène. Ce protocole est divisé en trois étapes. - [Lu (LCM) : Préparation et sectionnement des blocs gelés de tissu et purification de l'ARN du cel d'isolement]

Catégorie : Protocoles d'ARN : ' l'amplification rapide de RACE 3 du cDNA termine des protocoles

Le cycle d'ACP fait un pas, protocole utilisant le transcriptase renversé de l'exposant II (technologies de la vie) et la polymérase de Taq, l'amorce spécifique de gène, amorce de l'adaptateur T17 et une amorce d'adaptateur. Dr.Dawson, Nottingham. - [Lu ' l'amplification 3 rapide du cDNA termine le protocole (de RACE)]

Catégorie : Protocoles d'ACP : protocoles de synthèse de cDNA

Pour produire de « 3 ' - clones partiels de cDNA d'extrémité », ADN messagère renversé-est transcrit utilisant une amorce « hybride » (Qtotal, quart) qui se compose de deux bases mélangées (GATC/GAC suivi [T] de 17) et d'un ordre de base de l'oligonucléotide seuls 35 (QI-QO).  L'amplification est alors exécutée utilisant une amorce contenant une partie de cet ordre (Qouter, Qo) (qui lie maintenant à chaque cDNA à ses 3 ' - extrémité) et une amorce dérivée du gène d'intérêt, GSP1 (amorce gène-spécifique 1). - [' - Amplification lue de cDNA d'extrémité 3 utilisant le protocole classique de RACE]

Catégorie : Protocoles d'ACP : protocoles de synthèse de cDNA

Pour produire de « 5 ' - clones partiels de cDNA d'extrémité » utilisant RACE classique, les produits de premier-brin sont produits par la transcription renversée (extension d'amorce) d'une amorce gène-spécifique connue (GSP-RT).  Puis, un poly (A) la queue est ajoutée utilisant le deoxynucleotidyltransferase terminal (Tdt) et le dATP.  L'amplification est effectuée utilisant trois amorces. - [' - Amplification lue de cDNA d'extrémité 5 utilisant le protocole classique de RACE]

Catégorie : Protocoles de mycètes : Protocoles d'aspergille

La technique se sert d'une contrainte d'Escherichia coli exprimant l'operon de redΑßΓ sous la commande d'un instigateur induisible. Ceci permet à la contrainte d'effectuer la recombinaison homologue avec le point d'ébullition seulement 50-60 de l'ordre homologue. Le procédé n'exige aucune ligature d'ADN et est très rapide. Il permet un gène ou une région simple sur un cosmide à substituer par un repère sélectionnable bifonctionnel (ayant Escherichia coli et un repère de fumigatus d'A.). - [Lu une méthode rapide pour produire des suppressions de gène dans le protocole de fumigatus d'aspergille]

Catégorie : Protocoles de biologie d'usine : Protocoles de génétique végétale

Le protocole décrivant l'agrobactérie a négocié le transfert de gènes par l'intermédiaire des hypocotyls. - [Transfert de gènes Agrobactérie-Négocié lu par l'intermédiaire de protocole de Hypocotyls]

Catégorie : Protocoles d'ACP : protocoles de synthèse de cDNA

Une amorce d'oligodeoxynucleotide hybridée à l'ADN messagère est étendue par un ADN polymérase ARN-dépendant pour créer une copie de cDNA qui peut être amplifiée par ACP.  Selon le but de l'expérience, l'amorce pour la synthèse de cDNA de premier-brin peut être spécifiquement conçue pour hybrider à un gène particulier de cible, ou une amorce générale telle qu'oligo (décollement) peut être utilisée pour amorcer la synthèse de cDNA essentiellement de tous les mRNAs mammifères - [amplification lue de cDNA produite par la transcription renversée du protocole d'ADN messagère]

Catégorie : Protocoles de biologie d'usine : Culture de tissu d'Arabidopsis

Expériences incluses pour l'analyse de l'épiderme d'usine : Induction stéroïde d'expression de gène dans Arabidopsis ; Moules de reproduction et fontes de l'épiderme d'usine. - [Analyse lue des expériences d'épiderme d'usine]

Catégorie : La génétique et génomique : Protocoles de la génétique de Cancer

Anatomie d'une étude comparative d'expression de gène. Inclut : Choix des populations de cellules ; extraction d'ADN messagère et transcription renversée ; Écriture de labels fluorescente des cDNA ; Hybridation à un Microarray d'ADN ; Balayage de l'alignement hybridé ; Interprétation de l'image balayée. - [Anatomie lue d'une étude comparative d'expression de gène]

Catégorie : Protocoles de Microarray : Protocoles d'analyse de Microarray

L'information sur l'anatomie d'une étude comparative d'expression de gène.  Inclut : Choix des populations de cellules ; extraction d'ADN messagère et transcription renversée ; Écriture de labels fluorescente des cDNA ; Hybridation de microarray d'ADN ; Balayage de l'alignement hybridé ; Interprétation de l'image balayée. - [Anatomie lue d'une étude comparative d'expression de gène]

Catégorie : Protocoles de technologie de RNAi

Le protocole décrit la préparation d'un vecteur de shRNA-expression d'entrée de Gateway.  Ce processus est précédé par la conception et la synthèse du sens gène-spécifique de cible et des oligonucléotides antisens qui, quand recuit, constituera une cassette de shRNA. - [Recuit, clonage, et ordonnancement lus des éditeurs de liens de shRNA dans le protocole de plasmides pEN_H1]

Catégorie : Protocoles de transfection : Protocoles stables de transfection

L'AFCS utilise la technologie antisens pour manipuler l'expression de protéine de signalisation dans les 264.7 CRUS macrophage-comme la variété de cellule. Ceci peut être réalisé par la transfection des oligonucléotides antisens gène-spécifiques (ASOs). Le procédé suivant implique la transfection d'ASOs dans les 264.7 cellules CRUES utilisant le réactif de transfection de FuGENE 6. Ultérieurement, le tout le ARN ou protéine d'isolement de ces cellules transfected peut être employé pour évaluer le niveau de la précipitation d'ADN messagère ou de protéine, respectivement. - [Transfection antisens lue d'oligonucléotide des 264.7 cellules CRUES avec FuGENE 6 dans un paraboloïde 24-Well]

Catégorie : Protocoles de mycètes : Protocoles d'aspergille

Compilation des mutants de nidulans d'A. mentionnant des noms, des enzymes affectées (ou des fonctions de gène), des attributions de liaison, des propriétés des mutants, et des noms des lieux correspondants dans le crassa de N. - [Mutants lus de nidulans d'aspergille]

Catégorie : Analyses de gène de journaliste : Protocoles d'analyse de B-Galactosidase

Cette analyse est utilisée en fonctionnant avec des vecteurs bactériophages portant le gène bêta-gallon. Si l'événement de clonage perturbe une copie normalement fonctionnelle du gène dans le vecteur les plaques en résultant sembleraient claires dans l'analyse. Si les bactériophages contiennent un gène bêta-gallon fonctionnel ils formeront les boucles bleues autour de leurs plaques. N'importe quelle contrainte qui n'est pas un overproducer de bêta-gallon fonctionnera en tant que bactéries de serveur d'indicateur ; une copie chromosomique simple du gène n'est pas un problème. - [Analyse lue pour le bactériophage contenant le gène de Bêta-galactosidase]

Catégorie : Protocoles de levure : Protocoles de la génétique de levure : Protocoles d'analyse de B-Galactosidase

Cette analyse est utilisée en fonctionnant avec des vecteurs bactériophages portant le gène de bêta-galactosidase (employé souvent pour le criblage immunologique). Si l'événement de clonage perturbe une copie normalement fonctionnelle du gène dans le vecteur les plaques en résultant sembleraient claires dans l'analyse. Si les bactériophages contiennent un gène fonctionnel de bêta-galactosidase ils formeront les boucles bleues autour de leurs plaques. N'importe quelle contrainte qui n'est pas un overproducer de bêta galactosidase fonctionnera en tant que bactéries de serveur d'indicateur. - [Analyse lue pour le bactériophage contenant le protocole de gène de Bêta-galactosidase]

Catégorie : Analyses de gène de journaliste : Protocoles d'analyse de B-Galactosidase

Protocole pour l'analyse de gène de journaliste de Bêta-galactosidase (forme liquide). - [Analyse lue de gène de journaliste de Bêta-galactosidase (forme liquide)]

Catégorie : Protocoles de la livraison de gène : Protocoles d'ADN Nanoparticles

Ce protocole décrit un procédé par étapes pour préparer les acides nucléiques encapsulés dans un polyéthylène glycol (CHEVILLE) - le nanolipoparticle protégé (NLP) qui contiennent un lipide et un ligand bioresponsive. Ce processus fournit plusieurs avantages pour la livraison systémique de gène. Le temps in vivo de circulation est étendu. En outre, les bas lipides pH-sensibles améliorent l'éclatement d'ADN et l'évasion endosomal. En conclusion, les ligands insérés dans la surface de NLP peuvent viser la livraison de gène aux tissus ou aux cellules spécifiques in vivo. - [Vésicules neutres indiquées de lipide de charge visées par Bioresponsive pour le protocole systémique de la livraison de gène]

Catégorie : Protocoles d'elegans de C. : Protocoles de la génétique d'elegans de C.

Le procédé est de mutagenize une grande population des vers de terre avec trimethylpsoralen et l'irradiation uv, a installé 1152 sous-populations, ADN d'écran faite à partir de cette bibliothèque pour des suppressions dans les gènes spécifiques par ACP emboîté, et récupérer alors les vers de terre simples portant les suppressions par un procédé de SIB-sélection. - [Protocole lu de coup de grâce de gène d'elegans de C.]

Catégorie : Protocoles de technologie de RNAi : Protocoles d'embryons et d'Oocytes de souris de RNAi

Le protocole décrit une méthode pour rassembler les embryons tôt de 6 souris week-old.  Ultérieurement, les embryons d'isolement peuvent être injectés avec de l'ARN bicaténaire pour induire la précipitation d'un gène d'intérêt. - [Collection lue d'embryons tôt de souris pour le protocole de RNAi]

Catégorie : Protocoles de technologie de RNAi : Protocoles d'embryons et d'Oocytes de souris de RNAi

Le protocole décrit une méthode pour rassembler des oocytes de 6 souris week-old.  Ultérieurement, les oocytes d'isolement peuvent être injectés avec de l'ARN bicaténaire pour induire la précipitation d'un gène d'intérêt. - [Collection lue d'Oocytes de souris pour le protocole de RNAi]

Catégorie : Protocoles d'E Coli : Protocoles de la génétique d'E coli

Protocole pour que l'analyse colorimétrique identifie Ribofuranosylaminobenzene putatif 5 ' - phosphatez les gènes de Synthase. La production du synthase actif de RFAP du thermautotrophicus de Methanothermobacter a été réalisée par le coexpression du gène MTH0830 avec un chaperone moléculaire. C'est la première identification biochimique directe d'un gène de methanogen ce des codes pour un synthase actif de RFAP. - [Analyse colorimétrique lue pour identifier des gènes de Synthase de phosphate de Ribofuranosylaminobenzene 5 putatifs ' -]

Catégorie : Microbiologie : Préparation compétente bactérienne Escherichia coli de cellules

Protocole gentil pour la préparation des cellules bactériennes pour permettre la prise des vecteurs de plasmide. Dr. Peter Kille. Métaux chauds Cardiff. - [Préparation compétente lue de cellules [CaCl2]]

Catégorie : Protocoles de neurologie : Protocoles neuronaux de culture de cellules : Protocoles neuronaux de culture de cellules de rat

L'ablation conditionnelle de stat3/socs3 révèle le bivalent pour les astrocytes réactifs après des dommages de moelle épinière. Le protocole actuel explique ce jeu réactif d'astrocytes un rôle crucial dans la reprise curative et fonctionnelle de blessure en utilisant des souris avec une suppression sélective du capteur de signal et de l'activateur de transcription-3 (STAT3) ou la suppression du cytokine signaling-3 (SOCS3) sous la commande de l'instigateur de gène de Nestin/du renforceur (STAT3N-/-, SOCS3N-/-). - [L'ablation conditionnelle lue de Stat3 Socs3 révèle le bivalent pour les Astrocytes réactifs]

Catégorie : Protocoles d'elegans de C. : Protocoles de la génétique d'elegans de C.

L'effet de cosuppression en elegans de C. n'écarte pas dans tout l'animal. Cosuppression dans des elegans de C. peut être déclenché par les transgenes fortement réitérés qui contiennent des gènes chimères. - [Cosuppression lu dans le protocole d'elegans de C.]

Catégorie : Protocoles de technologie de RNAi : Protocoles d'elegans de RNAi C.

Cosuppression est un processus dans des elegans de Caenorhabditis qui ressemble étroitement à RNAi.  Contrairement à RNAi, cependant, l'effet de cosuppression en elegans de C. n'écarte pas dans tout l'animal.  Cosuppression dans des elegans de C. peut être déclenché par les transgenes fortement réitérés qui contiennent des gènes chimères. - [Cosuppression lu dans le protocole d'elegans de C.]