protocoles de fractionnement

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules

Techniques sur la façon dont créer des gradients d'iodixanol pour le fractionnement des cellules mammifères. Ces gradients peuvent être produits en tant que gradients discontinus ou continus préformés. Ces gradients sont invariablement exécutés dans des rotors de balancer-position dans les centrifugeuses à vitesse réduite. - [préparation C2 lue des gradients préformés d'iodixanol pour les cellules mammifères.]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement

Protocole pour l'interruption de cellules et le fractionnement sous-cellulaire. Inclut : Panne, fractionnement et réactifs d'azote. - [interruption lue de cellules et protocole sous-cellulaire de fractionnement]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules

Des techniques de fractionnement de cellules sont présentées pour la conception des systèmes de gradient pour séparer un ou plusieurs types de cellules des lavages des cavités de corps ou de mécaniquement ou des tissus enzymatique-dissociés. Inclut : Préparation de suspension de cellules pour le chargement de gradient ; Fractionnement par densité flottable ; Fractionnement sur la base de taille de cellules. - [fractionnement lu de cellules d'une population mélangée des cellules]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules

Protocole de fractionnement de cellules en utilisant le seperation à vitesse réduite. - [protocole lu Usingt Separaton à vitesse réduite de fractionnement de cellules des cellules]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles de Noyau

Protocole pour l'isolement de chromatin par le fractionnement biochimique de petite taille. - [l'isolement lu de Chromatin par Petit-Mesurent le protocole biochimique de fractionnement]

Catégorie : Protocoles d'ADN : Protocoles de Bibliothèque d'ADN

Protocole pour la construction de la bibliothèque d'ADN, étape 5 : Fractionnement de l'ADN par filtration au gel par la sépharose CL-4B. - [construction lue d'étape 5 de bibliothèques d'ADN : Fractionnement de l'ADN par filtration au gel par la sépharose]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules

Le fractionnement de cellules des composants cellulaires en utilisant Percoll une solution synthétique et colloïdale de polyvinylpyrrolidone a enduit la silice, spécifiquement conçue pour la centrifugation de sédimentation. Percoll devient chose facile d'établir un gradient de densité linéaire. Il est beaucoup plus facile accomplir des séparations d'organelle sur des gradients de densité de Percoll que sur des gradients de sucrose. - [Protocole Lu de Percoll de Gradient de Densité D'Équilibre]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement

Acidocalcisomes, les organelles calcium-enregistrantes acides denses, qui ont été initialement identifiées dans le cruzi de Trypanosoma, n'ont aucun parallèle en cellules mammifères. Elles représentent ainsi une seule caractéristique fonctionnelle, non partagée par le centre serveur et par conséquent offrent une cible potentielle importante pour la chimiothérapie de la maladie de Chagas. - [fractionnement lu d'Acidocalcisomes et d'autres organelles de Trypanosoma, de Leishmania, chlamydomonas]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement : Protocoles d'Isolement de Membrane

Le protocole décrit dans ce protocole a été utilisé principalement pour analyser le Golgi, le bonnet endoplasmique et le réseau transport-Golgi mais des repères pour d'autres compartiments (par exemple ERGIC et endosomes) ont été également analysés. Les modifications à l'intervalle de densité de gradient ou aux conditions de centrifugation influencent la capacité du gradient de résoudre les compartiments multiples. - [fractionnement lu de Golgi, HEU, de TGN et d'autres compartiments de membrane dans des gradients préformés d'Iodixanol]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement

Un certain nombre de stratégies de gradient de densité ont été développées pour le fractionnement des érythrocytes humains selon leur âge. Pendant que les cellules vieillissent, ainsi leur densité tend à augmenter ; les reticulocytes tendent donc à avoir les plus faibles densités. Reticulocytes fréquemment ont été partiellement épurés sur des gradients discontinus d'arabinogalactane ; l'intervalle réel de densité étant tout à fait divers, de tout à fait le large. - [fractionnement lu des érythrocytes humains (normale ou faucille) et du Reticulocytes dans Iodixanol discontinu]

Catégorie : Protocoles De Biologie d'Usine : Protéines végétales, peptides et antigènes

Le protocole décrit une méthode pour exécuter le fractionnement isoélectrique d'un échantillon d'embryon de maïs en utilisant un multicompartment electrolyzer(MCE). Ce prefractionation des protéines ayant des pIs dans un certain intervalle de pH est essentiel pour permettre aux chargements élevés de la protéine d'être résolus sur l'étroit et les gradients immobilisés ultra-étroits de pH utilisés dans la 2D électrophorèse. Les membranes isoélectriques dans l'acte d'ECM comme les pièges isoélectriques capturant toutes les espèces de protéine ayant des pIs entourer la valeur de pi de chacun... - [fractionnement lu des protéines d'embryon de maïs pour la 2-D électrophorèse de gel en utilisant Multicompartment Electrolyz]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement : Protocoles d'Isolement de Mitochondries

Généralement dans des gradients d'iodixanol la densité des organelles diminue de la série : les peroxisomes, mitochondries, lysosomes, HEU, Golgi, bien que dans le discoideum de Dictyostelium, les lysosomes sont plus denses que les mitochondries. Les gradients d'Iodixanol peuvent habituellement fournir la résolution satisfaisante de toutes ces particules de membrane bien qu'il puisse être nécessaire de moduler les paramètres de gradient ou de centrifugation afin d'optimaliser une séparation particulière. - [fractionnement lu des mitochondries, du Lysosomes, du Peroxisomes, HEU et du Golgi dans le gradient préformé d'Iodixanol]

Catégorie : Immunologie : Protocoles Mononucléaires d'Isolement de Cellules : Protocoles d'Isolement de Lymphocyte de B

Le protocole décrit la purification des cellules de T de souris, des cellules de B, et des sous-ensembles des cellules de T en utilisant la séparation magnétique de petit programme. L'isolement des sous-ensembles de cellules utilisant les petits programmes magnétiques est rapide, simple, et fiable et peut avoir comme conséquence les rendements élevés de cellules très pures. - [fractionnement lu des cellules de T et de B en utilisant le protocole magnétique de petits programmes]

Catégorie : Immunologie : Protocoles Mononucléaires d'Isolement de Cellules : Protocoles d'Isolement de T-Cellule

Le protocole décrit la purification des cellules de T de souris, des cellules de B, et des sous-ensembles des cellules de T en utilisant la séparation magnétique de petit programme. L'isolement des sous-ensembles de cellules utilisant les petits programmes magnétiques est rapide, simple, et fiable et peut avoir comme conséquence les rendements élevés de cellules très pures. - [fractionnement lu des cellules de T et de B en utilisant le protocole magnétique de petits programmes]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement

Fractionnement de (a) vacuolar et vésicules subvacuolar et (b) vacuole et cytoplasme-à-vacuole visant des vésicules (de Cvt) des sphéroplastes de levure dans des gradients discontinus préformés d'un iodixanol. Le protocole inclut : Formation des sphéroplastes de levure ; Isolement et vesiculation des vacuoles ; Séparation des vésicules vacuolar et subvacuolar ; Séparation des vacuoles et des vésicules de Cvt d'un lysate de sphéroplaste de levure. - [fractionnement lu des vésicules de Vacuolar et de Subvacuolar et de la vacuole et de la Cytoplasme-à-Vacuole visant]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement : Protocoles d'Isolement de Membrane

Ce protocole est concerné par l'utilisation des gradients d'iodixanol en mode analytique d'étudier la localisation de membrane d'une protéine ou d'une fonction particulière. Les gradients continus sont plus adaptés à ceci chargent. Un des protocoles décrits dans ce protocole commence par un gradient discontinu, mais puisque le gradient est centrifugé à 174,000g pour 16 h il deviendra continu par diffusion. - [fractionnement lu des membranes de levure dans des gradients continus préformés d'Iodixanol]

Catégorie : Formation image Moléculaire : Microscopie d'Immunofluorescence

Immunofluorescence indirecte avec le preextraction (fractionnement in situ de cellules). Raffaella Di Micco et fabrizio d'Adda di fagagna. - [immunofluorescence indirecte lue avec preextraction (fractionnement in situ de cellules)]

Catégorie : Immunologie : Protocoles d'Immunofluorescence

L'étude du lancement des facteurs de réponse de dommages d'ADN au niveau unicellulaire se fonde sur l'observation de leur accumulation (ou de l'accumulation de leurs formes lancées) aux foyers nucléaires par des techniques ordinaires d'immunofluorescence. - [immunofluorescence indirecte lue avec le protocole de Preextraction (fractionnement in situ de cellules)]

Catégorie : Protocoles De Lipide

Protocole d'isolement de lipoprotéine en utilisant la hémolymphe d'insecte. Inclut : Saignement et centrifugation ; Fractionnement, réfractométrie et dialyse ; Lyophilisation. - [Protocole Lu d'Isolement de Lipoprotéine]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement : Protocoles d'Isolement de Peroxisome

Pour isoler des peroxisomes de saccharomyces cerevisiae d'une qualité suffisamment pour des études in vitro d'importation, nous avons optimalisé les conditions pour la croissance de cellules et pour le fractionnement de cellules. La stabilité des peroxisomes d'isolement a été surveillée par temps d'attente de catalase et sedimentability des enzymes de marquage. - [Peroxisomes lu dans saccharomyces cerevisiae]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules

Protocole de fractionnement de cellules pour rapporter les protoplastes intacts d'usine. La technique épurait des protoplastes des fluitans de Glyceria d'herbe. Le protocole inclut : Détermination d'osmolality de feuille ; Stérilisation. - [purification lue de cellules d'usine des protoplastes intacts d'usine]

Catégorie : Protocoles De Technologie de RNAi : Protocoles de Drosophile de RNAi

Le protocole décrit une méthode pour préparer et fractionner des extraits d'embryon de drosophile.  Ces extraits peuvent être utilisés pour la caractérisation in vitro de RNAi. - [préparation et fractionnement lus des extraits d'embryon de drosophile pour la caractérisation in vitro de l'ARN]

Catégorie : Protocoles De Protéine : Purification et identification de protéine

Purification de Protéine : Analyses, Activité Spécifique, Fractionnement Initial. Conférence de Blaber. - [Purification Lue de Protéine : Analyses, Activité Spécifique, Fractionnement Initial]

Catégorie : Protocoles De Protéine : Extraction de Protéine À partir de Tissu

Fractionnement de tissu et extraction sous-cellulaires de protéine pour l'usage dans le proteomics masse-spectrométrie-basé. Bien que beaucoup de méthodes existent pour fractionner des protéines, la méthode décrite ici peut capturer la majorité de fractions sous-cellulaires simultanément à la pureté raisonnable. Le scalability de cette méthode le rend favorable à de petits échantillons, tels que les tissus embryonnaires, en plus de plus grands tissus. Le protocole décrit est pour le fractionnement et l'extraction généraux des protéines des organes/tissu - [fractionnement de tissu et extraction sous-cellulaires lus de protéine pour l'usage dans proteomic masse-spectrométrie-basé]

Catégorie : Protocoles d'Organelle de Cellules : Protocoles Sous-cellulaires de Fractionnement

Ce protocole décrit le fractionnement nucléaire et cytoplasmique des cellules de culture de tissu et une méthode pour la détection occidentale de tache des protéines en utilisant le système infrarouge de formation image d'odyssée. Ce protocole a été employé pour détecter l'expression de la "petite" protéine de prise en 293T, cellules hela et de COS. Le système d'odyssée a l'excédent de plusieurs avantages les méthodes de détection chimioluminescentes plus largement répandues. - [analyse occidentale lue de tache des échantillons fractionnés sous-cellulaires en utilisant le système infrarouge de formation image d'odyssée]