protocoles d'expression

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires : Protocoles de Microdissection de saisie de laser : Préparation de tissu pour des protocoles de LCM

Les cellules ou les tissus spécifiques d'isolats de LCM des échantillons ont monté sur des glissières de microscope. Les échantillons sont visualisés par un film thermoplastique qui est fixé à un couvercle de tube de microcentrifuge. La chaleur localisée, provoquée par l'application d'une impulsion de laser, fond la membrane aux cellules d'intérêt, qui peuvent alors être moissonnées pour l'analyse approfondie. L'ARN et les protéines peuvent être épurés des cellules d'isolement, permettant l'analyse détaillée de l'expression de gène. Ce protocole est divisé en trois étapes. - [Lu (LCM) : Préparation et sectionnement des blocs gelés de tissu et purification de l'ARN du cel d'isolement]

Catégorie : Protocoles de biologie d'usine : Protéines végétales, peptides et antigènes

Le pH est un paramètre important contrôlant beaucoup de voies métaboliques et signalantes en cellules vivantes. Les indicateurs de pH fluorescents de recombinaison (pHluorins) ont hérité la mode pour la surveillance pH cellulaire. Ils sont dérivés de l'Aequorea le plus populaire Victoria GFP (Poids du commerce-GFP). Ici, nous présentons un journaliste fluorescent original de pH que la protéine de l'orange seapen le gurneyi de Ptilosarcus (Pinte-GFP) et comparons ses propriétés aux pHluorins pour l'expression et l'usage aux usines. - [Lu une sonde fluorescente originale de pH pour l'expression aux usines]

Catégorie : Protocoles de biologie d'usine : Culture de tissu d'Arabidopsis

Expériences incluses pour l'analyse de l'épiderme d'usine : Induction stéroïde d'expression de gène dans Arabidopsis ; Moules de reproduction et fontes de l'épiderme d'usine. - [Analyse lue des expériences d'épiderme d'usine]

Catégorie : La génétique et génomique : Protocoles de la génétique de Cancer

Anatomie d'une étude comparative d'expression de gène. Inclut : Choix des populations de cellules ; extraction d'ADN messagère et transcription renversée ; Écriture de labels fluorescente des cDNA ; Hybridation à un Microarray d'ADN ; Balayage de l'alignement hybridé ; Interprétation de l'image balayée. - [Anatomie lue d'une étude comparative d'expression de gène]

Catégorie : Protocoles de Microarray : Protocoles d'analyse de Microarray

L'information sur l'anatomie d'une étude comparative d'expression de gène.  Inclut : Choix des populations de cellules ; extraction d'ADN messagère et transcription renversée ; Écriture de labels fluorescente des cDNA ; Hybridation de microarray d'ADN ; Balayage de l'alignement hybridé ; Interprétation de l'image balayée. - [Anatomie lue d'une étude comparative d'expression de gène]

Catégorie : Protocoles de transfection : Protocoles stables de transfection

L'AFCS utilise la technologie antisens pour manipuler l'expression de protéine de signalisation dans les 264.7 CRUS macrophage-comme la variété de cellule. Ceci peut être réalisé par la transfection des oligonucléotides antisens gène-spécifiques (ASOs). Le procédé suivant implique la transfection d'ASOs dans les 264.7 cellules CRUES utilisant le réactif de transfection de FuGENE 6. Ultérieurement, le tout le ARN ou protéine d'isolement de ces cellules transfected peut être employé pour évaluer le niveau de la précipitation d'ADN messagère ou de protéine, respectivement. - [Transfection antisens lue d'oligonucléotide des 264.7 cellules CRUES avec FuGENE 6 dans un paraboloïde 24-Well]

Catégorie : Protocoles de clonage : Protocoles d'expression de protéine de Baculovirus

Protocole pour l'analyse de Baculovirus de l'expression nonsecreted de protéine. - [Analyse lue de Baculovirus de protocole d'expression de protéine de Nonsecreted]

Catégorie : Protocoles de culture de cellules : Protocoles de culture de cellules d'insecte

Protocoles d'expression de protéine de Baculovirus. Inclut des protocoles : Protocole de Cotransfection ; Analyse d'expression nonsecreted de protéine ; Cellules croissantes et de congélations d'insecte. - [Protocoles lus d'expression de protéine de Baculovirus]

Catégorie : Protocoles de clonage : Protocoles d'expression de protéine de Baculovirus

Protocoles pour l'expression de protéine de Baculovirus. - [Protocoles lus d'expression de protéine de Baculovirus]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement

Le protocole utilise les anticorps spécifiques couplés à un de quatre fluorochromes : isothiocyanate de fluorescéine (FITC), R-phycoérythrine (PE), chlorophylle-un de peridinin (PcP), et allophycocyanin (RPA). Ces fluorochromes peuvent être employés simultanément pour souiller et analyser les configurations d'expression de quatre protéines différentes dans le même échantillon. Les populations souillées par fluorochrome de cellules sont analysées utilisant un cytometer d'écoulement de duel-laser de FACSCalibur. - [Caractérisation lue des cellules par protocole de Cytometry d'écoulement]

Catégorie : Immunologie : Protocoles de cellules de B

Des fluorochromes peuvent être employés simultanément pour souiller et analyser les configurations d'expression de quatre protéines différentes dans le même échantillon. Les populations souillées par fluorochrome de cellules sont analysées utilisant un cytometer d'écoulement de duel-laser de FACSCalibur. - [Caractérisation lue des cellules par protocole de Cytometry d'écoulement]

Catégorie : Signalisation des protocoles de transduction de signal : Protocoles de Chemokine

Analyse d'expression de récepteur de Chemokine par écoulement Cytometry. Laboratoire de Mullins. Réactifs, protocole et procédé détaillé. - [Analyse lue d'expression de récepteur de Chemokine par écoulement Cytometry]

Catégorie : Protocoles de neurologie : Protocoles de fixage de correction

Enregistrement combiné de bride de correction et expression d'ADN messagère profilant dans de différents neurones. - [Enregistrement combiné lu de bride de correction et expression d'ADN messagère profilant dans de différents neurones]

Catégorie : Protocoles d'ADN : Protocoles de bibliothèque d'ADN de Genomic

Cette étape récapitule comment construire une bibliothèque de cDNA dans un vecteur mammifère, utilisant les kits commerciaux. Ces kits sont fournis par plusieurs constructeurs et incluent généralement tous les réactifs exigés. - [Construction lue des bibliothèques de cDNA dans des vecteurs eucaryotiques d'expression pour la construction et le criblage]

Catégorie : Protocoles d'isolement et de culture de cellules primaires : Protocoles de Microdissection de saisie de laser

Trois kits d'Ambion ont été employés pour doser les miRNAs spécifiques et pour détecter l'expression différentielle de miRNA dans diverses régions de cerveau de souris et types de cellules d'isolement par le microdissection de saisie de laser (LCM). Ces techniques peuvent être appliquées à étudier le miRNA dans d'autres espèces, tissus, et types de cellules. Inclut : Obtenez les échantillons de Microdissected de saisie de laser ; Isolez le miRNA des échantillons de LCM ; Dosez le miRNA par qRT-ACP. - [Lu détectez et dosez MicroRNA dans des échantillons de Microdissection de saisie de laser]

Catégorie : Protocoles de technologie de RNAi

L'information sur la façon dont détectez et dosez MicroRNA dans des échantillons de microdissection de saisie de laser. Inclut : Obtenez les échantillons de Microdissected de saisie de laser ; Isolez le miRNA des échantillons de LCM ; Dosez le miRNA par qRT-ACP ; Détection de miRNA dans le tissu de Microdissected du cerveau de souris par qRT-ACP ; L'expression différentielle de MicroRNA dans le tissu de cerveau entier a comparé à une population plus homogène des cellules. - [Lu détectez et dosez MicroRNA dans des échantillons de Microdissection de saisie de laser]

Catégorie : Protocoles de cytogénétique : Le tissu in situ d'hybridation sectionne des protocoles

Le protocole pour la détection des mRNAs sur des cryosections du système cardio-vasculaire utilisant l'ARN Creuser-étiqueté sonde. Le protocole a été optimalisé d'un protocole utilisant des sondes de l'ARN 35S-labeled. Il laisse détecter l'expression de bas mRNAs abondants dans le système cardio-vasculaire, par exemple du cytokine proinflammatory GM-CSF dans les artères coronaires humaines normales, et d'IL6 et de gp130 aux coeurs de manqu humains. Le protocole peut être combiné avec immunohistochemistry. - [Détection lue des mRNAs sur Cryosections du système cardio-vasculaire utilisant les sondes Creuser-Étiquetées d'ARN]

Catégorie : Immunologie : Protocoles de cellules de B

Le lancement de cellules de B peut être dosé indirectement par production de analyse d'anticorps ou directement en mesurant les modifications cellulaires qui se produisent juste après l'exposition à un signal de lancement. Fournit des méthodes pour la dernière approche (directe)--à savoir, méthodes pour mesurer des paramètres tôt de lancement de cellules de B tels que des augmentations expression d'II-antigène de la concentration ionisée intracellulaire en calcium [Ca2+] I, de la taille de cellules, et de MHC de classe. - [Événements tôt lus dans le protocole de lancement de lymphocyte de B]

Catégorie : Analyses de gène de journaliste

Protocole décrivant l'ecdysone comme régulateur d'expression de gène induisible en cellules mammifères. - [Ecdysone lu comme régulateur d'expression de gène induisible en cellules mammifères]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement

Protocole pour estimer le nombre de molécules CD38 sur les lymphocytes de CD8+ T des individus HIV-infectés. Inclut : RECOMMANDATION DE CONSTRUCTEUR POUR PE-CD38 ET PE-CD4 ; VALIDATION DES LINÉARITÉS ET DE SENSIBILITÉ LOGARITHMIQUES D'AMPLIFICATEUR ; ÉCONOMIE DU NIVEAU DE L'EXPRESSION DE L'ANTIGÈNE CD4 SUR DES LYMPHOCYTES DE CD4+ ET DE SON UTILISATION COMME NORME BIOLOGIQUE POUR LA CARACTÉRISATION D'INSTRUMENT DE L'ÉCOULEMENT CYTOMETER ; DÉTERMINATION DU NOMBRE DE MOLÉCULES CD38 PAR CELLULE DE CD8+ ; etc… - [lu estimant le nombre de molécules CD38 sur les lymphocytes de CD8+ T des individus HIV-Infectés]

Catégorie : Protocoles d'E Coli : Protocoles de protéine d'E coli

Protocole pour l'expression et la purification de ses protéines étiquetées dans Escherichia coli. - [Expression et purification lues de ses protéines étiquetées dans le protocole d'Escherichia coli]

Catégorie : Protocoles de recombinaison de protéine

Expression d'un P-type procaryotique atpase dans des membranes de plasma d'Escherichia coli et de la purification par la chromatographie de Ni2+-affinity. Procédures biologiques en ligne - [expression lue d'un P-type procaryotique atpase dans des membranes de plasma d'Escherichia coli et de la purification par Ni2+-affin]

Catégorie : Protocoles d'E Coli : Protocoles de protéine d'E coli

Protocole pour l'expression des gènes copiés dans Escherichia coli utilisant les instigateurs IPTG-induisibles. Le protocole décrit comment (1) copier a copié des ordres encodant les trames de lecture ouvertes dans les plasmides portant les instigateurs IPTG-induisibles, (2) pour optimaliser l'expression des protéines de cible dans les transformants portant ces recombinants, et (3) mesurez-vers le haut la production des protéines étrangères. - [Expression lue des gènes copiés dans Escherichia coli utilisant le protocole IPTG-induisible d'instigateurs]

Catégorie : Protocoles viraux de manipulation : Protocoles bactériophages de manipulation de Lamda

Le protocole décrit comment (1) copier a copié des ordres encodant les trames de lecture ouvertes dans les plasmides portant des instigateurs de pL du bactériophage {lambda}, (2) pour optimaliser l'expression des protéines de cible dans les transformants portant ces recombinants, et (3) mesurez-vers le haut la production des protéines étrangères. - [Expression lue des gènes copiés dans Escherichia coli utilisant le protocole d'instigateur de bactériophage lambda pL]

Catégorie : Protocoles d'E Coli : Protocoles de protéine d'E coli

Protocole pour l'expression des gènes copiés dans Escherichia coli utilisant l'instigateur du bactériophage lambda pL. Le protocole décrit comment (1) copier a copié des ordres encodant les trames de lecture ouvertes dans les plasmides portant des instigateurs du bactériophage lambda pL, (2) pour optimaliser l'expression des protéines de cible dans les transformants portant ces recombinants, et (3) mesurez-vers le haut la production des protéines étrangères. - [Expression lue des gènes copiés dans Escherichia coli utilisant le protocole d'instigateur de bactériophage lambda pL]