protocoles d'expérience

Catégorie : Protocoles d'ACP : protocoles de synthèse de cDNA

Une amorce d'oligodeoxynucleotide hybridée à l'ADN messagère est étendue par un ADN polymérase ARN-dépendant pour créer une copie de cDNA qui peut être amplifiée par ACP.  Selon le but de l'expérience, l'amorce pour la synthèse de cDNA de premier-brin peut être spécifiquement conçue pour hybrider à un gène particulier de cible, ou une amorce générale telle qu'oligo (décollement) peut être utilisée pour amorcer la synthèse de cDNA essentiellement de tous les mRNAs mammifères - [amplification lue de cDNA produite par la transcription renversée du protocole d'ADN messagère]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Un procédé intégrateur pour l'identification et la mesure d'Apoptosis. Laboratoire/groupe de Yingyu Cui : Laboratoire principal national de l'ingénierie de protéine et du génie génétique d'usine, université des sciences de la vie. J'ai téléchargé un procédé intégrateur par lequel un résultat relativement satisfaisant peut être obtenu après une étape simple de culture de cellules et de traitement passager de cellules, puis détection avec différents instruments. Ceci raccourcit le temps d'expérience. - [Lu un procédé intégrateur pour l'identification et la mesure d'Apoptosis]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement : Protocoles d'Apoptosis Cytometry

Un procédé intégrateur par lequel un résultat relativement satisfaisant peut être obtenu après une étape simple de culture de cellules et de traitement passager de cellules, puis détection avec différents instruments. Ceci raccourcit le temps d'expérience. - [Protocole lu d'identification et de mesure d'Apoptosis]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement : Protocoles d'étalonnage de Cytometry d'écoulement

Des cytometers d'écoulement doivent être calibrés avant des mesures d'intensité de fluorescence en raison de la variabilité inhérente d'instrument. Pour corriger pour cette variabilité, une particule standard (globules rouges de poulet fixe, ou CRBCs) doit être analysée sur l'instrument avant chaque expérience et tensions du tube photomultiplicateur (PMT) ajustées en conséquence pour placer les crêtes d'émission de fluorescence de CRBC dans les canaux prédéterminés de cible. - [Étalonnage lu d'écoulement Cytometers de Becton Dickinson pour des mesures relatives d'intensité de fluorescence]

Catégorie : Protocoles de microscopie : Protocoles de formation image de Vivre-Cellule

La mesure et la manipulation manuelles de la surface de cellules exige l'accès aux cellules, habituellement dans une chambre ouverte. Des chambres ou les insertions à température contrôlée d'étape sont préférées pour mettre à jour l'activité physiologique pendant l'expérience. Par exemple, les boîtes de Pétri heated avec les bas en verre de lamelle (Bioptechs) permettent la microscopie de fluorescence à haute résolution des cellules vivantes pendant l'application de force. - [Chambres lues pour l'examen des cellules de phase sous le protocole mécanique d'effort]

Catégorie : Protocoles de cytogénétique : Protocoles in situ d'hybridation

Choix de la bonne méthode de écriture de labels pour votre expérience d'hybridation. Inclut : Méthodes de écriture de labels homogènes pour l'ADN ; Méthodes de écriture de labels homogènes pour l'ARN ; Stabilité d'interaction de sonder-cible ; Écriture de labels non radioactive des oligonucléotides ; Bicaténaire contre les sondes monocatenaires. - [Lu choisissant la bonne méthode de écriture de labels pour votre expérience d'hybridation]

Catégorie : Protocoles d'ACP : Protocoles renversés de Transcriptase RT-PCR

Dans ce protocole, l'échantillon et le concurrent RNAs sont inverse transcrit (séparément) dans une expérience pilote.  Une quantité constante de produit témoin droite est alors combinée avec une dilution 2 logserial de produit du concurrent droite pour l'ACP. Le procédé fournit un nombre de copie approximatif pour l'échantillon, qui fine-tuned alors en répétant l'expérience avec une série de dilutions doubles de concurrent.  L'expérience inclut des commandes pour des variations d'échantillon-à-échantillon dans l'efficacité de droite. - [RT-PCR concurrentiel lu : Évaluation de protocole de nombre de copie]

Catégorie : Protocoles de cytogénétique

CGH fournit une image complète de tous les profits et pertes chromosomiques dans une expérience simple. Contrairement à l'analyse de bande, CGH n'exige d'aucune préparation des chromosomes de métaphase des cellules d'être analysée (qui dans certains types de tumeur peuvent être difficiles ou même impossibles). ? ? ? ? ? ? ? - [Détection lue des déséquilibres chromosomiques utilisant DOP-PCR et hybridation comparative de Genomic (CGH)]

Catégorie : Biologie développementale : Utilisation des protocoles modèles d'organizations

Dans l'expérience il y a trois joueurs A, B, et le joueur A de C. obtient une première dotation de 10, le joueur B obtient 0 et le joueur C obtient 5 points. D'abord, le joueur A décide lesquels de ses 10 points à transférer au B. Puis, le joueur C observe les décisions d'A et obtient la possibilité pour laisser les profits inchangés ou pour punir A en déduisant 3 (ou 6) points d'A à un coût de 1 point (ou 2 points) pour C…. - [Expériences lues sur l'altruisme paroissial chez l'homme ; Procédures et instructions]

Catégorie : Immunologie : Protocoles mononucléaires d'isolement de cellules

Ce protocole utilise la fraction de PBMC enrichie dedans avec des monocytes par des centrifugations de gradient de densité (le protocole peut être trouvé chez www.methods.info). La réduction de la quantité de microbeads par rapport au protocole de Miltenyi réduit les coûts de l'expérience. - [Isolement lu des monocytes de PBMCs enrichi utilisant le protocole magnétique de programmes CD14]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules

Ce protocole utilise la fraction de PBMC enrichie dedans avec des monocytes par des centrifugations de gradient de densité. La réduction de la quantité de microbeads réduit les coûts de l'expérience. - [Isolement lu des monocytes de la fraction de PBMC enrichie par monocyte utilisant CD14]

Catégorie : Protocoles de Microarray d'ADN

Les « 7 clés à l'analyse réussie de microarray » a été conçues pour guider des chercheurs point par point par la conception, la mise en place, l'analyse, et la publication d'une expérience de microarray. - [Succès lu de Microarray]

Catégorie : Protocoles de neurologie : Protocoles neuronaux de culture de cellules

analyse de coculture de Neurone-fibroblaste pour expliquer la différentiation présynaptique.  Inclut : Préparation des cellules de HEK293T, Coculture expérience des cellules et des neurones de HEK293T, d'Immunostaining, de vésicule de rotation, saisie d'image et quantitation. - [Analyse lue de Coculture de fibroblaste de neurone pour expliquer la différentiation présynaptique]

Catégorie : Protocoles de purification d'acide nucléique : Protocoles d'isolement d'ADN : Protocoles d'isolement d'ADN de Genomic

Les résultats de l'expérience pilote (digestion partielle de l'ADN eucaryotique pour l'usage dans des bibliothèques de Genomic : Des réactions pilotes) sont employées pour établir des conditions pour la digestion partielle de l'ADN eucaryotique dans les réactions de grande puissance décrites ici. - [Digestion partielle lue de l'ADN eucaryotique pour l'usage dans des bibliothèques de Genomic : Protocole préparatoire de réactions]

Catégorie : Protocoles de biologie d'usine : Protocoles de peptide de protéine d'Arabidopsis

Coimmunoprecipitation est l'une des techniques les plus utiles pour indiquer des interactions de protéine-protéine. Les bonnes commandes négatives pour vérifier la spécificité du procédé de coimmunoprecipitation sont (1) exécutant la même expérience d'immunoprécipitation utilisant des programmes couplés au sérum de preimmune et (2) sondant la tache occidentale avec des anticorps contre la protéine connue pour ne pas agir l'un sur l'autre avec les protéines coimmunoprecipitated dans des conditions physiologiques. - [Protéine lue Coimmunoprecipitation dans le protocole d'Arabidopsis]

Catégorie : Protocoles de détection d'acide nucléique

La lecture genomic de borne limite de restriction (RLGS) est une méthode pour détecter un grand nombre de bornes limites de restriction dans une expérience simple.  Elle est basée sur le concept que les sites d'enzymes de restriction peuvent servir de bornes limites dans tout un génome.  Les utilisations de RLGS dirigent la fin-écriture de labels de l'ADN genomic assimilée avec de l'enzyme de restriction de rare-découpage et l'électrophorèse bidimensionnelle à haute résolution. - [Protocole lu de lecture de Genomic de borne limite de restriction]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles d'échange ionique de chromatographie

Protocole pour séparer des protéines utilisant la chromatographie d'échange ionique. Le protocole détaille les considérations pratiques d'une expérience d'échange ionique de la chromatographie (le CEI).  Le choix de quel type d'échangeur ionique à utiliser, comme la composition des mémoires tampons utilisées dans cette expérience, devrait être déterminé avant de commencer ce protocole. - [Lu séparant des protéines utilisant le protocole d'échange ionique de chromatographie]

Catégorie : Protocoles de cellules de tige : Protocoles de culture de cellules de tige

Le protocole décrit comment installer des cultures de microdrop pour produire les embryons qui peuvent alors être utilisés pour faire des chimères. La culture de microdrop devrait être installée plusieurs heures à 1 jour avant l'expérience pour permettre l'équilibration de la température et de gaz. - [Lu l'installation de Microdrop cultive le protocole]