protocoles d'événement

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Analyse de fragmentation d'ADN en utilisant l'électrophorèse Shailaja Kasibhatla et autres de gel d'agarose. Ce protocole fournit une méthode qualitative pour évaluer la mort de cellules en détectant des fragments d'ADN en utilisant l'électrophorèse de gel d'agarose. Un des dispositifs classiques de l'apoptosis est le fendage de l'ADN genomic dans les fragments oligonucleosomal représentés par des multiples du point d'ébullition 180-200. La visualisation de ces fragments peut faciliter en caractérisant un événement apoptotic. Peut être combiné avec des méthodes plus quantitatives. - [analyse lue de fragmentation d'ADN en utilisant électrophorèse de gel d'agarose (abonnement requis)]

Catégorie : Analyses de Gène de Journaliste : Protocoles d'Analyse de B-Galactosidase

Cette analyse est utilisée en travaillant avec des vecteurs bactériophages portant le gène bêta-gallon. Si l'événement de clonage perturbe une copie normalement fonctionnelle du gène dans le vecteur les plaques résultantes sembleraient claires dans l'analyse. Si les bactériophages contiennent un gène bêta-gallon fonctionnel ils formeront les boucles bleues autour de leurs plaques. N'importe quelle contrainte qui n'est pas un overproducer de bêta-gallon fonctionnera en tant que bactéries de centre serveur d'indicateur ; une copie chromosomique simple du gène n'est pas un problème. - [analyse lue pour le bactériophage contenant le gène de Bêta-galactosidase]

Catégorie : Protocoles de Levure : Protocoles de la Génétique de Levure : Protocoles d'Analyse de B-Galactosidase

Cette analyse est utilisée en travaillant avec des vecteurs bactériophages portant le gène de bêta-galactosidase (souvent utilisé pour le criblage immunologique). Si l'événement de clonage perturbe une copie normalement fonctionnelle du gène dans le vecteur les plaques résultantes sembleraient claires dans l'analyse. Si les bactériophages contiennent un gène fonctionnel de bêta-galactosidase ils formeront les boucles bleues autour de leurs plaques. N'importe quelle contrainte qui n'est pas un overproducer de bêta galactosidase fonctionnera en tant que bactéries de centre serveur d'indicateur. - [analyse lue pour le bactériophage contenant le protocole de gène de Bêta-galactosidase]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Analyse d'Apoptosis

Détection de phosphatidylsérine Externalization pendant l'Apoptosis. Shailaja Kasibhatla et autres. Un événement tôt dans l'apoptosis est l'externalization de la phosphatidylsérine (picoseconde), un phospholipide normalement limité au feuillet intérieur de la membrane de plasma. Cet événement apoptotic peut être surveillé en utilisant Annexin V, une protéine obligatoire Picoseconde-spécifique. Ce protocole utilise Annexin V-FITC comme sonde, mais la V-biotine d'Annexin est également disponible, et lier peut être indiqué en utilisant le streptavidin-FITC ou l'oth - [détection lue de phosphatidylsérine Externalization pendant l'Apoptosis (abonnement requis)]

Catégorie : Signalisation Des Protocoles de Transduction de Signal

Cette analyse de kinase est censée pour déterminer si un agoniste ou un événement peut influencer l'autophosphorylation de FAK. L'ajout de 1 μl de polyGT au mélange de réaction de kinase déterminera l'activité de l'enzyme contre un substrat. Inclut l'information en fonction : Moisson, immunoprécipitation, réaction de kinase et détection d'anticorps de FAK. - [Analyse Lue de FAK Autophosphorylation]

Catégorie : Protocoles de Levure : Protocoles d'Acide Nucléique de Levure : Protocoles de la Levure PCR

Pour identifier les subclones de YAC contenant une insertion humaine et une partie du bras gauche ou droit du vecteur pYAC4. L'identification de ces derniers copie est nécessaire afin de faire le chromosome de YAC marchant, et est également utile dans la détermination de si un clone particulier de YAC a une insertion humaine contiguë ou si un événement de Co-clonage s'est produit. Des ordres de bras de vecteur sont identifiés en utilisant les fragments pBR322 d'un sommaire de double de BamHI-PvuII. - [l'identification lue de l'extrémité copie dans le protocole de bibliothèques de YAC Subclone]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry D'Écoulement : Protocoles d'Analyse de Cycle de Cellules

Les cellules exponentiellement croissantes sont asynchrones en ce qui concerne l'étape de cycle de cellules. La détection des événements cycle-connexes de cellules est améliorée en enrichissant la culture pour des cellules à l'étape pendant laquelle l'événement particulier se produit. Des méthodes pour synchroniser des cellules sont fournies ici, y compris ceux basées sur les dispositifs morphologiques de la cellule. - [méthodes lues pour synchroniser des cellules aux étapes spécifiques du cycle de cellules]

Catégorie : Isolement de cellules primaires et protocoles de culture : Protocoles de Culture de Cellules Mammifères

Considérations de contrôle de qualité pour la culture de cellules. Inclut : Provenance et intégrité des lignes de cellules ; Action d'éviter de contamination microbienne ; Contrôle de l'environnement ; Ce qui à faire en cas de la contamination ; - [considérations lues de contrôle de qualité pour la culture de cellules]