protocoles d'enzymes

Catégorie : Protocoles de protéine : Protocoles d'Ubiquitination de protéine

Une analyse spécifique de point final pour l'ubiquitin. Rose et autres, Proc Acad national Sci Etats-Unis. 1987. Des analyses simples de point final pour l'ubiquitin libre (Ub) et pour l'enzyme de Ub-lancement sont décrites. - [Analyse spécifique lue de point final d'A pour l'ubiquitin.]

Catégorie : Protocoles de neurologie : L'histologie souille des protocoles : Protocoles histochimiques de taches d'enzymes

Tache de protocole pour l'enzyme de cholinestérase d'acétyle. - [Protocole histochimique lu de tache d'enzymes de cholinestérase d'acétyle]

Catégorie : Protocoles d'ACP : Protocoles renversés de Transcriptase RT-PCR

Le protocole emploie un ARN polymérase thermostable simple pour exécuter la haut-spécificité RT-PCR.  Une réaction à hautes températures de droite est suivie de l'amplification d'ACP du cDNA utilisant un poymerase thermostable simple, l'enzyme d'ACP d'ARN de GeneAmp AccRT des biosystèmes appliqués.  La température de la réaction de droite améliore la spécificité de l'attache d'amorce et réduit également la structure secondaire dans le descripteur, augmentant de ce fait l'efficacité de la polymérisation. - [Amplification lue de l'ARN : Transcription renversée à hautes températures et amplification d'ADN avec du magnésium]

Catégorie : Protocoles de biologie moléculaire : Digestion d'enzymes de restriction

Protocole très détaillé de classe pour l'analyse de l'ADN par le fendage de Restriction Enzyme et l'électrophorèse de gel d'agarose. NG de David, UBC. - [Analyse lue de l'ADN par le fendage de Restriction Enzyme et l'électrophorèse de gel d'agarose]

Catégorie : Protocoles de drosophile

les réactifs Enzyme-joints donnent l'excellente sensibilité et utilisent un photomicroscope simple pour la détection. Un intervalle des enzymes est disponible, mais pour souiller in situ, la peroxydase de raifort adaptera à la plupart des besoins. La diaminobenzidine (TAPE) est l'un des substrats les plus sensibles pour la peroxydase de raifort. Elle rapporte un produit brun intense qui est insoluble en eau et alcool. Elle peut être rendue plus sensible en ajoutant des sels en métal tels que le cobalt ou le nickel à la solution de substrat. - [Ajout lu d'anticorps aux spécimens de drosophile et détection utilisant le protocole Enzyme-Joint de réactifs]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles d'Apoptosis : Apoptosis d'analyse de TUNEL

Détection d'Apoptosis utilisant la transférase terminale et le Biotin-16-dUTP (TUNEL - méthode d'enzymes). Monde d'IHC - [détection lue d'Apoptosis utilisant TUNEL enzymatique]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement : Protocoles d'Apoptosis Cytometry

Protocole pour la détection d'apoptosis utilisant le protocole de TUNEL. Cette technique emploie la transférase terminale de deoxynucleotidyl d'enzymes (TdT) pour étiqueter les cellules qui ont les entailles/ruptures oligonucleosomal de brin en leur ADN. - [Détection lue d'Apoptosis : Protocole de TUNEL]

Catégorie : Analyses de gène de journaliste : Protocoles d'analyse de B-Galactosidase

L'analyse pour la ß-galactosidase se fonde sur la capacité de l'enzyme de catalyser l'hydrolyse d'ONPG (galactopyranoside o-nitrophénylique-ß-d) pour libérer l'o-nitrophénol, qui absorbe la lumière à 420 nanomètre. Dans ce protocole, des extraits des cellules transfected avec un plasmide de journaliste de ß-galactosidase sont incubés avec ONPG. - [Analyse lue pour la ß-galactosidase en extraits des cellules mammifères]

Catégorie : Signalisation des protocoles de transduction de signal

Le protocole te permet de mesurer le contenu de l'adénosine cyclique 3 ', ' - le monophosphate 5 (ampère ou camp cyclique) dans les lymphocytes spléniques de B (cellules de B) dans un immunoessai enzyme-joint. Ce protocole utilise l'acétylation du camp pour améliorer la sensibilité et pour réduire l'interférence. Le protocole inclut l'information en fonction : comment déterminer le camp, les calculs et les réactifs et les matériaux. - [Analyse lue d'ampère cyclique dans Lysates des cellules]

Catégorie : Immunologie : Protocoles de cellules de B

Décrit la stimulation antigénique de la production in vitro d'anticorps par des cellules de B et la mesure ultérieure des anticorps sécrétés. Le premier protocole est un système généralisé pour induire la production in vitro d'anticorps et peut faciliter de divers types d'antigènes à l'étude. Des anticorps sécrétés peuvent alors être mesurés avec une analyse enzyme-jointe d'immunosorbant (ELISA) ou d'autres systèmes de détection de soluble-anticorps. - [Analyses lues pour des protocoles de fonction de lymphocyte de B]

Catégorie : Protocoles d'ACP : Protocoles de clonage d'ACP

Le protocole est pour bi-directionnel, clonage d'émoussé-fin des fragments d'ADN.  L'ADN de cible est ACP amplifié et 3 ' - des extensions sont polies avec de l'ADN polymérase de Pfu.  L'amplicon est ligaturé à une ADN émoussé-terminée de plasmide, et les produits de la réaction de ligature sont employés pour transformer Escherichia coli compétent.  Une enzyme de restriction est ajoutée à la réaction de ligature pour relinearize n'importe quelle ADN de vecteur d'individu-religating. - [Clonage bi-directionnel lu de protocole de produits d'ACP]

Catégorie : Protocoles d'Immunohistochemistry : Blocage des protocoles

Protocoles pour bloquer des solutions. Inclut : Peroxydase endogène bloquant la solution (H2O2-Azide) ; Fond non spécifique d'anticorps bloquant la solution : sérum de porcs ; Fond non spécifique d'anticorps bloquant la solution : LAIT ; Solution enzymatique de recherche d'antigène ; Non-conjugué, biotine et solutions (primaires) fluorochrome-conjuguées d'anticorps ; Non-conjugué, biotine et solutions (secondaires) fluorochrome-conjuguées d'anticorps ; solutions secondaires Enzyme-conjuguées d'anticorps. ; etc… - [lu bloquant des protocoles de solutions]

Catégorie : Protocoles d'ACP : Protocoles de clonage d'ACP

Protocole pour le clonage d'émoussé-fin des produits d'ACP. L'incubation d'une réaction de ligature d'émoussé-fin en présence d'un montant en excédent d'une enzyme appropriée de restriction peut considérablement augmenter le rendement de plasmides de recombinaison.  Le rôle de l'enzyme de restriction est de fendre les concatémères circulaires et linéaires aux sites de restriction qui sont reformés quand les molécules linéaires et émoussé-terminés de plasmide ligaturent à eux-mêmes.  I - [clonage lu d'Émoussé-fin de protocole de produits d'ACP]

Catégorie : Protocoles d'ACP : protocoles de synthèse de cDNA

Cette méthode, pour l'amplification sélective des extrémités intégrales de cDNA, comporte l'ajout d'un adaptateur pendant la transcription renversée.  Cette méthode tire profit de la propension du transcriptase murin d'inverse de virus de leucémie de Moloney (MMLV droite) d'ajouter deux à quatre cytosines ' - à l'extrémité 3 des brins nouvellement synthétisés de cDNA.  Les résidus supplémentaires sont ajoutés quand l'enzyme atteint les 5 ' - couvrent la structure à l'extrémité du descripteur d'ADN messagère. - [Protocole lu de RACE de Chapeau-Commutation]

Catégorie : La génétique et génomique : Protocoles de la génétique de Cancer

Les investigateurs peuvent utiliser l'inactivation de chromosome de X (méthylation) pour déterminer le mode de clonality d'une tumeur ou d'une lésion premalignant dans les femelles. La technique est basée sur une enzyme de restriction et une analyse méthylation-sensibles d'un lieu polymorphe sur le chromosome de X. Les populations clonales de cellules afficheront la « perte » de l'allèle non-méthylé après que sommaire de restriction. L'analyse peut être exécutée sur l'ADN récupérée des échantillons microdissected. Le tissu congelé et le tissu fixe-encastré peuvent être utilisés. - [Clonality lu - protocole d'analyse d'inactivation de chromosome de X]

Catégorie : Protocoles de biologie moléculaire : Digestion d'enzymes de restriction

Enzymes de clonage un guide Promega. Une série de guide de ressource d'enzymes, points culminants ces enzymes importantes des procédures de clonage d'acide nucléique. Promega - [enzymes de clonage lues un guide Promega]

Catégorie : Protocoles viraux de manipulation : Protocoles bactériophages de la manipulation M13

Le protocole décrit trois méthodes standard pour construire des recombinants du bactériophage M13 : (1) ligature de l'ADN d'insertion à un vecteur linéarisé, préparé par le fendage de M13 rf avec de l'enzyme simple de restriction ; (2) utilisant la phosphatase alkaline pour supprimer l'individu-ligature du vecteur linéarisé, et (3) utilisant M13 rf fendu avec deux enzymes de restriction pour le clonage directionnel. - [Le clonage lu dans le bactériophage M13 dirige le protocole]

Catégorie : Protocoles de neurologie : L'histologie souille des protocoles : Protocoles histochimiques de taches d'enzymes

Protocole pour la technique d'oxydase de cytochrome, taches histochimiques d'enzymes. - [Protocole lu de technique d'oxydase de cytochrome]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de titrages de l'enzyme

Protocole pour le cytochrome P450. Inclut : Le microsome analyse le général ; États généraux de réaction ; Substrats spécifiques pour des isozymes du cytochrome P450. - [Protocole de recombinaison lu de microsome d'enzymes de cytochrome P450]

Catégorie : Protocoles d'ELISA : Protocoles d'analyse du sandwich ELISA

Le sandwich ELISA à Cytokine sont des immunoessais sensibles d'enzymes qui peuvent spécifiquement détecter et dosent la concentration des protéines solubles de cytokine et de chemokine. Biosciences du BD - [protocole lu de Cytokine ELISA]

Catégorie : Signalisation des protocoles de transduction de signal : Protocoles de Cytokine

Cytokine Enzyme-a joint des analyses de la tache d'immunosorbant (ELISPOT). Mémoires tampons de Cytokine ELISPOT et protocole de procédé. - [Protocoles lus de Cytokine ELISPOT (ImmunoSPOT Enzyme-joint)]

Catégorie : Protocoles d'ACP : Protocoles de clonage d'ACP

Le protocole est pour le clonage directionnel d'émoussé-fin des fragments d'ADN.  L'ADN de cible ACP-est amplifiée, 3 ' - des extensions sont polies avec de l'ADN polymérase de Pfu, et l'amplicon est ligaturé à une ADN émoussé-terminée de plasmide.  Les produits de la réaction de ligature sont employés pour transformer Escherichia coli compétent.  Une enzyme de restriction est ajoutée à la réaction de ligature pour relinearize n'importe quelle ADN de vecteur d'individu-religating. - [Clonage directionnel lu de protocole de produits d'ACP]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de cytotoxicité : Analyses de cytotoxicité dans des protocoles de culture de cellules

Des cellules de macrophage dans la culture peuvent être exposées aux particules, et aux effets résultants sur la viabilité de cellules déterminée par des analyses essentielles de fuite d'exclusion et d'enzymes de colorant. - [La toxicité lue de la poussière dans le macrophage alvéolaire de rat cultive le protocole]

Catégorie : Protocoles d'ELISA

Méthode et technique d'ELISA (analyse Enzyme-Jointe d'ImmunoadSorbent). Jill Fergusson, service de la biochimie, université de Nottingham, - [ELISA lu (analyse Enzyme-Jointe d'ImmunoadSorbent)]

Catégorie : Protocoles d'ELISA

Protocole pour les immunisations et l'analyse enzyme-jointe d'immunosorbant (ELISA) pour la détermination d'isotype d'anticorps. - [ELISA lu pour le protocole de détermination d'isotype d'anticorps]