protocoles déterminés

Catégorie : Analyses de Gène De Journaliste : Protocoles d'Analyse de B-Galactosidase

La quantité recommandée de plasmide de RSV-solides solubles-Galactosidase à utiliser pour le transfection des cellules (plat de 60 millimètres ou de 100 millimètres) est le µg 1-2. La quantité optimale d'ADN de plasmide sera déterminée par l'efficacité du transfection, qui dépend très de la ligne de cellules et du protocole particuliers de transfection. - [Protocole Lu d'Analyse de Galactosidase de B]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : Analyses de cytotoxicité dans des protocoles de culture de cellules

Les cellules A431 humaines et les cellules de la souris 3T3 sont exposées dans la culture à la lumière UV en la présence et l'absence du composé d'essai.  Phototoxicity est exprimé comme une diminution de la viabilité de cellules comme déterminé par l'analyse de MTT. - [Protocole Lu d'Essai de Phototoxicity de Culture de Cellules]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : Analyses de cytotoxicité dans des protocoles de culture de cellules

La cytotoxicité potentielle des composés dans des conditions hypoxiques est déterminée en exposant des cultures de cellules aux composés d'essai dans une basse atmosphère de l'oxygène.  La survie ultérieure de cellules est déterminée par les analyses colorimétriques de bleu de MTT et de méthylène. - [analyses colorimétriques lues de Cytotoxcity pour le protocole dépendant de cellules d'Anchorage]

Catégorie : Protocoles Moléculaires de Biologie : Protocoles d'Hydrate de carbone

Les étapes de Deglycosylation sont différentes avec de la chaque glycoprotéine et doivent être déterminées empiriquement (des méthodes en Enzymology, 1994, 230 : 44-57). Une réaction typique d'essai de transferrine humaine est décrite. T.H. Plummer, Jr. et A.L. Tarentino, service de la biochimie, service de l'état de New-York de la santé, centre de Wadsworth pour des laboratoires et recherche, Albany, New York - [Deglycosylation lu des glycoprotéines en utilisant Endoglycosidases]

Catégorie : Protocoles de Protéine : Protocoles de Concentration de Quantitation de Protéine

Détermination du coefficient d'extinction pour une protéine de concentration inconnue. La concentration peut être déterminée pour une solution d'une protéine pure avec le coefficient inconnu d'extinction. - [détermination lue du coefficient d'extinction pour une protéine de concentration inconnue]

Catégorie : Protocoles de Transfection : Protocoles Stables de Transfection

Des champs électriques pulsés peuvent être employés pour présenter l'ADN dans une grande variété de cellules animales. Electroporation fonctionne bien avec les lignes de cellules qui sont réfringentes à d'autres techniques, telles que le coprecipitation de phosphate-ADN de calcium. Mais, comme avec d'autres méthodes de transfection, les conditions optimales pour electroporating l'ADN dans les lignes non essayées de cellules doivent être déterminées expérimentalement. - [ADN lue Transfection par Electroporation]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : Analyses de cytotoxicité dans des protocoles de culture de cellules

Des cellules de macrophage dans la culture peuvent être exposées à la matière particulaire, et aux effets résultants sur la viabilité de cellules déterminée par des analyses essentielles de fuite d'exclusion et d'enzymes de colorant. - [la toxicité lue de la poussière dans le macrophage alvéolaire de rat cultive le protocole]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Biologie et culture de cellules de tige d'es : Test potentiel embryotoxique des produits chimiques

ESSAI EMBRYONNAIRE DE CELLULES DE TIGE (EST). Le potentiel embryotoxique des produits chimiques est déterminé par l'évaluation de l'inhibition de la différentiation des cellules de tige embryonnaires (es) et de l'inhibition de la croissance des cellules es et 3T3. Service d'Information Scientifique - [ESSAI EMBRYONNAIRE Lu de CELLULES de TIGE (Est)]

Catégorie : Protocoles De Clonage

Le protocole décrit une méthode pour la fragmentation d'ADN par le nebulization, en lequel la brume fine créée en forçant une solution d'ADN par un petit trou dans l'unité de nébuliseur est rassemblée. La taille des fragments obtenus par nebulization est déterminée principalement par la vitesse à laquelle la solution d'ADN traverse le trou, modifiant la pression du gaz soufflant par le nébuliseur, la viscosité de la solution, et la température. - [fragmentation lue de l'ADN par Nebulization Protocol]

Catégorie : Protocoles De Microinjection : Microinjection des protocoles d'ADN

Ce protocole décrit une méthode pour constant-coulent microinjection en utilisant le PicoPump pneumatique (instruments de précision du monde). Ce type de système est très simple et peut être réuni sur un budget relativement bas. Dans cette méthode, un écoulement constant d'échantillon est fourni de l'extrémité de la pipette, et la quantité d'échantillon injectée dans la cellule est déterminée près combien de temps la pipette reste dans la cellule. - [la livraison lue de gène par l'utilisation directe d'injection (Microinjection) Commandé-Coulent protocole de système]

Catégorie : Isolement de cellules primaires et protocoles de culture : Protocoles de Culture de Cellules Mammifères

La génération d'une courbe de croissance peut être utile en évaluant les caractéristiques de croissance d'une ligne de cellules. À partir d'une courbe de croissance, le temps de latence, le temps doublant de population, et la densité de saturation peuvent être déterminés. - [génération lue de protocole de courbe de croissance]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : La Cytotoxicité Spécifique de Cellules Analyse des Protocoles

La base de ce procédé est que le type spécifique préparations des cellules deux peut être isolé, exposé séparément à de divers composés sur un intervalle des concentrations, et à la cytotoxicité de ces derniers déterminée.  L'indicative considéré par paramètres d'un effet cytotoxique incluent une réduction en synthèse de protéine de de novo et métabolisme diminué d'acide gras de glucose et.  Un effet cytotoxique peut indiquer qu'un produit chimique est susceptible d'être in vivo néphrotoxique. - [glomérules d'isolement lus de rat et Tubules proximal]

Catégorie : Protocoles De Cytogénétique

Karyotyping est un outil valable de recherches utilisé pour déterminer le complément de chromosome dans les cellules cultivées. Il est important de maintenir dans l'esprit que les karyotypes évoluent avec la culture continue. En raison de cette évolution, il est important pour la traduction de données biochimiques ou autres, que le karyotype d'une secondaire-ligne spécifique soit déterminé. - [Protocole Lu de Karyotyping]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : Analyses de cytotoxicité dans des protocoles de culture de cellules

Cet essai de cytotoxicité culture-basé par cellule simple (dans quelle viabilité de cellules est déterminée par la prise de l'acétate de bromure et de fluorescéine d'éthidium de colorants) a été développé comme essai général pour la toxicité aiguë. - [Essai Lu de LS-L929 Cytotoxcitiy]

Catégorie : Protocoles d'Interactions de Protéine d'ADN : Protocoles d'Analyse de Footprinting de DNase

La DNase I est employée pour réduire une ADN radioactive de cible en la présence et l'absence d'un extrait nucléaire.  Une "empreinte de pas" est produite quand une protéine lie à la cible et protège un segment spécifique de l'ADN contre l'activité nucleolytic de la DNase I. En comparant la mobilité électrophorétique des produits de fendage de la DNase I à ceux d'une échelle d'ordre dérivée du même fragment d'ADN, le position(s) des ordres d'ADN identifiés par les protéines ADN-LIANTES peut être déterminé. - [lu traçant les sites Protéine-liants sur l'ADN par protocole de Dnase I Footprinting]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : Analyses de cytotoxicité dans des protocoles de culture de cellules

Perméabilité du membrane des cultures inondées de cellules, aussi déterminée par le flux de [ 3H]-2-deoxy-D-glucose-6phosphate, est utilisé comme indicateur de l'effet cytotoxique des produits chimiques. - [membrane lue Permability comme mesure de Cytotoxcity dans les cultures inondées de cellules]

Catégorie : Isolement de cellules primaires et protocoles de culture : Protocoles de Microdissection de Saisie de Laser

Des tissus humains sont composés des populations agissantes l'un sur l'autre multiples de cellules dans un agencement tridimensionnel complexe avec chaque phénotype cellulaire déterminé par un seul profil d'expression de mRNA et de protéine. Avant que des techniques de microdissection aient été développées, les seuls outils d'analyse pour des études phénotypiques étaient hybridation principalement immunohistochemistry et in-situ. Tandis qu'utiles, ces outils sont limités pour choisir l'analyse de gène et, en général, ne permettent pas des études qualitatives. - [Vue d'ensemble Lue de Microdissection]

Catégorie : Protocoles De Biologie d'Usine : Protéines végétales, peptides et antigènes

L'activité de solides solubles-glucuronidase (GUS) peut être exactement déterminée dans le tissu végétal intact en utilisant 4-methylumbelliferyl solides solubles-D-glucuronide (4-attaque à main armée) comme substrat. Lors de l'hydrolyse par GUS, l'umbelliferone du fluorochrome 4-methyl (4-MU) est produit. Cette méthode est basée sur la perméabilité de 4-attaque à main armée et de 4-MU par le tissu végétal. Elle se compose de l'incubation du tissu avec du réactif et la quantification de la fluorescence émise par 4-MU dans la solution. L'activité de GUS dans chaque échantillon peut être... - [analyse quantitative lue d'activité de GUS dans le protocole intact de tissu végétal]

Catégorie : Protocoles de PCR : Protocoles Quantitatifs de PCR

PCR quantitatif implique le Co-amplification de deux descripteurs : une quantité constante d'une préparation contenant les dilutions désirées d'ordre et de publication périodique de cible d'un descripteur de référence qui est ajouté dans des montants connus à une série de réactions d'amplification.  La concentration de l'ordre de cible est déterminée par interpolation simple dans une courbe standard. - [Protocole Quantitatif Lu II de PCR]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : La Cytotoxicité Spécifique de Cellules Analyse des Protocoles

Chez ce lapin d'essai des chondrocytes articulaires sont cultivés en présence du composé d'essai, dont la toxicité est alors déterminée par son effet sur la production de proteoglycan par les cellules, comme détecté par le bleu d'Alcian de colorant. - [Essai Fonctionnel Articulaire Lu de Toxicité De Chondrocyte De Lapin]

Catégorie : Protocoles de PCR : Protocoles Renversés de Transcriptase RT-PCR

Dans la première partie de ce protocole, l'intervalle linéaire de l'amplification est déterminé en effectuant 10 PCRs identiques en présence de [ {alpha}-32P]dCTP et arrêt d'une réaction après chaque deux cycles.  Des produits d'amplification sont mesurés sur un gel de polyacrylamide dénaturant et les résultats tracés sur un graphique (comptes par minute contre le nombre de cycle).  L'ARN total est utilisé comme commande interne. - [RT-PCR Relatif Lu : Déterminant l'intervalle linéaire de l'amplification et optimalisant le Primers:Competimer]

Catégorie : Protocoles de pharmacologie et de toxicologie : Protocoles de Cytotoxicité : Analyses de cytotoxicité dans des protocoles de culture de cellules

des cellules cornéennes Lapin-dérivées sont cultivées en présence des composés d'essai, dont la toxicité sont déterminées par leur effet sur la viabilité de cellules.  Une diminution du nombre de cellules, comme mesuré par la prise du rouge neutre de colorant, sert d'indicateur de cytotoxicité potentielle.  On a proposé cet essai comme alternative potentielle de remplacement pour l'essai d'irritation d'oeil de Draize. - [Essai Lu de SIRC Cytotoxcitiy]

Catégorie : Protocoles Occidentaux de Tache : Taches d'Immunoblot pour des protocoles de protéine totale

Le protocole employé pour déterminer la position des repères de poids moléculaire et pour s'assurer que le transfert efficace des protéines à la tache s'est produit, toute la composition des protéines peut être déterminé en souillant la membrane avec Ponceau S (souillant Immunoblots pour la protéine totale en utilisant l'encre de Ponceau S) ou d'Inde. - [lu souillant Immunoblots pour la protéine totale en utilisant le protocole d'encre d'Inde]

Catégorie : Protocoles Occidentaux de Tache : Taches d'Immunoblot pour des protocoles de protéine totale

Le protocole employé pour déterminer la position des repères de poids moléculaire et pour s'assurer que le transfert efficace des protéines à la tache s'est produit, toute la composition des protéines peut être déterminé en souillant la membrane avec Ponceau S. - [lu souillant Immunoblots pour la protéine totale en utilisant le protocole de Ponceau S]

Catégorie : Protocoles De Biologie d'Usine : Protéines végétales, peptides et antigènes

GUS est employé car une étiquette pour adresser la localisation nucléaire tandis que GFP est plus souple. GFP est discernable directement en cellules vivantes, GUS est seulement détecté indirectement par la souillure du tissu fixe qui peut mener aux objets façonnés ou peut obscurcir des problèmes avec la solubilité des protéines. Dans ce protocole, on analyse par habitude la localisation de protéine après transformation passagère particule-négociée des cellules épidermiques d'oignon. Avec cette méthode il peut déterminer rapidement si une protéine donnée de fusion est en activité et.... - [localisation sous-cellulaire lue de GUS- et de protéines GFP-Étiquetées en cellules épidermiques d'oignon]