protocoles aminés

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement : ADN souillant des protocoles pour l'écoulement Cytometry

L'incorporation de 5 bromo-2-deoxyuridine (BrdU) en reproduisant l'ADN des cellules de prolifération peut être employée pour mesurer leur prolifération. Ce protocole permet l'identification des cellules qui ont incorporé BrdU par l'écoulement cytometry. - [5-Bromo-2-Deoxyuridine lu (BrdU) et 7-Amino-Actinomycin (7-AAD) souillant pour l'analyse de prolifération de cellules]

Catégorie : Protocoles de Microarray d'ADN

Ce protocole décrit l'écriture de labels de l'ARN eucaryotique avec des nucléotides étiquetés par aminoallyl par l'intermédiaire de la première synthèse de cDNA de brin suivie d'un couplage des groupes d'aminoallyl à l'une ou l'autre molécules fluorescentes de la cyanine 3 ou 5 (la CY 3/Cy5). Hasseman. TIGR Microarr - [écriture de labels lue d'Aminé-allylique]

Catégorie : Protocoles de Microarray : méthodes de Microarray d'Aminé-allylique

Protocole pour l'écriture de labels d'aminé-allylique (GeneTAC). Inclut : Réaction de droite ; Mélange de nucléotide pour une réaction ; Couplage ; Prehybridization de sonde. - [Protocole de écriture de labels lu d'Aminé-allylique (GeneTAC)]

Catégorie : La génétique et génomique : Protocoles de la génétique de Cancer

Décrivez les méthodes pour identifier et doser la transcription spécifique d'A/E9a dans t (8 ; 21) échantillons de patients relativement à la transcription d'AML1-ETO encodant 752 la protéine intégrale bien connue de l'acide aminé AML1-ETO (EA). Inclut : Préparation d'ARN et RT-PCR ; Quantitation relative de l'AE9a et des transcriptions des EA. - [Lu un Isoform alternativement épissé de t (8 ; 21) La transcription favorise Leukemogenesis]

Catégorie : Protocoles d'Immunohistochemistry : Protocoles de recherche d'antigène

Protocole utilisé à pour immunohistochemistry sur les sections paraffine-encastrées. Basé sur l'utilisation de l'énergie de micro-onde d'effectuer la recherche d'antigène. Le procédé immunohistochemistry, sert du kit de HistoScan de Biomeda basé sur un système de détection d'anticorps de streptavidin-peroxidase/biotinylated deuxième avec 3 aminés, l'ethylcarbazole 9 (l'AEC) comme chromogène. Assurément, d'autres kits ou réactifs faits maison fonctionneront également. - [Recherche lue d'antigène pour Immunohistochemistry avec le protocole Paraffine-Encastré de tissus]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles immobilisés de chromatographie d'affinité d'ion en métal

La chromatographie d'affinité immobilisée d'ion en métal (IMAC) exploite l'affinité d'une molécule pour les ions chélatés en métal.  L'histidine d'acide aminé actuelle en beaucoup de protéines forme des complexes avec des ions en métal de transition tels que Cu2+, Zn2+, Ni2+ et Fe3+.  Sepharose™ de chélation coulent rapidement avec un ion immobilisé approprié en métal donc maintiendra sélectivement des protéines avec de l'histidine exposée. - [la sépharose de chélation lue coulent rapidement le protocole]

Catégorie : Protocoles de culture de cellules

Protocole employé pour étudier la sécrétion des protéines et des prostaglandines par l'endomètre de la vache, de la brebis, de la jument, de la chienne et d'autres espèces. La technique est également utile pour la culture des conceptuses de peri-implantation et des tissus placentaires pour des études de écriture de labels métaboliques et pour obtenir les protéines sécrétrices de conceptus pour des études biologiques. Le support utilisé s'appelle Pig MEM, qui est un support essentiel modifié de minimum complété avec des acides aminés non essentiels, les vitamines, l'insuline et le glucose supplémentaire. - [Culture lue d'Explants endométrial et de Peri-implantation Conceptuses pour surveiller la synthèse et la sécrétion]

Catégorie : Protocoles de culture de cellules : Protocoles de fixation de cellules

Le traitement des cellules avec du paraformaldéhyde mène à l'établissement des réticulations chimiques entre les groupes aminés libres. Quand les réticulations joignent différentes molécules, un treillage des interactions se produit qui tient l'architecture globale de la cellule ensemble. Des solutions commerciales de formaldéhyde ne sont pas recommandées, parce qu'elles manquent des avantages d'utiliser un polymère de longueur variable, et les cellules seront simultanément fixées avec de l'alcool (habituellement méthanol). - [Cellules jointes par fixation lues dans le protocole de paraformaldéhyde]

Catégorie : Protocoles de culture de cellules : Protocoles de fixation de cellules

Le traitement des cellules avec du paraformaldéhyde mène à l'établissement des réticulations chimiques entre les groupes aminés libres. Quand les réticulations joignent différentes molécules, un treillage des interactions se produit qui tient l'architecture globale de la cellule ensemble. - [Cellules de réparation lues de suspension avec le protocole de paraformaldéhyde]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de cycle de cellules : Protocoles de phase de G

Ce protocole utilise le mimosine d'acide aminé d'usine comme G1/S synchronisant l'agent. Des cellules sont d'abord traitées avec de la thymidine excessive pour accumuler la plupart d'entre eux à G1/S ; cependant, quelques cellules auront arrêté la croissance dans la phase de S. La thymidine est alors éliminée pour permettre à toutes les cellules de procéder complètement par la phase de S. Mimosine est alors ajouté pour arrêter les cellules au cadre de G1/S. Quand le mimosine est retiré, les cellules commenceront à entrer dans la phase de S dans environ 1 heure. - [Synchronisation lue de phase de G1/S utilisant le protocole d'arrestation de Mimosine]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de cycle de cellules : Protocoles de phase de S

Le protocole utilise le mimosine d'acide aminé d'usine comme G1/S synchronisant l'agent. Des cellules sont d'abord traitées avec de la thymidine excessive pour accumuler la plupart d'entre eux à G1/S ; cependant, quelques cellules auront arrêté la croissance dans la phase de S. La thymidine est alors éliminée pour permettre à toutes les cellules de procéder complètement par la phase de S. Mimosine est alors ajouté pour arrêter les cellules au cadre de G1/S. Quand le mimosine est retiré, les cellules commenceront à entrer dans la phase de S dans environ 1 heure. - [Synchronisation lue de phase de G1/S utilisant le protocole d'arrestation de Mimosine]

Catégorie : Biologie de cellules et culture de cellules : Protocoles de Cytometry d'écoulement : Protocoles d'analyse de cycle de cellules

Ce protocole utilise le mimosine d'acide aminé d'usine comme G1/S synchronisant l'agent. Des cellules sont d'abord traitées avec de la thymidine excessive pour accumuler la plupart d'entre eux à G1/S ; cependant, quelques cellules auront arrêté la croissance dans la phase de S. La thymidine est alors éliminée pour permettre à toutes les cellules de procéder complètement par la phase de S. Mimosine est alors ajouté pour arrêter les cellules au cadre de G1/S. Quand le mimosine est retiré, les cellules commenceront à entrer dans la phase de S dans environ 1 heure. - [Synchronisation lue de phase de G1/S utilisant le protocole d'arrestation de Mimosine]

Catégorie : Protocoles de chromatographie

Son pdf de protocole de chromatographie d'affinité de nickel d'étiquette. Le laboratoire de Wallert et de principal. Théorie et introduction : La chromatographie de Ni-Affinité utilise la capacité à lui de lier le nickel. Six acides aminés de histadine à l'extrémité d'une protéine (terminus de N ou de C) est connus comme un 6X son étiquette. Du nickel est lié à un programme d'agarose par chélation utilisant les programmes (NTA) acides nitroloacetic. Le produit de plusieurs compagnies ces programmes en tant que ses protéines étiquetées sont certaines des étiquettes d'affinité les plus utilisées sur le marché de today’s. - [Lu son pdf de protocole de chromatographie d'affinité de nickel d'étiquette]

Catégorie : Protocoles d'anticorps : Protocoles de écriture de labels d'anticorps

Cette méthode pour étiqueter les anticorps monoclonaux implique d'élever des hybridomes en présence des acides aminés radioactifs. Ce protocole peut être particulièrement utile quand cause de écriture de labels conventionnelle de techniques l'anticorps pour détruire l'activité. Les anticorps étiquetés qui résultent sont essentiellement identiques aux anticorps non étiquetés. - [Anticorps monoclonaux de écriture de labels lus par Biosynthesis Protocol]

Catégorie : Protocoles de neurologie : L'histologie souille des protocoles : Protocoles histochimiques de taches d'enzymes

Protocole pour la tache histochimique de peptidase aminée de leucine. - [Protocole histochimique lu de tache de peptidase aminée de leucine]

Catégorie : Protocoles d'ACP : protocoles de synthèse de cDNA

Dans MOPAC, l'aminé-terminal et les ordres carboxy-terminal d'un peptide sont utilisés pour concevoir deux familles redondantes des oligonucléotides encodant les ordres carboxy-terminal d'aminoand du peptide.  Les amorces sont utilisées pour amplifier un segment de cDNA préparé par RT-PCR d'un tissu connu pour exprimer la protéine ou pour amplifier un segment de l'ADN d'une bibliothèque établie genomic ou de cDNA. - [Amplification Oligonucléotide-amorcée mélangée lue de protocole de cDNA MOPAC]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie d'affinité

Le protocole décrit le couplage des peptides ou du l'Affi-Gel 10 (Bio-Rad) de protéines.  l'Affi-Gel 10 est une agarose réticulée dérivatisée avec de l'ester de N-hydroxysuccinimide (NHS) sur un atome-long bras de l'entretoise 10.  L'ester de NHS permet le couplage spontané des protéines par l'intermédiaire des groupes aminés libres. - [Protocole lu de chromatographie d'affinité de Ligand de protéine]

Catégorie : Protocoles de peptide

Protocole pour la synthèse manuelle de peptide. Gonflement de résine et couplage des esters lancés d'acide aminé. Décalant et fendant le peptide du support plein. Synthèse des peptides. L'université du service de noyau de protéine de Nébraska-Lincoln - [protocole lu pour la synthèse manuelle de peptide]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie d'affinité

Des protéines de recombinaison machinées pour avoir une queue de polyhistidine au terminus carboxylique ou aminé peuvent facilement être épurées dans une étape par la chromatographie d'affinité sur une résine portant les ions chélatés de nickel.  La chromatographie peut être effectuée dans la colonne ou les formats en lots.  Après que des protéines non liées soient enlevées, la protéine de cible est éluée utilisant l'imidazol, qui préserve typiquement les dispositifs antigéniques et fonctionnels de la protéine. - [Purification lue des protéines Histidine-étiquetées par protocole immobilisé de chromatographie d'absorption de Ni2+]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie liquide

Le protocole détaille la purification et l'analyse de beaucoup de peptides synthétiques de 2-65 résidus d'acide aminé.  Ces peptides contiennent un certain nombre de chaînes latérales ionisables ou polaires, mais ne contiennent pas les éléments structuraux secondaires (tels que des ß-feuilles) cette faveur supramoléculaire. - [Purification lue des peptides de la synthèse en phase solide de peptide avec le protocole de RP-HPLC]

Catégorie : Protocoles de Microarray : méthodes de Microarray d'Aminé-allylique

Catégorie : Protocoles de culture de cellules de levure : Medias de levure, solutions et protocoles de stocks

Les solutions pour les hartwell terminent les medias (HC). Inclut : 10X HC (liquide d'acide aminé de 7 renvois) ; 10X YNB ; Solutions d'acide aminé. - [Les solutions lues pour Hartwell terminent les medias (HC)]

Catégorie : Analyses de gène de journaliste : Protocoles d'analyse de Luciferase

Le protocole décrit une analyse de complémentation de luciferase de fractionnement employée pour étudier l'interaction des protéines en cellules. Dans la stratégie de protéine de fractionnement, une protéine simple de journaliste/enzyme (luciferase de luciole [Fluc]) est fendue dans l'aminé-terminal et les moitiés carboxy-terminal ; chaque moitié est fondue à une de deux protéines de interaction, X et les interactions physiques de Y. entre les deux protéines reconstituent la protéine fonctionnelle de journaliste, menant aux activités enzymatiques qui peuvent être près mesurée analyse in vitro ou in vivo - [analyse lue de complémentation de Luciferase de fractionnement pour étudier l'interaction des protéines X et Y en cellules]

Catégorie : Protocoles de culture de cellules de levure : Protocoles de sporulation de levure

Protocoles et information sur la sporulation. Inclut : Medias de SPO++ ; actions de l'acide aminé 10X ; Sporulation ; Dissection. - [Guide lu de sporulation]

Catégorie : Protocoles de chromatographie : Protocoles de chromatographie liquide

Protocole pour l'isotope stable étiquetant par des acides aminés dans la culture de cellules (SILAC). Le protocole décrit comment appliquer SILAC et l'utilisation de nano-mesurent la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse d'ionisation electrospray pour l'identification et la quantification de protéine.  Ce procédé peut être rempli en 8 jours. - [Isotope stable lu étiquetant par des acides aminés dans le protocole de culture SILAC de cellules]