Protocoles immobilisés de chromatographie d'affinité d'ion en métal

La chromatographie d'affinité immobilisée d'ion en métal (IMAC) exploite l'affinité d'une molécule pour les ions chélatés en métal.  L'histidine d'acide aminé actuelle en beaucoup de protéines forme des complexes avec des ions en métal de transition tels que Cu2+, Zn2+, Ni2+ et Fe3+.  Sepharose™ de chélation coulent rapidement avec un ion immobilisé approprié en métal donc maintiendra sélectivement des protéines avec de l'histidine exposée. - [la sépharose de chélation lue coulent rapidement le protocole]

Le protocole est la deuxième étape dans un procédé en trois étapes pour la préparation et l'enrichissement des phosphopeptides utilisant la chromatographie d'affinité immobilisée en métal (IMAC) pour l'identification des phosphopeptides par Mme de LCMS/. Ce procédé décrit la construction des colonnes microchromatographic, ou micro-incline. - [La construction lue de Micro-Inclinent pour l'usage dans le protocole d'IMAC]

Le protocole est la première étape dans un procédé en trois étapes pour la préparation et l'enrichissement des phosphopeptides utilisant la chromatographie d'affinité immobilisée en métal (IMAC) pour l'identification des phosphopeptides par LC-MS/MS.  Ce procédé est employé pour préparer des extraits de protéine des cellules WEHI-231.  Cette méthode de préparation fournit les échantillons cellulaires totaux de protéine qui sont exempts de souiller les acides nucléiques. - [Extraction lue de lysis et de protéine à partir de cellules WEHI-231 avec le protocole de réactif d'isolement de TriPure]

Protocole pour l'optimisation des concentrations en imidazol pour la chromatographie d'affinité immobilisée de métal-ion. La plupart des échantillons dont histidine-a étiqueté des protéines doivent être épurés également contiennent les contaminants endogènes de protéine qui lient à l'adsorbant immobilisé de la chromatographie d'affinité de métal-ion (IMAC).  Habituellement, ces protéines lient plus faiblement que la protéine histidine-étiquetée. - [Optimisation lue des concentrations en imidazol pour le protocole immobilisé de chromatographie d'affinité de Métal-Ion]

Protocole pour emballer une colonne d'IMAC. Le protocole décrit une procédure pour emballer une colonne immobilisée 30 par ml de la chromatographie d'affinité de métal-ion (IMAC) à l'aide d'une pompe. - [Lu emballant un protocole de colonne d'IMAC]

Le protocole est spécifiquement pour l'enrichissement supplémentaire des phosphopeptides d'un phosphotyrosine déroulant.  C'est l'étape finale pour la préparation et l'enrichissement des phosphopeptides utilisant la chromatographie d'affinité immobilisée en métal (IMAC) pour l'identification des phosphopeptides par la spectrométrie de masse tandem de chromatographie liquide (LC-MS/MS). - [Préparation et enrichissement lus des phosphopeptides du protocole de Phosphotyrosine]

Le protocole est la troisième étape dans un procédé en trois étapes pour la préparation et l'enrichissement des phosphopeptides utilisant la chromatographie d'affinité immobilisée en métal (IMAC) pour l'identification des phosphopeptides par Mme de LCMS/- [préparation et enrichissement lus des phosphopeptides utilisant IMAC et LC-MS/MS]

Protocole pour la préparation d'une colonne préemballée d'IMAC. La purification des protéines histidine-étiquetées sur une échelle de milligramme peut être exécutée commodément sur une petite (1to 5 ml) colonne immobilisée de la chromatographie de métal-ion (IMAC) utilisant une seringue pour charger l'échantillon, pour laver la colonne, et pour éluer la protéine. - [Préparation lue d'un protocole préemballé de colonne d'IMAC]

Exécutez ce protocole après détermination de la concentration en imidazol qui rapporte la meilleure purification de la protéine de recombinaison d'intérêt. - [Purification lue de protéine utilisant la chromatographie d'affinité immobilisée de Métal-Ion sous l'imidazol optimalisé]

La chromatographie d'affinité immobilisée de métal-ion (IMAC) convient à la purification des protéines sous dénaturer des conditions.  Guanidine-HCL ou urée peut être utilisé, bien que guanidine-HCL soit un dénaturant plus fort que l'urée.  Des protéines qui ont été adsorbées à la colonne en présence de la mémoire tampon guanidine-contraignante peuvent être lavées avec la mémoire tampon urée-contraignante et être éluées avec la mémoire tampon d'élution d'urée. - [Purification lue des protéines Histidine-Étiquetées sous dénaturer des conditions utilisant le protocole d'IMAC]

des protéines Histidine-étiquetées peuvent être épurées sur les colonnes immobilisées d'1 ml préemballées de la chromatographie d'affinité de métal-ion (IMAC) sans optimisation des conditions de séparation.  La méthode permet la saisie rapide de la protéine de cible, bien qu'avec une pureté inférieure que peut être obtenu dans des conditions optimalisées. - [Purification lue des protéines Histidine-Étiquetées utilisant IMAC sans protocole d'optimisation de paramètre]