Protocoles sous-cellulaires de fractionnement

Le protocole décrit les systèmes dans lesquels on permet aux les membranes de flotter par un gradient de densité d'une zone dense de chargement. C'est un format idéal. - [Lu un gradient Self-generated pour distinguer un emplacement cytosolique ou de membrane de grand complexe de protéine]

Protocole pour l'interruption de cellules et le fractionnement sous-cellulaire. Inclut : Panne, fractionnement et réactifs d'azote. - [Interruption lue de cellules et protocole sous-cellulaire de fractionnement]

Le protocole pour l'isolement de la cellule dendritique a dérivé des exosomes. - [Cellule dendritique lue Dérivée-Exosomes]

Acidocalcisomes, les organelles calcium-enregistrantes acides denses, qui ont été initialement identifiées dans le cruzi de Trypanosoma, n'ont aucun parallèle en cellules mammifères. Elles représentent ainsi une seule caractéristique fonctionnelle, non partagée par le serveur et par conséquent offrent une cible potentielle importante pour la chimiothérapie de la maladie de Chagas. - [Fractionnement lu d'Acidocalcisomes et d'autres organelles de Trypanosoma, de Leishmania, chlamydomonas]

Un certain nombre de stratégies de gradient de densité ont été développées pour le fractionnement des érythrocytes humains selon leur âge. Pendant que les cellules vieillissent, ainsi leur densité tend à augmenter ; les reticulocytes tendent donc à avoir les plus faibles densités. Reticulocytes fréquemment ont été partiellement épurés sur des gradients discontinus d'arabinogalactane ; l'intervalle réel de densité étant tout à fait divers, de tout à fait le large. - [Fractionnement lu des érythrocytes humains (normale ou faucille) et du Reticulocytes dans Iodixanol discontinu]

Fractionnement de (a) vacuolaire et vésicules subvacuolar et (b) vacuole et cytoplasme-à-vacuole visant des vésicules (de Cvt) des sphéroplastes de levure dans des gradients discontinus préformés d'un iodixanol. Le protocole inclut : Formation des sphéroplastes de levure ; Isolement et vesiculation des vacuoles ; Séparation des vésicules vacuolaires et subvacuolar ; Séparation des vacuoles et des vésicules de Cvt d'un lysate de sphéroplaste de levure. - [Fractionnement lu des vésicules vacuolaires et de Subvacuolar et de la vacuole et de l'optimisation de Cytoplasme-à-Vacuole]

Protocole pour le gradient de percoll. Inclut : Formant le gradient, éliminant le percoll et les réactifs. - [Protocole lu de gradient de Percoll]

L'emploi de la centrifugation différentielle pour préparer les fractions brutes des particules sous-cellulaires des homogénats est souvent une première étape nécessaire à une purification ultérieure d'un ou plusieurs particules sur un gradient de densité. Ce protocole décrit l'utilisation de la centrifugation différentielle de fractionner un homogénat mammifère de foie mais les méthodes semblables devraient s'appliquer à tous les tissus mammifères et cellules cultivées. - [Préparation lue des fractions sous-cellulaires brutes par protocole de Differential Centrifugation]

Ce protocole est utilisé pour la purification d'une population des cellules muscle-dérivées du muscle squelettique des animaux C57Bl/6. La préparation en résultant est un mélange de beaucoup de types de cellules comprenant les cellules satellites (a.k.a., cellules d'ancêtre de muscle) et les cellules muscle-dérivées hematopoietically actives. - [Protocole lu pour l'isolement d'une population Muscle-Dérivée hétérogène de cellules]

Bien que les gradients de Percoll aient pu fournir une fraction épurée de sporocyst, parce que ces particules toutes ne se réunissent pas d'une façon discrète dans de tels gradients, elles ne pouvaient pas fournir un isolement simultané d'une fraction pure de mur d'oocyst. Les gradients ont formé de ce protocole d'une part peuvent fournir les sporocysts et les murs épurés d'oocyst dans le même gradient. - [Purification lue des murs et de Sporocysts d'Oocyst de protocole de gondii de toxoplasme]

Dans la méthode de sous-programme décrite dans ce protocole, le plasma chylomicron-libre est ajusté sur l'iodixanol de 12% (poids/volume) et l'échantillon, remplit essentiellement tube approximatif de 3 ml pour un rotor proche-vertical. Pendant la centrifugation VLDL, les particules de LDL et de HDL et également les protéines de plasma sont executé de toutes les parties de l'échantillon dans leur position flottable finale de bande de densité dans le gradient de densité de individu-formation. - [Subfractionation lu de lipoprotéine à basse densité (LDL)]

Ce protocole décrit le fractionnement nucléaire et cytoplasmique des cellules de culture de tissu et une méthode pour la détection occidentale de tache des protéines utilisant le système infrarouge de formation image d'odyssée. Ce protocole a été employé pour détecter l'expression de la « petite » protéine de prise en 293T, cellules hela et de COS. Le système d'odyssée a plusieurs avantages par rapport aux méthodes de détection chimioluminescentes plus employées couramment. - [Analyse occidentale lue de tache des échantillons fractionnés sous-cellulaires utilisant le système infrarouge de formation image d'odyssée]