Protocoles d'empêchement et de déplacement de contamination de culture de cellules

Cette unité décrit comment détecter et identifier la contamination bactérienne, fongique, ou de mycoplasma et comment vérifier la présence du mycoplasma. Des stratégies sont décrites pour traiter la contamination de culture, au besoin. - [Contamination microbienne de évaluation et de contrôle lue dans le protocole de cultures de cellules]

Le protocole décrit une méthode pour la détection de mycoplasma utilisant Hoechst 33258, un colorant fluorescent cette ADN de taches. La souillure de la matière particulaire d'ADN autour du noyau de cellules (sur la surface de cellules ou dans le cytoplasme) est indicative de la contamination de mycoplasma. - [Détection lue de mycoplasma dans des cultures de cellules mammifères utilisant le protocole de microscopie de fluorescence]

Un des plus importante, mais fréquemment donné sur, des procédures de culture de cellules est des cultures de test pour la contamination microbienne, particulièrement mycoplasma. Il est critique que chaque laboratoire de culture de cellules utilise seulement les variétés de cellule qui ont été soigneusement examinées pour le mycoplasma. Heureusement, il y a une ADN simple de fluorochrome souillant l'essai qui peut détecter le mycoplasma et pratiquement tous les autres contaminants de prokaryote. - [Détection lue de mycoplasma utilisant l'ADN souillant le protocole]

Pour des raisons biologiques et économiques, il est important d'éliminer des mycoplasmas des cultures de cellules étant utilisées pour la recherche fondamentale, le diagnostic, et la production biotechnologique. La méthode la plus utilisée généralement pour l'élimination, l'inactivation, ou la suppression des mycoplasmas dans des cultures de cellules est traitement avec des antibiotiques. Généralement les thérapies antibiotiques n'ont pas comme conséquence l'élimination durable et réussie. En outre, les propriétés cytotoxiques des antibiotiques peuvent entraîner des effets secondaires indésirables sur des cellules. - [Protocole lu de réactif d'élimination de mycoplasma]

La qualité est importante dans tous les aspects de culture de tissu puisque la qualité c.-à-d. des medias employés par matières et d'autres réactifs) affectera la qualité des cultures et des produits dérivés de eux. Les domaines principaux de contrôle de qualité qui sont concernés pour la culture de tissu sont : La qualité des réactifs et des matériaux ; La provenance et l'intégrité des variétés de cellule ; L'action d'éviter de la contamination microbienne. - [Considérations lues de contrôle de qualité pour la culture de cellules]

Cette méthode est avantageuse pour sauvegarder les cultures occasionnelles que devenu souillée. Les cultures souillées par levure sembleront nuageuses quand légèrement secoué et les lymphocytes ne grouperont pas ensemble autant que la normale. Si les cultures sont suspectes, une baisse de culture peut être striée d'un plat de medias de YPD pour vérifier la croissance des colonies de levure, ou un échantillon de 5 ml peut être prélevé au centre de diagnostic de Barnes pour l'identification de la contrainte de levure. - [Le déplacement lu de la contamination de levure de Lymphoblast cultive le protocole]

Aucun problème de culture de cellules n'est aussi universel que celui de la perte de culture due à la contamination. Tous les laboratoires de culture de cellules et ouvriers de culture de cellules l'ont éprouvé. Les contaminants de culture peuvent être biologiques ou produit chimique, vu ou invisible, destructif ou apparemment bénin, mais dans tous les cas ils compromettent l'utilisation de vos cultures de cellules et la qualité de votre recherche. Des problèmes de contamination peuvent être divisés en trois classes : Ennuis mineurs, problèmes graves, catastrophes importantes. - [Protocole de compréhension et de gestion lu de contamination de culture de cellules]