Protocoles artificiels bactériens de chromosome de BACs

Décrivez un ensemble de BACs qui tracent près des extrémités chromosomiques centromères et distales pour chaque chromosome de souris. - [Lu une technique triple de POISSONS de couleur pour l'identification de chromosome de souris]

Le protocole présente l'amplification des ordres de fin d'insertion des clones artificiels bactériens de chromosome utilisant TAIL-PCR. Les produits amplifiés conviennent en tant que sondes pour la marche et le génome de chromosome traçant et comme descripteurs pour l'ordonnancement direct. Le protocole a été utilisé dans des études de génome de riz. - [Amplification lue des ordres de fin d'insertion des clones de BACs par ACP entrelacé asymétrique thermique]

Le protocole emploie le kit de réaction de BIOPRIME de GibcoBRL pour préparer l'ADN de CCB biotine-étiquetée qui est détectée utilisant la FITC-Avidine (laboratoires de vecteur, catégorie de DCS). Des réactifs d'autres constructeurs ont pu fonctionner également bon mais avoir été testés. Inclut : Écriture de labels des clones de CCB ; Précipitation d'éthanol ; Hybridation ; traitement/détection de Poteau-hybridation. - [Protocole lu de BAC-FISH]

L'information pour BACs, chromosomes artificiels bactériens. Inclut : Vecteurs existants ; pBAC108L ; pBeloBAC11 ; pBACe3.6 ; pFW11 et facteur de F ; pCC1BAC ; vecteurs du pSMART VC ; pIndigoBAC-5 ; Cosmides ; pWEB-TNCTM ; SuperCos 1 ; pFos1 ; Vecteurs de PAC ; Purification de CCB ; Mise du CCB dans Escherichia coli. - [Chromosomes artificiels bactériens lus de BACs]

Méthode alkaline rapide de miniprep de lysis pour isoler l'ADN de grands clones de PAC. C'est une modification d'un standard Qiagen-Inclinent la méthode qui n'utilise aucune extraction ou colonne organique. Les travaux de méthode très bien pour faire les sommaires analytiques de restriction des clones de PAC et peuvent être mesurés vers le haut d'au besoin. - [Isolement lu d'ADN protocole dans de CCB et de PAC clones]

En ordonnançant des conditions testées pour l'ABI Grand-Teignez les programmes finisseurs (PE-ABI #4303150 pour le kit 1000 de réaction - description : TF, KIT BTD RR-1000) avec de divers descripteurs. Important pour doser tous les descripteurs par l'électrophorèse de gel d'agarose contre des normes de taille et de concentration et pour faire quelques essais avec différentes concentrations de descripteur pour déterminer les conditions optimales pour vos réactions. Plusieurs conditions sont données. - [Protocoles et notes lus de colorant pour cosmide, CCB, CCB, descripteurs de Fosmid]

Le protocole décrit l'isolement de l'ADN de CCB des cultures bactériennes utilisant le système commercial de NucleoBond. - [Lu isolant l'ADN de CCB des cultures bactériennes utilisant le protocole de système de NucleoBond]

Le procédé pour l'isolement de l'ADN de CCB est renforcé pour faciliter les cultures de 500 ml, qui, en moyenne, rapportent le µg 20-25 de l'ADN de CCB purifiée. - [Isolement lu de l'ADN de CCB du protocole de grande puissance de cultures]

CCB DNAs sont disposés à partir des cultures de 5 ml des cellules CCB-transformées par une modification de la méthode alkaline standard de lysis (préparation de l'ADN de plasmide par lysis alkalin avec le SDS : Minipreparation). Le rendement varie typiquement entre 0.1 et 0.4 µg d'ADN de CCB. - [Isolement lu de l'ADN de CCB du protocole de petite taille de cultures]

Protocole pour la préparation de l'ADN de CCB (chromosome artificiel bactérien) avec le système de purification de plasmide de grande pureté de CONCERT. Inclut : - [Préparation lue de l'ADN de CCB avec le protocole de système de purification de plasmide de grande pureté de CONCERT]

Le protocole décrit la purification de l'ADN de CCB qui a été préparée avec le système commercial de NucleoBond. - [Purification lue de l'ADN de CCB préparée avec le protocole de système de NucleoBond]

Le protocole décrit comment transformer Escherichia coli avec de l'ADN de CCB par électroporation. - [Fonctionnement lu avec le protocole artificiel bactérien de chromosomes]