Protocoles de la Génétique d'Arabidopsis

La méthode est pour préparer des chromosomes des bourgeons simples de fleur du thaliana de A.. Elle ne détruit pas les usines permettant la détermination de leur nombre de chromosome dans tout le développement. Inclut : Préparations d'Arabidopsis ; Préparation de chromosome ; Souillure des Chromosomes. - [diffusions lues de chromosome des bourgeons de fleur de protocole de thaliana d'Arabidopsis]

Le SME est utilisé aux concentrations qui induisent des mutations multiples de point à chaque usine, telles que des allèles de mutant d'un lieu spécifique sont trouvés à une cadence de ~1 aux usines de 2000-5000 m2. Cette cadence élevée de la mutagénèse rend le criblage possible de relativement peu d'usines pour trouver ceux avec le phénotype d'intérêt, un avantage particulier si l'écran est laborieux ou si seulement un nombre restreint de gènes subissent une mutation au phénotype exigé. - [mutagénèse lue de SME de protocole de graine d'Arabidopsis]

La génétique vers l'avant est employée pour identifier les gènes qui sont en particulier des processus biologiques impliqués. Par exemple, des gènes exigés pour la résistance de la maladie peuvent être trouvés en identifiant des mutants avec la résistance réduite ou accrue de la maladie, les gènes que le développement de fleur de commande peut être identifié en recherchant des mutants avec la morphologie modifiée de fleur, et des gènes encodant des enzymes pour la biosynthèse de tryptophane peuvent être identifiés en recherchant les mutants qui exigent le tryptophane exogène pour la croissance. - [la génétique vers l'avant lue dans Arabidopsis : Trouvant les mutations qui causent le protocole particulier de phénotypes]

Protocoles pour l'expression de gène et la localisation de protéine dans Arabidopsis. Inclut : Détection de la protéine indigène ; Détection d'une version de recombinaison ; Détection d'immunofluorescence dans des protoplastes d'Arabidopsis ; Isolement des protoplastes de jeune plante d'Arabidopsis ; Localisation sous-cellulaire des protéines de GUS-fusion dans des jeunes plantes d'Arabidopsis ; Localisation des protéines d'Arabidopsis avec de GUS le titrage de l'enzyme in situ. - [expression de gène et localisation lues de protéine dans des protocoles d'Arabidopsis]

Protocole pour tracer génétique des centromères d'Arabidopsis en utilisant des repères de PCR-based. Inclut : Les repères d'ADN facilitent l'analyse de génome ; Centromère traçant en utilisant l'analyse en tétrade ; Préparation de l'ADN du tissu végétal figé. - [tracer génétique lu des centromères d'Arabidopsis en utilisant le protocole de repères de PCR-Based]

Le protocole décrit l'utilisation de l'ammonium de glufosinate de choisir les usines transformées d'Arabidopsis. L'avantage principal de la sélection d'ammonium de glufosinate est qu'il peut être exécuté sur des usines accroissant dans le sol et n'exige pas l'utilisation des techniques stériles. - [sélection lue d'ammonium de Glufosinate de protocole transformé d'Arabidopsis]

Protocole sur la façon dont souiller les chromosomes meiotic d'Arabidopsis des meiocytes de pollen. - [lu comment souiller des chromosomes d'Arabidopsis Meiotic de protocole de Meiocytes de pollen]

Proclamez un protocole pour l'isolement des noyaux d'Arabidopsis et la mesure de l'utilisation de cadences de transcription de gène nucléaire exécuter-sur des analyses. Des matières végétales sont rectifiées dans les mémoires tampons glycol-basées par hexylene et des fractions nucléaires fortement enrichies sont obtenues en utilisant des gradients de densité de Percoll. Des protocoles standard et de petite taille sont présentés, avec une méthode testée pour nucléaire exécuter-sur des analyses. Le processus entier peut être complété dans les 3 jours. - [isolement lu des noyaux d'Arabidopsis et mesure de protocole de cadences de transcription de gène]

Protocole pour l'ingénierie de précision des lieux de gène d'usine par le clonage homologue de recombinaison dans Escherichia coli. Inclut : Étapes principales dans la délivrance de lieu d'EL250 RED-HR et le procédé d'ingénierie ; Constructions mieux habillées de conception et de plasmide ; Construction d'intervalle-réparation d'AtSTM ; Optimisation du circuit principal de construction ; Préparation des cellules EL250 electrocompetent ; Transformation de BAC F24o1 et induction de fonction recombinogenic dans EL250 ; Délivrance de lieu d'AtSTM de BAC F24o1 par intervalle-gap-repair HR. - [ingénierie de précision lue des lieux de gène d'usine par le clonage d'Homologous Recombination dans Escherichia coli]

Une voie puissante d'identifier une mutation dans le gène d'intérêt et de tester des usines de mutant pour les phénotypes qui sont prévus pour résulter de la perte de fonction de ce gène est par le criblage de PCR. Des regroupements des lignes de mise en place sont examinés à l'aide d'une amorce correspondant au gène d'intérêt et d'une amorce correspondant à l'extrémité de l'élément de mise en place. La synthèse d'un produit indique la présence d'une mise en place dans le gène d'intérêt. - [lu examinant des regroupements d'ADN pour des mises en place de T-DNA dans le protocole de gènes d'Arabidopsis]

Arabidopsis naturellement art de l'auto-portrait-pollinates, la génération de la croix-progéniture exige une certaine intervention par l'investigateur. Ce protocole décrit la génération et la collection de graines en croisant les usines appropriées de parent d'Arabidopsis. - [Lu l'Installation d'Arabidopsis Croise Le Protocole]

Proclamez un protocole pour l'hybridation in situ de fluorescence entière de support (POISSON) des ordres réitérés d'ADN sur les noyaux interphase du petit thaliana crucifère d'Arabidopsis d'usine. Inclut : Stérilisation et germination de graine ; Fixation de tissu ; Étiqueter de l'ADN de sonde ; Prétraitement ; Hybridation in situ ; Pré-absorption des anticorps ; Lavages de Posthybridization ; Détection d'Immunocytochemical ; Détection directe ; Détection indirecte ; Souillure et montage ; Microscopie de fluorescence. - [hybridation in situ lue de fluorescence entière de support (POISSON) des ordres réitérés d'ADN sur l'interphase]