Protocoles de Bibliothèque de Cosmid

L'amplification des bibliothèques de cosmid peut avoir comme conséquence la représentation tordue des ordres genomic copiés et devrait être évité dans la mesure du possible. Si l'amplification devient nécessaire, il est le meilleur pour augmenter la bibliothèque par croissance de support liquide. - [amplification et mémoire lus d'une bibliothèque de Cosmid : Amplification dans le protocole liquide de culture]

L'amplification des bibliothèques de cosmid peut avoir comme conséquence la représentation tordue des ordres genomic copiés et devrait être évité dans la mesure du possible. Dans cette méthode d'amplification, la déformation de la bibliothèque est rarement un problème parce qu'à aucune étape sont les bactéries contenant différents cosmids de recombinaison développés en concurrence entre eux. - [amplification et mémoire lus d'une bibliothèque de Cosmid : Amplification sur le protocole de filtres]

Le protocole décrit comment construire une bibliothèque avec des fragments 35-45-kb d'ADN genomic dans le double vecteur de cosmid de site de cos, SuperCos-1. Les étapes incluent : Linéarisation et dephosphorylation d'ADN SuperCos-1 ; Digestion partielle de l'ADN à poids moléculaire élevé avec MboI ; Dephosphorylation de l'ADN genomic à poids moléculaire élevé ; Ligature des bras de cosmid à l'ADN genomic : Empaquetant et plaquant des recombinants ; Isolement et analyse des cosmids de recombinaison : Validation de la bibliothèque. - [la construction lue des bibliothèques d'ADN de Genomic dans Cosmid dirige le protocole]

Des bibliothèques de cosmid d'Unamplified sont plaquées à une forte densité sur des filtres de la nitrocellulose 150millimètre ou du nylon et protégées par l'hybridation - [lu protégeant une bibliothèque d'Unamplified Cosmid par Hybridization : Plaquant la bibliothèque sur le protocole de filtres]