Protocoles in vitro de reconstitution

Ce protocole décrit une analyse in vitro de transcription qui tient compte d'un rond simple de transcription de chromatine assemblée in vitro. Comparer l'activité d'un récepteur ou d'un coactivator transcriptional dans une analyse qui mesure seulement un rond simple de transcription avec les résultats des ronds multiples de la transcription peut aider à élucider le mécanisme du lancement transcriptional par ces facteurs. - [Analyse lue : Rond simple de transcription in vitro des descripteurs assemblés de chromatine utilisant une cellule hela ex]

La capacité de synthétiser l'ARN dans le laboratoire est critique à beaucoup de techniques. Des sondes radioactives et nonisotopically étiquetées d'ARN, produites dans des réactions de transcription à échelle réduite peuvent être utilisées dans des hybridations de tache et des analyses de protection de nucléase. Cet article inclut l'information en fonction : Conditions pour la transcription, polymérases bactériophages d'ARN, options de descripteur : Plasmides, produits d'ACP, Oligonuclotides et cDNA, sens ou synthèse antisens, conventionnelle ou de large échelle, produits pour la transcription in vitro. - [L'information de base lue sur la transcription in vitro]

Fournit des informations sur des paramètres spécifiques que vous devez se rendre compte de en utilisant les systèmes de traduction in vitro eucaryotiques. Inclut : Considérations de descripteur d'ADN ; Écriture de labels de protéine ; Écriture de labels non radioactive de protéine. - [Systèmes de traduction in vitro eucaryotiques lus]

Ce protocole décrit l'utilisation des cellules de SEMV (une variété de cellule dérivée des vésicules séminales de mémoire vive) dans les études dans le métabolisme synthase-négocié par H de prostaglandine du xenobiotics en cellules intactes. - [Modèle in vitro lu pour études de Synthase de Prostagland H (PHS) - génotoxicité négociée de Xenobiotics]

Protocole pour des réactions de épissure in vitro en drosophile kc ou extraits nucléaires hela. Le protocole inclut : Procédé, solutions, BioReagents et produits chimiques et conseils de protocole. - [In vitro réactions de épissure lues en drosophile kc ou extraits nucléaires hela]

Protocole pour la transcription in vitro et traduction utilisant le système couplé de lysate de reticulocyte. Ce protocole est conçu pour tester les échantillons aléatoires sur un gel de protéine. Mesurez vers le haut les réactions en conséquence. Le protocole inclut : Procédé, solutions, BioReagents et produits chimiques et conseils de protocole. - [Transcription et traduction in vitro lues utilisant le système couplé de Reticulocyte Lysate]

Avec ce protocole, des transcriptions qui ont été lancées des gènes spécifiques par des ARN polymérases avant le permeabilization peuvent être mesurées. Au lieu d'un extrait nucléaire, des cellules permeabilized sont utilisées. Inclut l'information en fonction : Permeabilization des cellules ; Réaction in vitro de transcription (écoulement) ; Isolement de l'ARN ; Préparation de membrane de tache de fente pour l'hybridation ; Hybridation de membrane de nitrocellulose ; Précipitation d'ACIDE TRICHLORACÉTIQUE pour déterminer l'incorporation [32P] de GTP dans l'acide nucléique [analyse in vitro lue de transcription (analyse d'écoulement) utilisant des cellules de Permeabilized]

Protocole pour la transcription in vitro. Inclut l'information en fonction : Réactions, notes et dépannage chauds de transcription. - [Protocole in vitro lu de transcription]

Protocole pour la transcription in vitro avec le protocole de la polymérase SP6. - [Transcription in vitro lue avec le protocole de polymérase SP6]

Protocole pour la transcription in vitro avec l'extrait nucléaire de levure. Inclut des recettes pour : mémoire tampon de transcription de l'acétate 5x ; Kinase de phospho de créatine ; Créatine de Phospho ; Arrêtez le mélange ; Ha de + acétate de potassium 0.1 M ; mémoire tampon de transcription du glutamate 5x (5 ml). Inclut également le protocole pour l'analyse d'extension d'amorce. - [Transcription in vitro lue avec l'extrait nucléaire de levure]

Le protocole trace les grandes lignes du procédé général et des conditions pour la traduction in vitro de CFTR et trace les grandes lignes de quelques analyses utilisant le produit traduit in vitro. Le glycosylation de noyau de CFTR se produit dans l'ER. Une analyse pour cette étape de transformation exige l'ajout des membranes microsomiques au mélange in vitro de base de traduction. Ce protocole prend en considération ceci. - [Analyses in vitro lues de traduction pour CFTR]

Le protocole décrit un système qui inclut tous les composants nécessaires pour la transcription in vitro aussi bien qu'un descripteur positif de commande qui fournit des transcriptions d'écoulement d'un premier instigateur CMV immédiat. Ce système est conçu pour la transcription d'écoulement. Alternativement, des produits de transcription peuvent être analysés par extension d'amorce. - [Système in vitro lu de transcription d'extrait nucléaire]

Protocole pour la préparation de l'extrait nucléaire de kc pour in vitro l'épissure. Le protocole fait 3.4 ml de l'extrait pour tout les 4 litres de cellules (selon la concentration initiale en cellules). Le protocole inclut : Procédé, solutions, BioReagents et produits chimiques et conseils de protocole. - [Préparation lue d'extrait nucléaire de kc pour in vitro l'épissure]

Protocole pour la préparation du lysate messager-dépendant de reticulocyte de lapin. Informamtion également ajouté pour tester que le lysate fonctionne avant de faire l'inactivation de nucléase - [préparation lue de lapin Messager-Dépendant Reticulocyte Lysate]

Protocole pour la préparation du système sans cellule de lysate de reticulocyte de lapin. Le protocole inclut l'information en fonction : Solutions ; BioReagents et produits chimiques et conseils de Protcol. - [Préparation lue de protocole sans cellule de système de Reticulocyte Lysate de lapin]

Le protocole inclut l'information en fonction : Préparation des membranes ; Réaction en une étape ; Réaction à deux étages utilisant la quantité normale de membranes ; Réaction à deux étages utilisant la basse concentration des membranes. - [Protcol lu pour le bonnet endoplasmique in vitro à la réaction de transport de Golgi en levure]

Ce protocole produit des transcriptions d'ARN à partir d'un gène copié qui peut alors être utilisé dans une analyse in vitro de traduction. - [Protocole lu pour la transcription in vitro de l'ARN]

Le protocole décrit un ARN polymérase III (analyse de transcription de Pol III) utilisant un extrait ou des protéines de choix. Pol III est la polymérase responsable de transcrire l'ARN 5S, les tRNAs, et tout autre petit RNAs. α-Amanitin empêche la transcription de Pol II dans l'analyse. L'ARN nouveau-transcrit et radioactif est visualisé par l'autoradiographie après l'électrophorèse de gel de polyacrylamide d'urée. - [Protocole lu pour la transcription in vitro de polymérase III]

Amplification d'ARN par protocole in vitro de transcription. Inclut des protocoles relatif à l'écriture de labels et à l'hybridation de cDNA sur des microarrays de cDNA. - [Protocole lu pour l'amplification d'ARN par la transcription in vitro]

Le protocole inclut le procédé pour des analyses in vitro de transfert de Transwell. - [Protocole lu pour l'analyse de transfert Transport-Bien]

Aux noyaux de ce protocole d'isolement dans des cellules exprimant le gène d'intérêt sont incubés avec UTP radioactif qui est incorporé aux transcriptions naissantes d'ARN par les molécules d'ARN polymérase qui transcrivaient activement alors les cellules ont été moissonnées. Puisque le déclenchement très petit de denovo de la synthèse d'ARN se produit aux noyaux d'isolement, la transcription du gène de cible peut être mesurée en hybridant l'ARN radioactif à un excès du gène de cible immobilisé sur une nitrocellulose ou un nylon - [protocole lu pour le passage Transcriptional sur des analyses]

Ce protocole décrit une réaction in vitro pour analyser l'axe mitotic. L'extrait cytostatique de facteur d'utilisations d'analyse fait à partir des oeufs de Xenopus, fluorescent-étiqueté tubulin, et noyaux préparés de sperme. L'axe est surveillé par microscopie d'immunofluorescence. - [Assemblée indiquée d'axe de protocole in vitro]

Les réactions in vitro de transcription utilisant le T3, le T7 ou les ARN polymérases bactériophage-encodés par SP6 sont employées couramment pour synthétiser l'ARN des vecteurs de recombinaison contenant les instigateurs appropriés. La production des grands nombres d'ARN spécifique est valeur dans la préparation des sondes d'hybridation et des études in vitro de traduction ; dans la synthèse des ribozymes, du rRNA, du SRP, de l'ARN antisens et des substrats pour l'épissure d'ARN ; et dans des études d'interaction d'ARN-protéine. - [Protocole lu : Purification d'ADN messagère synthétisée in vitro avec les filtres centrifuges de Microcon ou de Centricon]

Les systèmes in vitro de transcription inclut des instructions pour l'usage des produits P1420, P1430, P1440, P1450 et information et protocoles de P1460.Includes sur la transcription d'ARN in vitro. L'information sur la préparation de descripteur d'ADN ; Synthèse des sondes d'ARN étiquetées par radio de Haut-Spécifique-Activité ; Détermination de l'incorporation de pour cent et de l'activité spécifique de sonde ; Déplacement du descripteur d'ADN après transcription ; Déplacement des nucléotides non enregistrés ; Synthèse des grands nombres d'ARN ; ARN de capsulage pour la traduction in vitro. - [Systèmes in vitro lus de transcription de Riboprobe]

Exécuter-sur la transcription surveille le règlement de la transcription aux noyaux d'isolement. Le protocole inclut : Préparation des noyaux, Exécuter-Sur la réaction de transcription, l'hydrolyse alcaline des transcriptions d'écoulement, la préparation des filtres et l'hybridation. Solutions incluses : Solution de DNase, mélange d'hybridation, solution de Denhardt (100X) etc. - [passage lu sur le protocole de transcription]