Analyse de protéine de Lowry

Détermination de protéine par l'analyse de Lowry

La méthode de vérification de protéine de Lowry pour la détermination de concentration en protéine est l'une des analyses de protéine les plus vénérables et les plus employées couramment. La méthode de Lowry a été la première fois décrite en 1951 par Lowry et autres (Lowry et autres, 1951).

L'hydrolyse est probablement la méthode la plus précise de déterminer la concentration en protéine suivie d'analyse d'acide aminé. La plupart des autres méthodes sont sensibles au
la composition en acides aminés de la protéine, et les concentrations absolues ne peuvent pas être obtenues. Le procédé de Lowry est sensible, et est modérément constant de la protéine à la protéine. L'évaluation de protéine de Lowry a été si employée couramment que ce soit une alternative complètement acceptable à une détermination absolue rigoureuse dans presque toutes les circonstances dans lesquelles les mélanges de protéine ou les extraits bruts sont impliqués.

La méthode est basée sur tous les deux la réaction de biuret, dans laquelle les liens de peptide des protéines réagissent avec le cuivre dans des conditions alkalines pour produire Cu+, avec lequel réagit
le réactif de foline, et la réaction de Foline-Ciocalteau, qui est mal comprise mais essentiellement phosphomolybdotungstate est réduit au bleu de heteropolymolybdenum par l'oxydation cuivre-catalysée des acides aminés aromatiques. Les réactions ont comme conséquence une couleur bleue forte, qui dépend en partie du contenu de tyrosine et de tryptophane. La méthode est réduit sensible à environ 0.01 mg de protein/mL, et mieux est utilisée sur des solutions avec des concentrations dans l'intervalle 0.01-1.0 mg/ml de protéine.

Produits chimiques et substances qui gênent l'analyse de Lowry

La méthode de Lowry pour la détermination de concentration en protéine est employée couramment, toutefois peut être sujet à l'interférence par beaucoup de substances et de produits chimiques.

Produits chimiques qui sont connus à l'interefere avec l'analyse de Lowry :

• Barbital
• CHAPEAUX
• Chlorure de césium
• Citrate
• Cystéine
• Diéthalolamine
• Dithiothreitol
• EDTA
• EGTA
• HEPES
• mercaptoéthanol
• Nonidet P-40
• Phénol
• Pyrrolidone polyvinylique
• Désoxycholate de sodium
• Salicylate de sodium
• Thimerosol
• Tricine
• TRIS
• Triton X-100

Références de méthode de Lowry

193:265 de Lowry et autres J. Biol. chim. - 275 (1951)

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