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L'aspect le plus triste de la vie est en ce moment que la science recueille la connaissance plus rapidement que la sagesse de rassemblements de société. ~Isaac Asimov, livre d'Isaac Asimov de la Science et de nature Quotations, 1988
La méthode de vérification de protéine de Lowry
pour la détermination de concentration en protéine est l'une des
analyses de protéine les plus vénérables et les plus employées
couramment. La méthode de Lowry a été décrite la première
fois en 1951 par Lowry et autres. (Lowry et autres, 1951).
L'hydrolyse est probablement la méthode la plus précise
de déterminer la concentration en protéine suivie
d'analyse d'acide aminé. La plupart des autres méthodes sont
sensibles au
la composition en acides aminés de la protéine, et les
concentrations absolues ne peuvent pas être obtenues. Le
procédé de Lowry est sensible, et est modérément constant de la
protéine à la protéine. On a tellement largement répandu
l'évaluation de protéine de Lowry que c'est une
alternative complètement acceptable à une détermination absolue
rigoureuse dans presque toutes les circonstances dans lesquelles les
mélanges de protéine ou les extraits bruts sont impliqués.
La méthode est basée sur tous les deux la réaction de
biuret, dans laquelle les obligations de peptide des protéines
réagissent avec le cuivre dans des conditions alkalines au produit
Cu+, avec lequel réagit
le réactif de foline, et la réaction–de
Ciocalteau de foline, qui est mal comprise mais essentiellement
phosphomolybdotungstate est réduit au bleu de heteropolymolybdenum
par l'oxydation cuivre-catalysée des acides aminés aromatiques.
Les réactions ont comme conséquence une couleur bleue forte,
qui dépend en partie du contenu de tyrosine et de tryptophane.
La méthode est bas sensible à environ 0.01 magnésium de
protein/mL, et mieux est utilisée sur des solutions avec des
concentrations dans l'intervalle 0.01–1.0 mg/mL de
protéine.
La méthode de Lowry pour la détermination de concentration en protéine est largement répandue, toutefois peut être sujet à l'interférence par beaucoup de substances et produits chimiques.
Produits chimiques qui sont connus à l'interefere avec l'analyse de Lowry :
Lowry et autres. J. Biol.
Chem. 193 : 265-275 (1951)
Protocole de Méthode de Lowry
Protocole de Concentration En Protéine
Méthode de Bradford
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