Phosphorimaging

Phosphorimaging

Cette technique a plusieurs avantages par rapport à l'autoradiographie standard, mais le plus important est qu'il est beaucoup plus précis en mesurant la quantité de radioactivité dans une substance.  C'est parce que sa réponse à la radioactivité est bien plus linéaire que celle d'un film radiographique.  Avec l'autoradiographie standard, une bande avec 50.000 désintégration radioactives par minute (dpm) peut ne regarder pas plus foncée qu'une avec le dpm 10.000 parce que l'émulsion dans le film est déjà saturée au dpm 10.000.  Mais le phosphorimager rassemble les émissions radioactives et les analyse électroniquement, ainsi la différence entre le dpm 10.000 le dpm et 50.000 serait évidente.  Voici comment la technique fonctionne :  Nous commençons par un échantillon radioactif une tache avec les bandes d'ADN qui ont hybridé avec une sonde étiquetée, par exemple.  Nous plaçons cet échantillon en contact avec un plat de phosphorimager, qui absorbe des braillements.  Ces rayons excitent des molécules du plat, et ces molécules restent dans un état excited jusqu'à ce que le phosphoimager balaye le plat avec un laser.  À ce point, l'énergie de braillement emprisonné par le plat est libérée et surveillée par un détecteur automatisé.  L'ordinateur convertit l'énergie qu'il détecte à une image.  C'est une image fausse de couleur, où les différentes couleurs représentent différent de la radioactivité, du plus bas (jaune) au plus haut (noir).