Séparation des deux brins d'une double spirale d'ADN

Tandis que les taux de G à C et A à T en ADN d'une organization sont fixes, le contenu de CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE (pourcentage de G +C) peut changer considérablement d'une ADN à l'autre. Quand une solution d'ADN est chauffée assez, les forces non-covalentes qui tiennent les deux brins s'affaiblissent ensemble et se cassent finalement. Quand ceci se produit, les deux brins se séparent dans un processus connu sous le nom de dénaturation d'ADN, ou la fonte d'ADN. La température à laquelle l'ADN échoue sont moitié dénaturée s'appelle la température de fonte, ou Tm. La quantité de séparation de brin, ou de fonte, est mesurée par l'absorbance de la solution d'ADN à 260nm. Les acides nucléiques absorbent la lumière à cette longueur d'onde en raison de la structure électronique dans leurs bases, mais quand deux brins d'ADN viennent ensemble, la proximité étroite des bases dans les deux brins éteint une partie de cette absorbance. Quand les deux brins séparent, ceci qui éteint disparaît et les élévations 30%-40%.This d'absorbance s'appelle le décalage hyperchromic.
La teneur en CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE de l'ADN a un effet significatif sur le son Tm.The plus haut le contenu de la CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE d'une ADN, plus son Tm.Why devrait ceci être haut ? Une des forces tenant les deux brins de l'ADN est ensemble liaison d'hydrogène. En outre les liens d'hydrogène de la forme trois de paires de CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE, tandis qu'aux paires ont seulement deux. Il se tient pour raisonner, puis que deux brins des riches d'ADN en G et C se tiendront entre eux plus étroitement que ceux de l'ADN À-riche.
Le chauffage n'est pas la seule voie de dénaturer des dissolvants de DNA.Organic tels que le sulfoxyde et le formamide diméthyliques, ou d'un pH élevé, de perturber la liaison d'hydrogène entre les brins d'ADN et de favoriser la dénaturation. L'abaissement de la concentration en sel de la solution d'ADN facilite également la dénaturation en retirant les ions qui protègent les charges négatives sur les deux brins les uns des autres. À la basse concentration ionique, les forces mutuellement répulsives des charges négatives sont assez fortes pour dénaturer l'ar d'ADN une température relativement basse.

La teneur en CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE de l'ADN affecte également sa densité.