synthèse de cDNA

Renseignez-vous sur la synthèse de cDNA.

synthèse de cDNA

des cDNAs sont synthétisés utilisant le descripteur mûr d'ADN messagère dans une réaction catalytique utilisant le transcriptase d'inverse d'enzymes (RTase).

diagramme de synthèse de cDNA

image de synthèse de cDNA

synthèse de cDNA

Le transcriptase renversé fonctionne utilisant un brin simple d'ADN messagère et produit de l'ADN complémentaire basée sur l'appareillement des paires de base d'ARN (A, U, G et C) et les traduit à leurs compléments d'ADN (T, A, C et G respectivement).

Pour obtenir le cDNA eucaryotique dont les introns ont été épissés :

Les cellules eucaryotiques transcrivent l'ADN (des gènes) en ARN (pré-ADN messagère) - ceci est le processus de la transcription.
Le brin pré-ADN messagère est alors traité en épissant dehors des introns
Une queue polyA et un ' chapeau de la Méthylique-Guanine 5 sont également ajoutés à l'ADN messagère.
Amixture des brins mûrs d'ADN messagère sont extraits à partir de la cellule.
Une poly-T amorce d'oligonucléotide est hybridée sur la queue polyA du descripteur mûr d'ADN messagère, ou des amorces aléatoires de hexamer peuvent être ajoutées qui contiennent chaque 6 possibles brin simple de base de l'ADN et peuvent donc hybrider n'importe où sur l'ARN (le transcriptase renversé exige ceci double-
segment échoué comme amorce pour commencer son exécution.)
Le transcriptase renversé est ajouté, avec les triphosphates de deoxynucleotide (A, T, G, C).
le brin d'ARN est assimilé loin utilisant RNAseH
L'ACP est employé pour rendre le cDNA échoué simple bicaténaire