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Inhibición de PCR

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Old 05-17-2012, 07:59 AM
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Exclamation Inhibición de PCR



Hola! soy nueva en estos rumbos, trabajo con secuenciación de genes 16S y 12S de crustaceos, muestras fijadas en alcohol, utilizo kit comercial de extracción de ADN y obtengo variabilidad en las concentraciones de ADN, trabajando con el gen 12S no tuve ningún problema en amplificar mis muestras, sin embargo las mismas muestras trabajadas con el 16S me están dando dolor de cabeza! Me amplifican en reacciones a 12.5 microlitros, para mandarlas a secuenciar las escalo a 40 microlitros, al hacer este paso de aumentar el volumen la PCR se me inhibe! Será que el problema sea que estaban fijadas en alcohol?, alguna recomendación que alguien pudiera darme...

Gracias!
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inhibición , pcr


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