calculos

[airam67]

Hola soy nueva en este foro alguien pude proporcionarme alguna tabla de conversiones, para calculos moleculares. Es que tengo que correr una pcr y es la primera vez que lo hago y estoy batallando con los calculos para prepara los primes y la taq.

Se los agradecere mucho.

Atte

lupita (soy mexicana)

[danfive]

ejemplo para preparar solucion concentrada the primers:
A) GAPDH Fwd; 78.50nmoles (primer liofilizado)
V=78.50nmoles/0.5nmol/ul =157ul H2O
*hace 157ul de primer a concetracion de 0.5nmol/ul (que es 500uM)

B)GAPDH Rev; 77.90nmoles (primer liofilizado)
V=77.90nmoles/0.5nmoles/ul =155.8ul H2O
*hace 155.8ul de primer a concetracion de 0.5nmol/ul (que es 500uM)

Ejemplo para hacer solucion diluida the primers:
*Haz una dilucion de 1:10 de primers concentrados
**la concentracion va de 500uM(primer concentrado) a 50uM (primer diluido)

Ejemplo para hacer PCR mix:

3. PCR Mix
Reagent-------- [Initial]-- [Final] Volume
10X PCR buffer- 10X----- 1X--- 2.5µl
10X dNTPs----- 2mM---- 0.2mM--- 2.5µl
Primer fwd----- 50µM--- 0.5µM--- 1µl
Primer rev----- 50µM--- 0.5µM--- 1µl
Taq---------- 5U/µl--- 1.25U--- 0.25µl
H2O--------- -------- -------- 15.25µl
DNA--------- -------- -------- 2.5µl
-------------------------------------25µl
PCR Thermocycle Program
a. 95° 5min
b. 94° 45sec
c. 55° 45sec
d. 72° 45sec
e. back to b 35 times
f. 72° 5min
g. 4° hold

[iknew]

sabes convertir cc en ppb?