InmunocitoquÃ*micas

[montse]

Hola a todos¡
Necesito vuestra ayuda.
Tengo un problema al realizar inmunocitoquÃ*micas, me sale mucho background por culpa del anticuerpo secundario. Ya he probado mil cosas, diluir mucho (muchÃ*simo los anticuerpos, primario y secundario) bloquear de mil formas diferentes las preparaciones, añadir solución bloqueante a las diluciones de los anticuerpos, ......alguien me puede sugerir algo nuevo.
Muchas gracias a todos de antemano

[oscardavidcom]

Pues mira la verdad no tengo experiencia.. a penas voy a empezar con ese tipo de experimentos.. pero lo que vi que mi jefe sugirio un dia despues de mucho intentar con algo parecido a tu problema fue intentar con anticuerpos secundarios de otro laboratorio donde se supiera que esos si estaban funcionando bien.... intenta si te parece viable.

Aprovecho para decirte que como a penas iniciare con estas cosas de inmunohistoquimica, si puedes enviarme algun protocolo, lo agradeceria porque solo he ehecho cosas con floating sections y ahora debo empezar con confocal y anticuerpos fluorescentes... tonces no se si igual se le hecha DAB al final y Cresyl violet.. o como se hace... por si las moscas.. mis muestras son de cerebro... y que pena si mi pregunta es torme .. pero no tengo experiencia en laboratorio... a penas aprendiendo.