Welcome to Molecular Station! Tervetuloa Molecular Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Sinun täytyy rekisteröityä ennen kuin voit lähettää meidän foorumeilla tai käyttää lisätoimintoja. Register Now! Register Now! Its Free and Fast! Sen vapaata ja nopeaa!

Already registered? Oletko jo rekisteröitynyt? Login now below. Login nyt alla.

User Name: User Name:

Password: Salasana:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Jo rekisteröity ja Unohditko salasanasi? Click below to recover it. Klikkaa alhaalta sitä takaisin.

Recover Lost Password Recover Lost Password

Join now - it's fast and free! Liity nyt - se on nopeaa ja ilmaista!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station on suurin verkosto, tutkijat, tiedemiehet ja tieteen ystäville!

Recent Forum Posts Uusi Forum Posts

siRNA and RNAi Protocols siRNA ja RNAi pöytäkirjat	siRNA and RNAi Bioinformatics siRNA ja RNAi Bioinformatiikka	siRNA and RNAi FAQ siRNA ja RNAi FAQ	siRNA and RNAi Kits and Products siRNA ja RNAi Kits ja Tuotteet	siRNA and RNAi Forum siRNA ja RNAi Forum	siRNA and RNAi News siRNA ja RNAi Uutiset

siRNA Protocols and RNAi Protocols siRNA pöytäkirjoja ja RNAi pöytäkirjat

siRNA Transfection Protocol siRNA Transfection pöytäkirjan

siRNA transfection protocol : Transfect 6 well plates siRNA transfection pöytäkirja: Transfect 6 kuoppalevyihin

1. apply first siRNA treatment when cells are 60% confluent (measure confluency with voltmeter); plate 1.5x10^6 cells on Friday, transfect on Wednesday. ensisijaisesti siRNA kohtelua, kun solut ovat 60% confluent (toimenpide confluency kanssa voltmeter); kilpi 1.5x10 ^ 6 solujen perjantaina, transfect keskiviikkona. For each well: Kunkin hyvin:

1. Dilute 2.5 ug siRNA (20uM is approximately 0.26ug/ul. 9.62 ul per well of a 6-well plate) with culture media to a final volume of 100 ul. U se barrier pipette tips. You can make a master mix if all the wells will be transfected with the same siRNA. Laimennetaan 2,5 UG siRNA (20uM on noin 0.26ug/ul. 9,62 ul per kuoppa 6-kuoppalevyssä) kulttuuria tiedotusvälineissä siten, että lopullinen tilavuus on 100 ul. U se este pipetin kärkiä. Voit tehdä master-mix, jos kaikki kaivot tulee transfected kanssa samaa siRNA. Do this in a sterile autoclaved plastic tube. Onko tämä steriiliin autoklavoitu muovi putkeen.
2. Add 12 ul RNAiFect (Qiagen - or any other RNA transfection reagent, see manufacturer's protocol) per siRNA mastermix tube and mix gently. Lisää 12 ul RNAiFect (Qiagen - tai muita RNA transfection reagenssi, katso valmistajan protocol) per siRNA mastermix putki ja sekoitetaan varovasti.
3. Incubate for 15 minutes at room temperature to allow complex formation between siRNA and lipids. Inkuboidaan 15 minuutin ajan huoneenlämmössä, jotta monimutkainen muodostumisen välillä siRNA ja lipideihin.
4. Aspirate media from cells and add 900ul fresh media to each well. Imetään medioissa, solujen ja lisätä 900ul Fresh Media kunkin hyvin.
5. Add siRNA mixture (112 ul per well) drop-wise while gently swirling plate. Lisää siRNA seosta (112 ul per hyvin) tipottain samalla varovasti pyörittäen varovasti lautaselle.
• Apply second siRNA treatment 2 days later, following the steps outlined above. Käytä toinen siRNA kohtelun 2 päivää myöhemmin, seuraavien ohjeiden edellä. The second transfection will add to decrease expression of the gene of interest. Toinen transfection lisää laskua ilmaus geenin kanssa.

Other siRNA protocols Muut siRNA pöytäkirjat

Also see our siRNA and RNAi page Katso myös siRNA ja RNAi-sivulle


Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | © 2005-2007 molekyylibiologian Station.com, Kaikki oikeudet pidätetään.

Send this page to a friend Send this page to a friend