Welcome to Molecular Station! Tervetuloa Molecular Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Sinun täytyy rekisteröityä ennen kuin voit lähettää meidän foorumeilla tai käyttää lisätoimintoja. Register Now! Register Now! Its Free and Fast! Sen vapaata ja nopeaa!

Already registered? Oletko jo rekisteröitynyt? Login now below. Login nyt alla.

User Name: User Name:

Password: Salasana:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Jo rekisteröity ja Unohditko salasanasi? Click below to recover it. Klikkaa alhaalta sitä takaisin.

Recover Lost Password Recover Lost Password

Join now - it's fast and free! Liity nyt - se on nopeaa ja ilmaista!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station on suurin verkosto, tutkijat, tiedemiehet ja tieteen ystäville!

Recent Forum Posts Uusi Forum Posts

PCR Protocols PCR pöytäkirjat	PCR Bioinformatics and Databases PCR Bioinformatiikka ja tietokannat	Learn about PCR Opi PCR	PCR Kits and Products PCR Kits ja Tuotteet	PCR Forum PCR-Forum	PCR Books PCR-Kirjat

PCR Samples and Template DNA PCR-näytteet ja templaatti-DNA: n

Template DNA and Samples for PCR Templaatti-DNA: n ja Näytteet PCR

Guidelines for template DNA and samples for PCR: Ohjeet templaatti-DNA: n ja näytteet PCR:

PCR Samples:  Types, Amount and Purity PCR-näytteet: tyypit, määrä ja puhtaus

Types of Samples for PCR Laji Näytteet PCR

Single- or double-stranded DNA of any origin may be a PCR sample. Single-tai double-stranded DNA kaikista alkuperä voi olla PCR-näyte. Templates that can be used for amplification include animal, bacterial, plant, or viral. Mallit, joita voidaan käyttää vahvistinpiirejä sisältävät eläin-, bakteeri-, kasvi-tai virustauti. Conversion of RNA molecules, including total RNA, poly (A+) RNA, viral RNA, tRNA, or rRNA must occur prior to amplification when using these as templates to so-called complementary DNA (cDNA) by the enzyme reverse transcriptase (either MuLV or recombinant, rTth DNA polymerase). Muuntaminen RNA-molekyylejä, mukaan lukien yhteensä RNA, poly (A +) RNA-, virus-RNA, tRNA, rRNA on tapahduttava ennen amplification, kun käytät näitä malleja niin sanottuja täydentäviä DNA (cDNA) entsyymin käänteiskopioijaentsyymin (joko MuLV tai rekombinantti, rTth DNA-polymeraasi).

Amount of Material for PCR Määrän materiaalia, PCR

Starting material amount, required for PCR can be as little as a single molecule.  As a basis, up to nanogram amounts of DNA cloned template, up to microgram amounts of genomic DNA, or up to 105 DNA target molecules are best for initial PCR testing. Lähtöaineen määrän, tarvitaan PCR voi olla niinkin vähän kuin yhden molekyylin. Pohjalta, jopa nanogrammoina määriä DNA kloonattu malliin, jopa mikrogramman määriä geenien DNA: n, tai jopa 105 DNA: n tavoite molekyylit ovat parhaita alkuperäisen PCR-testaus .

Purity of Template and Sample for PCR Puhtaus templaatti-ja näytteen-PCR

Purity of the DNA sample that will be used for PCR amplification does not need not be high. Puhtaus on DNA-näyte, joka on käytettävä PCR amplification ei tarvitse olla korkea. A single cell, a crude cell lysate, or even a small sample of degraded DNA template is usually adequate for successful amplification. Yksi solu-, raakaöljy-solu lysate, tai jopa pieni näyte huonontuneen DNA-malli on yleensä riittävä onnistuneen vahvistinpiirejä. The requirements of sample purity must be that the target contains at least one intact DNA strand encompassing the amplified region and that the impurities associated with the target be dilute so as to not inhibit enzyme activity. Vaatimukset näytteen puhtausaste on, että tavoite on vähintään yksi ehjänä DNA strand kattaa entistä laajempi alue ja että epäpuhtaudet liittyvä tavoite on laimeaa, jotta ei estä entsyymin toimintaa. Be that as it may, for some amplifications, such as long PCR, it may be necessary to consider the quality and quantity of the DNA sample. Be, että se voi joissakin amplifications, kuten pitkän PCR, se voi olla tarpeen harkita laadun ja määrän DNA-näyte. For example: 1. Esimerkiksi: 1. When more template molecules are available, there is less occurrences of false positives caused by either cross-contamination between samples or “carryover” contamination from previous PCR amplifications. Kun useampi template molekyylit ovat saatavilla, on vähemmän tapahtumien vääriä positiivisia aiheuttanut joko ristikontaminaation välillä näytteiden tai "siirtää" saastuminen aiemmista PCR amplifications.

2. When the PCR amplifications lacks specificity or efficiency, or when the target sequences are limited, there is a greater chance of inadequate product yield. Kun PCR-amplifications puuttuu erityisyys tai tehokkuutta, tai kun tavoite sekvenssit ovat rajalliset, on olemassa suurempi mahdollisuus riittämättömät tuotteen saanto.

3. When the fraction of starting DNA available to PCR is uncertain, it is increasingly difficult to determine the target DNA content. Kun murto-osa alkaa DNA käytettävissä PCR on epävarmaa, se on yhä vaikeaa määrittää kohde-DNA: lla sisältöä.