home > molecular-biology-techniques > phosphorimaging > index.php etusivu> molekyyli-biologia-tekniikka> phosphorimaging> index.php
You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Sinun täytyy rekisteröityä ennen kuin voit lähettää meidän foorumeilla tai käyttää lisätoimintoja. Register Now! Register Now! Its Free and Fast! Sen vapaan ja nopeasti!
Already registered? Oletko jo rekisteröitynyt? Login now below. Login nyt alla.
Already registered and Forgot your password? Jo rekisteröity ja Unohditko salasanasi? Click below to recover it. Klikkaa alhaalta sitä takaisin.
Recover Lost Password Recover Lost Password
Join now - it's fast and free! Liity nyt - se on nopeaa ja ilmaista!
Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station on suurin verkosto, tutkijat, tiedemiehet ja tieteen ystäville!
May every young scientist remember and not fail to keep his eyes open for the possibility that an irritating failure of his apparatus to give consistent results may once or twice in a lifetime conceal an important discovery. Toukokuu jokaisen nuoren tiedemiehen muistaa ja olla pitää silmät auki sen mahdollisuuden, että ärsyttää vika hänen laite antaa johdonmukainen tulokset voivat kerran tai kaksi kertaa elinaikana salata tärkeä löytö. ~Patrick Blackett (British physicist, 1897-1974) ~ Patrick Blackett (brittiläinen fyysikko, 1897-1974)
This technique has several advantages over standard autoradiography, but the most important is that it is much more accurate in quantifying the amount of radioactivity in a substance. This is because its response to radioactivity is far more linear than that of an x-ray film. With standard autoradiography, a band with 50,000 radioactive disintegrations per minute (dpm) may look no darker than one with 10,000 dpm because the emulsion in the film is already saturated at 10,000 dpm. But the phosphorimager collects radioactive emissions and analyzes them electronically, so the difference between 10,000 dpm and 50,000 dpm would be obvious. Here is how the technique works: We start with a radioactive sample- a blot with DNA bands that have hybridized with a labeled probe, for example. We place this sample in contact with a phosphorimager plate, which absorbs B-rays. These rays excite molecules on the plate, and these molecules remain in an excited state until the phosphoimager scans the plate with a laser. At that point, the B-ray energy trapped by the plate is released and monitored by a computerized detector. The computer converts the energy it detects to an image. This is a false color image, where the different colors represent different of radioactivity, from the lowest (yellow) to the highest (black). Tämä tekniikka on useita etuja verrattuna standardi autoradiography, mutta tärkeintä on, että se on paljon tarkempi kvantifiointia määrä radioaktiivisuutta ainetta. Tämä johtuu siitä, että sen vastaus radioaktiivisuus on paljon lineaarinen kuin että x-ray-elokuva. With standardi autoradiography, bändi 50000 radioaktiivisen disintegrations minuutissa (DPM) voi katsoa mitään tummempi kuin yhden 10000 DPM koska emulsio, että elokuva on jo kylläinen 10000 DPM. Mutta phosphorimager kerää radioaktiivisia päästöjä ja analysoi niitä sähköisesti, joten ero 10000 DPM ja 50000 DPM olisi ilmeinen. Täällä on, miten tekniikka toimii: Alamme radioaktiivisen näytteen-a blot DNA-bändit, jotka ovat hybridized kanssa nimeltä koetin, esimerkiksi. Meidän paikka Näyte kosketuksessa phosphorimager kilpi, joka vie B-säteiltä. säteiltä excite molekyylejä, kilpi, ja nämä molekyylit jäävät joka viritystila kunnes phosphoimager skannaa levynä, jossa on laserosoitin. Tuohon kohta, B-ray energia loukussa, että levy on vapautettava ja seurattava tietokoneistetun detektori. tietokone muuntaa energiaa se havaitsee, että kuva. Tämä on väärä väri kuvaa, joissa eri värit edustavat eri radioaktiivisuuden, alhaisin (keltainen) korkein (musta).
Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | © 2005-2007 molekyylibiologian Station.com, Kaikki oikeudet pidätetään.