

| | | | | |
|---|
| | | Cell Culture Media, Kits, and Products Cell Culture Media, Kits ja Tuotteet | | |
Subculturing Cells - Cell Culture Subculturing Solut - soluviljely
Cell Culture Soluviljely
Cell Subculture Protocol Cell alakulttuurista pöytäkirjan
SUBCULTURING CELLS Jatkoviljelyä SOLUJEN
Get DMEM media 4C; Trypsin-20C; BSA-20C; Hanki DMEM media 4C; Trypsiini-20C; BSA-20C; Put in 36mL of DMEM into conical tube plastic Put in 36mL, DMEM osaksi kartiomainen putki muovi Add 4mL of BSA media to 36mL DMEM; Lisää 4mL, BSA tiedotusvälineiden 36mL DMEM; Get syringe and filter; Ota ruisku ja suodattimen; Suck up media with syringe. Add filter. Imeä jopa tiedotusvälineiden kanssa ruisku. Lisää suodatin. Push out media through filter on syringe. Push-out tiedotusvälineiden kautta suodattimen ruisku. Repeat twice to get all of volume. Toista kertaa saada kaikki äänenvoimakkuutta. Put into new plastic tube conical. Otettu uusi muovinen putki kartiomainen. Remove old media by dumping into beaker; DO NOT USE ASPIRATOR (get contamination!!) Poista vanha media polkumyynnistä osaksi dekantterilasiin; ÄLÄ KÄYTÄ ASPIRATOR (hanki saastuminen!) Add 3mL typsin to culture. Trypsin with pull cells off the culture container. Lisää 3mL typsin kulttuuriin. Trypsiini kanssa pull solujen pois kulttuurin astiaan. Put container into incubator. Wait 2 min; Take out; look into microscope. Laita astiaan osaksi hautomoon. Wait 2 min; Take out; tutkimaan mikroskoopilla. Try to get less clumps. More individual cells. Yritä saada vähemmän clumps. Lisää yksittäisiä soluja. Remove most of trypsin by dumping into beaker. Poista suurin osa trypsiini polkumyynnistä osaksi dekantterilasiin. Put back into incubator. Laita takaisin hautomoon. Check frequently. Tallenna usein. Slap container on sides to check bottom for less clumps; look into microscope. Slap säilytysastioiden puolin tarkistaa alhaalta vähemmän clumps; tutkimaan mikroskoopilla. When see many individual cells floating along; Great! Kun nähdä monia yksittäisiä soluja kelluva pitkin; Great! Add media to larger container; 1:5/ 1:3 dilution (3-5 containers larger). Lisää mediaa suurempi kontti; 1:5 / 1:3 laimentaen (3-5 kontteja suurempia). Add 10mL to (T75)large container, 5mL to (T25)small container. Lisää 10 ml (T75) suuren astiaan, 5ml (T25) pieniä astiaan. Suck out Most (5mL of cells from T25). Imeä pois Most (5ml solujen osoitteesta T25). Add to T75. Lisää T75. Leave some cells in small container. Add media to small container. Check in microscope for single cells; Incubate in 37C incubator. Jätä jotkut solut pienissä astiaan. Lisää mediaa pieni kontti. Check in mikroskoopilla yksittäisten solujen; Inkuboidaan, 37c hautomoon. See other Cell-protocols at our Cell Biology and Cell Culture Protocol Directory . Katso muiden Cell-protokollia meidän solubiologia ja soluviljely pöytäkirjan Directory.