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El traficar del receptor de la histamina H2:
El papel del arrestin, del dynamin y del clathrin en...
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El traficar del receptor de la histamina H2: Papel del arrestin, del dynamin y del clathrin en el internalization de H2r.
Mol De Pharmacol. el 2008 de julio 10;
Autores: Fernandez Nc, Monczor F, Baldi A, Davio Ca, Shayo C
el internalization Agonista-inducido de GPCRs ha estado implicado en la desensibilización, el resensitization, y el downregulation del receptor. En el actual estudio, intentamos establecer si el amthamine del agonista de H2r, además de promover la desensibilización del receptor, indujo el internalization de H2r. Estudiamos más lejos los mecanismos implicados en así como su papel potencial en el resensitization del receptor. En COS7 transfected amthamine de las células internalization time-dependent inducido de H2r, mostrando un 70% de endocytosis del receptor que seguía la exposición de 60 minutos al amthamine. El retiro del agonista condujo a la recuperación rápida de resensitized los receptores a la superficie de la célula. Los resultados similares fueron obtenidos en la presencia del cycloheximide, un inhibidor de la síntesis de la proteína. El tratamiento con el ácido okadaic, un inhibidor de la familia de PP2A de phosphatases, redujo la recuperación de los sitios de la membrana de H2r y de la respuesta del amperio. El overexpresion de Arrestin 3, pero no del arrestin 2 redujo sitios de la membrana de H2r y respuesta de H2r-evoked amperio. El cotransfection del receptor con los mutantes negativos dominantes para el arrestin, el dynamin, Eps15 (componente de la maquinaria clathrin-mediada del endocytosis) o RNAi contra el arrestin 3 suprimió el internalization y el resensitization de H2r. Los resultados similares fueron obtenidos en las células U937 endógeno que expresaban a H2r. Present que los resultados sugieren que el internalization amthamine-inducido de H2r es crucial para el resensitization de H2r, independiente de los procesos de la síntesis de H2r de novo pero dependiente en el dephosphorylation de PP2A-mediated. Aunque no proporcionamos a la evidencia directa para la interacción de H2r de betaarrestin, de dynamin y/o de clathrin, nuestros resultados utilizan su implicación en endocytosis de H2r. El receptor rápido que recicla a la superficie de la célula y la implicación específica del arrestin 3 en el internalization del receptor sugieren más lejos que el H2r pertenece a la clase A GPCRs.
PMID: 18617631 [ PubMed - según lo provisto por el editor ]
Una pantalla sistemática de RNAi revela la implicación del camino de Endocytic en la disfunción neuronal adentro {los elegans de Transgenic C. del alpha}-Synuclein.
De Genet Del Ronquido Mol. el 2008 de julio 9;
Autores: Kuwahara T, Koyama A, Koyama S, Yoshina S, Ren Ch, Kato T, Mitani S, Iwatsubo T
Las mutaciones o las multiplicaciones en formas familial de la causa del gene de la alfa-synuclein de enfermedad o de demencia de Parkinson con los cuerpos de Lewy, y la deposición del salvaje-tipo alfa-synuclein como cuerpos de Lewy ocurre como lesión del sello de estos desórdenes, designada colectivamente los synucleinopathies, implicando alfa-synuclein en la patogenesia de synucleinopathy. Para identificar genes del modificante del neurotoxicity alfa-synuclein-inducido, condujimos una pantalla de RNAi en los elegans transgenic de la C. (gusanos del Tg) esa alfa-synuclein humana de los overexpress de una manera cacerola-neuronal. Para realzar el efecto de RNAi en neuronas, cruzamos gusanos del Tg de la alfa-synuclein con una tensión RNAi-realzada del mutante eri-1. Probamos RNAi de 1673 genes relacionados con el sistema nervioso o las funciones sinápticas, e identificamos diez genes que, sobre la precipitación, causaron anormalidades severas de growth/motor selectivamente en gusanos del Tg de la alfa-synuclein. Entre éstos estaban cuatro genes (es decir, apa-2, aps-2, eps-8 y rab-7) relacionados con el camino endocytic, incluyendo dos subunidades del complejo AP-2. Constante con los resultados de RNAi, los gusanos del Tg de la alfa-synuclein que se cruzaban con un mutante aps-2 dieron lugar a la detención severa del crecimiento y los gusanos del motor dysfunction.?alpha-Synuclein Tg visualizaron una sensibilidad disminuida del tacto sobre RNAi de los genes implicados en endocytosis sináptico de la vesícula, y también mostraron la transmisión neuromuscular deteriorada, sugiriendo que el overexpression de la alfa-synuclein causó un incidente en uptake o el reciclaje de vesículas sinápticas. Además, la precipitación de apa-2, una subunidad AP-2, causó una acumulación de la alfa-synuclein phosphorylated en cuerpos neuronales de la célula, el mímico synucleinopathy. Colectivamente, estos resultados levantan una conexión patógena de la novela entre el camino endocytic y el neurotoxicity alfa-synuclein-inducido en synucleinopathy.
PMID: 18617532 [ PubMed - según lo provisto por el editor ]
Las secuencias del oligonucleotide que forman las horquillas uno mismo-elogiosas cortas pueden apresurar la abajo-regulacio'n de los genes cinerea de Coprinopsis.
Métodos De la Microbiología De J. el 2008 de junio 17;
Autores: Costa, Molinos Banda, Bailey A, GD Foster, P. M. De Challen
El gene que silencia en hongos es inducido a menudo por la horquilla del dsRNA que forma las construcciones camina la preparación de las cuales puede requerir la reproducción múltiple. Para simplificar el gene que silenciaba en los hongos filamentosos hemos evaluado un alto método de la reproducción del rendimiento de procesamiento para las secuencias de la blanco usando el homobasidiomycete Coprinopsis cinerea, el reportero de GFP y un sistema comercialmente disponible del vector. La marca de RNAi Systemtrade del pSUPER, que fue desarrollada para los experimentos mamíferos, explota H1 a promotor humano del gene del RNA de la polimerasa III (Pol III) y apresura cloning/expression de las secuencias definidas por el usario específicas del oligonucleotide para formar las horquillas uno mismo-elogiosas cortas. La transformación de la C. cinerea con el pSUPER construye abrigar la recuperación permitida específica de los oligonucleotides (19 longitudes del vástago del NT) de transformants con las transcripciones reducidas del transgene de GFP, y era menos fluorescente en análisis de la proteína y phenotypes microscópicos. Este avance tecnológico debe apresurar estudios genomic funcionales en la C. cinerea y tiene potencial más amplio para el utilitario en otro homobasidiomycete y hongos filamentosos.
PMID: 18616966 [ PubMed - según lo provisto por el editor ]
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