Protocolos De Transfection

Protocolo del transfection de la célula de LECHUGA ROMANA. Incluye soluciones: Dextran del DEAE y chloroquine 1000X - [protocolo leído de Transfection de la célula de LECHUGA ROMANA]

Protocolo de Transfection usado en la precipitación Dlgh1 en linfocitos primarios de OT-1 T. - [precipitación leída Dlgh1 en linfocitos primarios de OT-1 T: Protocolo De Transfection]

El protocolo se debe ver como punto de partida para la optimización sistemática del transfection mediada lipofecting agentes. Una vez que una señal positiva se haya obtenido de a transfected el plasmid que llevaba un gene estándar del reportero, las condiciones óptimas para el transfection se pueda establecer por la variación sistemática de parámetros tales como la densidad inicial de la célula, la cantidad y la pureza de la DNA, los media y el suero, y la época de la exposición de las células al complejo catio'nico-li'pido-DNA. - [DNA leída Transfection mediado por Lipofection Protocol]

Polybrene y DMSO se pueden utilizar para alcanzar la transformación estable de varios tipos de células por plasmid DNA. La producción de transformants está hasta 15-fold mayor con Polybrene que con el coprecipitation de fosfato-DNA del calcio. Sin embargo, no hay diferencia entre los dos métodos en la eficacia de la transformación de células al lado de DNA de peso molecular elevado. - [DNA Leída Transfection Usando El Protocolo De Polybrene]

El protocolo describe el transfection de la DNA del plasmid en líneas de la célula mamífera usando el electroporation, un proceso por el que la aplicación externa de pulsos eléctricos induzca permeabilidad de membrana de la célula. Las células en la suspensión y las células pequeñas del volumen son difíciles al transfect, mientras que las células adherentes y las células grandes del volumen son relativamente fáciles. Sin importar talla de célula o phenotype, aumentos de la eficacia del transfection con una alta concentración de células en un volumen pequeño. - [Electrotransfection óptimo leído del protocolo in vitro de las células mamíferas]

El procedimiento siguiente está para el transfection y el laminado simultáneos de 264.7 células SIN PROCESAR. Este protocolo da lugar a aproximadamente viabilidad de la célula del 50% a del 70%, y de esas células viables, los 20% a los 40% son transfected al usar pEYFP-N1 de Clontech. Incluya: Procedimiento para partir las células antes de Transfection; Procedimiento para preparar Lipofectamine 2000 y DNA; Preparación de las 264.7 células SIN PROCESAR para Transfection. - [células SIN PROCESAR leídas de Transfecting y del laminado 264.7 con el protocolo de Lipofectamine 2000]

el DEAE-dEAE-dextran se utiliza generalmente para obtener una explosión de la expresión transitoria de genes reproducidos después del transfection de células mamíferas. Muchas variantes de la técnica se han descrito, que intentan maximizar el uptake de la DNA y reducir al mínimo los efectos citotóxicos del DEAE-dEAE-dextran. En este protocolo las células se exponen abreviadamente a una alta concentración de DEAE-dextran-DNA y entonces al difosfato del chloroquine, que es un facilitator del transfection. - [Transfection leído medió por DEAE-DEAE-Dextran: Protocolo High-efficiency Del Método]

Transfection de las células de IMEC usando protocolo el reactivo de SuperFect Transfection. El protocolo incluye consideraciones experimentales del diseño. - [Transfection leído de las células de IMEC usando protocolo el reactivo de SuperFect Transfection]

El protocolo describe un método para la salida de siRNAs en las células mamíferas en ausencia de los plasmids del reportero. Esto se alcanza lo más mejor posible con los reactivo del transfection desarrollados para la salida de los oligodeoxynucleotides del antisense. Las cantidades de reactivo dados abajo se calculan para el transfection de uno bien de una placa 24-well. - [Transfection leído de células mamíferas con siRNA duplica protocolo]