Protocolos De la Preparación De la Célula De Alimentador

Protocolo para MEF de irradiación y que platea. - [irradiación leída y platear del protocolo de MEF]

Este protocolo describe el aislamiento de fibroblasts de embriones del ratón. Las células embrionarias del fibroblast del ratón (MEF) se utilizan como capa del alimentador para la cultura de las células embrionarias del vástago del ratón (ES) para ayudar a mantenerlas como células de vástago pluripotent. La inhibición de la diferenciación de la ES-ce'lula proporcionó por los alimentadores de MEF aparece ser debido a su producción del factor inhibitorio de la leucemia (LIF). - [aislamiento y el congelar leídos de los fibroblasts embrionarios del ratón primario (MEF) para las placas del alimentador]

Protocolo para la preparación de las capas del alimentador de fibroblasts embrionarios primarios. - [preparación leída de las capas del alimentador del protocolo embrionario primario de los fibroblasts]

Los alimentadores de MEF están preparados semanalmente para proporcionar a un substrato para undifferentiated las células embrionarias del vástago (ES). Se deshielan las células primarias de MEF, establecido en cultura, trataron con el mitomycin C para parar su proliferación así que no pueden crecer demasiado las culturas del ES, y entonces vuelto a chapar sobre los platos convenientes para la cultura de célula del ES. Este protocolo se puede también utilizar para preparar las células de alimentador de líneas de la célula del fibroblast de STO. - [la preparación leída del alimentador embrionario del fibroblast del ratón (MEF) platea protocolo]

Protocole para la preparación del fibroblast embrionario murine de NeoR. - [preparación leída del protocolo embrionario murine de los fibroblasts de NeoR]

Este protocolo describe la preparación de las células de alimentador de las células de MEF o de la línea de la célula del fibroblast del ratón de STO. Las células son hechas mitotically inactivas por el tratamiento con {gamma}-irradiacio'n. Las capas del alimentador se pueden entonces utilizar para mantener las células embrionarias del vástago (ES) en undifferentiated el estado. - [leído preparando capas de la célula de alimentador de STO o del protocolo de las células del fibroblast del embrión del ratón (MEF)]

Este protocolo describe la preparación de las capas de la célula de alimentador de las células de MEF o de la línea de la célula del fibroblast del ratón de STO. Las células son hechas mitotically inactivas por el tratamiento con el mitomycin C. Las capas del alimentador se pueden entonces utilizar para mantener las células embrionarias del vástago (ES) en undifferentiated el estado. - [leído preparando capas de la célula de alimentador de STO o de las células del fibroblast del embrión del ratón (MEF): Tratamiento con Mitomyc]

Este protocolo describe la preparación de los fibroblasts del embrión del ratón (MEFs), que pueden entonces ser utilizados mientras que las células de alimentador para mantener las células embrionarias del vástago (ES) en undifferentiated el estado. - [Leído Preparando Protocolo De los Fibroblasts Del Embrión Del Ratón]

Este protocolo describe la cultura de las células embrionarias del vástago (ES) usando mitotically hacer inactivo las células embrionarias del fibroblast del ratón primario (MEF) como una capa del alimentador (preparación descrita en la preparación de las placas embrionarias del alimentador del fibroblast del ratón (MEF)). El medio de cultivo del ES se suple con el factor inhibitorio de la leucemia recombinant (LIF) para ayudar a mantener las células como células de vástago pluripotent. Este protocolo se ha optimizado para la línea de la célula ES-D3. - [propagación leída del protocolo embrionario de las células del vástago del ratón de Pluripotent (ES)]

Incluye protocolos: Preparación Embrionaria De los Fibroblasts Del Ratón (MEF); Cosechar MEFs; Cryopreservation de MEFs; MEFs que deshiela y que mantiene; Irradiando Y Plateando MEFs; Cultura de las células humanas del ES con Matrigel® y media condicionado; Preparación del media condicionado (CM); Preparación de Matrigel® - placas revestidas; Paso de las células humanas del ES en Matrigel®; Mantenimiento diario de la cultura alimentador-libre; Células Humanas del Es Que congelan; Células humanas el deshelar ES; Formación de los cuerpos de Embryoid; - [protocolos leídos para el mantenimiento de las células de vástago embrionarias humanas en condiciones del alimentador libremente]