Protocolos de la célula de vástago

La combinación de identificación/de aislamiento anticipados de los progenitores de la médula y de RT-PCR cuantitativo es una herramienta de gran alcance para entender la hematopoyesis subyacente del mecanismo molecular. Aquí, describimos nuestros procedimientos estándar del progenitor mieloide murine que manchaba para las células activadas fluorescencia que clasificaban (FACS) y los métodos de la purificación del ARN. - [Célula leída que mancha para clasificar de las células de vástago hematopoyéticas y de los progenitores mieloides y aislar el ARN]

Este protocolo describe la derivación de las variedades de células de los TS a partir de 3.5 blastocysts del ratón del coitum del poste de los días (dpc). El procedimiento es similar a la derivación de las variedades de células embrionarias del vástago (ES). Sin embargo, el índice de éxito es considerablemente más alto, y menos maestría se requiere para reconocer a colonias de célula pluripotent de los TS. - [Derivación leída de las variedades de células trofoblastas del vástago (TS) del protocolo de Blastocysts]

Las células de Pluripotent ES pueden convertirse en muchos tipos de tejidos distinguidos si se ponen nuevamente dentro de un ambiente diferenciador. A menudo, los ingresos de la diferenciación a través de una etapa intermedia llamaron el cuerpo del embryoid (EB). EBs se puede manipular más lejos para generar tipos distinguidos de la célula. Este protocolo describe un método para la diferenciación de las células del ES en EBs. - [Leído distinguiendo las células embrionarias del vástago (ES) en protocolo de los cuerpos de Embryoid]

Protocolo para la electroporación de las células del ES. Las células se pasan rutinario dos días antes de electroporating. Generalmente una placa de 10 cm en el confluency del aproximadamente 80% proporcionará a bastantes células para 1-2 electroporaciones. - [Electroporación leída del protocolo de las células del ES]

Este protocolo describe un método para congelar y deshelar las células del ES usando cryovials. Es importante congelar la acción de la célula del ES cuanto antes para reducir el tiempo que ella está en cultura. Se pasa un expediente cuidadoso se debe guardar del número de células de épocas y la localización de los cryovials. - [Congelación y deshielo leídos de las células embrionarias del vástago (ES) usando el protocolo de Cryovials]

Este protocolo describe el paso de las células del ES. Deben estar partidas en el 1:3 al 1:7 cada 2-3 días dependiendo de su tarifa de crecimiento cuando alcanzan confluency del 70%. Deben nunca ser permitidas crecer más allá de confluency del 90%, pero deben formar algo a las colonias firmemente pila de discos que no se tocan. - [Paso leído del protocolo embrionario de las células del vástago (ES)]

Este protocolo describe un método de preparación de la DNA de las células del ES en 24 placas bien. - [Preparación leída de la DNA de las células en protocolo de las placas de cultura del tejido 24-Well]

El protocolo de Ths describe la preparación de las células del ES, que se pueden entonces agregar con los embriones diploides o tetraploides para producir quimeras de la agregación. - [Leído preparando las células embrionarias del vástago (ES) para el protocolo de la agregación]

Este protocolo describe un método para la preparación rápida de la DNA de las células en 96 platos de cultura bien del tejido. - [Preparación rápida leída de la DNA de las células en protocolo de los platos de cultura del tejido 96-Well]

La célula de Transfected ES de la cosecha reproduce protocolo

Este protocolo un protocolo en cómo generar transfected copias embrionarias de la célula del vástago (ES). El protocolo anterior en esta serie es el protocolo para la electroporación de las células del ES. El protocolo siguiente en la serie es el protocolo en la desagregación, la extensión, y la congelación de las copias de Transfected ES.

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Pipeta de Microinjection que tira de protocolo

Un protocolo simple para la tracción de la pipeta del microinjection.

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Microinjection que se lava ácido mide con una pipeta protocolo

El lavado ácido del microinjection de cristal mide con una pipeta protocolo.

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Microinjection mide con una pipeta protocolo

Microinjection mide con una pipeta protocolo de la preparación.

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