protocolos adaptados

Categoría: Protocolos De la Cultura De Célula: Protocolos De la Cultura De Célula Del Insecto

¿Este protocolo se diseña para adaptar el colmo cinco? células (BTI-Tn-4) a la cultura sin suero de la suspensión en el SFX-Insecto de HyQ en 5 pasos. Las tomas enteras del proceso de la adaptación aproximadamente dos semanas y las células adaptadas que resultan tienen épocas que doblan de 16 y 20 horas y de agrupar mínimo en cultura de la suspensión. ¿- [adaptación leída del colmo cinco? Células al media© del insecto de HyQ SFX]

Categoría: Epigenetics y protocolos del methylation

Tratamiento del bisulfito de la DNA Anderson Lab. Adapted de Frommer y otros. - [tratamiento leído del bisulfito del laboratorio de la DNA Anderson]

Categoría: Epigenetics y protocolos del methylation: Protocolo Del Análisis Del Methylation Del Tratamiento Del Bisulfito

Adaptado de Frommer y otros. Buen protocolo para el tratamiento del bisulfito de la DNA. Incluye extremidades en el methylation PCR para el análisis del methylation de CpG. Universidad del centro del cáncer del M. D. Anderson de Tejas - [tratamiento leído del bisulfito de la DNA para el análisis del methylation]

Categoría: Protocolos De Transfection: Protocolos De Transfection Del Fosfato De Calcio

El fosfato de calcio forma un precipitado insoluble con la DNA, que asocia a la superficie de la célula y es tomada en las células por endocytosis. El protocolo se adapta fácilmente para el uso con otros tipos de células, adherentes y nonadherent. Este protocolo es una versión modificada de un método publicado por Jordania et el al. (1996) que riguroso optimizaron los métodos calcio-fosfato-basados del transfection para las células chinas del ovario del hámster y la línea 293 de las células embrionarias humanas del riñón. - [Transfection Calcio-fosfato-mediado leído de las células de Eukaryotic con el plasmid DNAs]

Categoría: Protocolos Del Oligonucleotide: Protocolos De la Purificación Del Oligonucleotide

Concentración de la DNA por el protocolo de Ethanol Precipitation. Adaptado de Bruce A. Roe, departamento de la química y bioquímica, la universidad de Oklahoma, normando, Oklahoma. Generalmente 2.5 - 3 volúmenes  de la solución del etanol y/o del acetato se agregan a la DNA en un tubo del microcentrifuge. Esto entonces se pone en un baño del hielo-agua por por lo menos 10 minutos. La precipitación es realizada por la incubación en -20C durante la noche. - [concentración leída de la DNA de Oligo por el protocolo de Ethanol Precipitation]

Categoría: Protocolos De la Cultura De Célula: Protocolos De la Cultura De Célula Del Insecto

Usando este método, las células del insecto se deben adaptar al SFX-Insecto de HyQ en 4-8 pasos. Sin embargo, hay algunas líneas de la célula y se reproduce que son más sensibles a los cambios physiochemical y alimenticios, y en algunos casos puede durar de 8 pasos para la adaptación. ¿- [adaptación directa leída de las células del insecto al SFX-Insecto© de HyQ? Media]

Categoría: Genética y Genomics: Protocolos De Genotyping: Protocolos De la Detección De la Mutación

La meta de este método es identificar genes transcriptionally activos en segmentos reproducidos de la DNA genomic. Las aplicaciones hibridación del protocolo y la purificación de la afinidad de recuperarse biotin-etiquetaron DNAS que atan a un segmento 500-kb de la DNA humana reproducido en un vector de BAC. Sin embargo, el método se puede adaptar fácilmente a otro se reproduce de DNAs genomic reproducido en vectores de gran capacidad. - [la selección directa leída de DNAS con la DNA grande de Genomic reproduce protocolo]

Categoría: Protocolos De la Proteína: Protocolos De la Expresión De la Proteína

Expresión de la proteína etiquetada F-f-tryptophan. El protocolo se puede adaptar para el etiquetado del Fluoro-fluoro-phenylalanine o del Fluro-fluro-tyrosine. Transformación de las células competentes del E. coli para la expresión con el plasmid. El Dr. Chen, departamento de la bioquímica y del Mol. Biología, Universidad De la Universidad, Londres. - [expresión leída de la proteína etiquetada F-f-tryptophan]

Categoría: Protocolos Virales De la Manipulación: Protocolos Phage De la Manipulación De Lamda

La DNA es aislada lo más mejor posible de partículas de la lambda del bacteriófago digiriendo las proteínas virales de la capa con un protease de gran alcance tal como proteinase K, seguido por la extracción con phenol:chloroform. Este procedimiento se adapta fácilmente para el uso con las preparaciones smaller-scale de la lambda del bacteriófago. - [extracción leída de la DNA de la lambda del bacteriófago de culturas en grande usando el proteinase K y el protocolo del SDS]

Categoría: Biología de la célula y cultura de célula: Protocolos Del Ciclo De la Célula: Protocolos De la Fase De G

Este protocolo proporciona a un método para la sincronización de una cultura del monolayer de las células de CHO en G1 usando la privación del isoleucine. Puesto que las células de CHO se pueden también adaptar para crecer en cultura de la suspensión, este procedimiento se puede utilizar para obtener cantidades más grandes de células. Cuando se substituye el isoleucine, las células reasumen crecimiento y comienzan a incorporar horas de la fase ~4 de S más adelante. Este método arresta casi 100% de las células de CHO en G1, y sobre la revocación, conduce a la recuperación rápida del crecimiento de la célula y de la viabilidad muy alta de la célula. - [sincronización leída G1 de las células de CHO por el protocolo de Isoleucine Deprivation]

Categoría: Biología de la célula y cultura de célula: Protocolos De Cytometry Del Flujo: Protocolos Del Análisis Del Ciclo De la Célula

Este protocolo proporciona a un método para la sincronización de una cultura del monolayer de las células de CHO en G1 usando la privación del isoleucine. Puesto que las células de CHO se pueden también adaptar para crecer en cultura de la suspensión, este procedimiento se puede utilizar para obtener cantidades más grandes de células. Cuando se substituye el isoleucine, las células reasumen crecimiento y comienzan a incorporar horas de la fase ~4 de S más adelante. Este método arresta casi 100% de las células de CHO en G1, y sobre la revocación, conduce a la recuperación rápida del crecimiento de la célula y de la viabilidad muy alta de la célula. - [sincronización leída G1 de las células de CHO por el protocolo de Isoleucine Deprivation]

Categoría: Protocolos De la Cultura De Célula

El cristal es un substrato excelente para la mayoría de las células tejido-cultura-adaptadas y es compatible con todas las soluciones que fijan y que se manchan. Las tiras de cristal en platos de la tejido-cultura o en placas del multiwell 24-well son portadores convenientes, al igual que las diapositivas del multiwell. Para los estudios de alta resolución, elija las tiras de cristal del grado disponible más alto; las tiras #1 o #1.5 son el espesor apropiado. - [células adherentes cada vez mayor leídas en tiras o protocolo de las diapositivas del multiwell]

Categoría: Protocolos De Immunohistochemistry: Protocolos De Cryosectioning

Este protocolo describe los métodos para la fijación, cryosectioning, y la detección immunohistochemical de proteínas en ojos embrionarios y del adulto del zebrafish. Los métodos descritos se pueden adaptar fácilmente para el uso en otros tejidos finos del zebrafish. - [Immunohistochemistry leído en Cryosections de embrionario y del adulto Zebrafish eyes protocolo]

Categoría: Protocolos Modelo De los Organismos Del Laboratorio

El protocolo describe los métodos para la fijación, cryosectioning, y la detección immunohistochemical de proteínas en ojos embrionarios y del adulto del zebrafish. Los métodos descritos se pueden adaptar fácilmente para el uso en otros tejidos finos del zebrafish. - [Immunohistochemistry leído en Cryosections de embrionario y del adulto Zebrafish eyes protocolo]

Categoría: Protocolos De Immunohistochemistry

Describe dos métodos para usar la reacción del immunoperoxidase para localizar los antígenos en el nivel del microscopio electrónico; uno para las células cultivadas adherentes y uno para las secciones del tejido fino. Las condiciones de la reacción primero se optimizan en el nivel del microscopio ligero y en seguida se adaptan para la observación del nivel del EM. Estos métodos permiten la detección confiable de antígenos en la superficie de la célula, dentro de la célula, y especialmente en membrana limitaron los organelles. - [métodos leídos del immunoperoxidase para la localización de antígenos en células y tejidos finos cultivados]

Categoría: Protocolos Bacterianos

El protocolo fue desarrollado para aislar Wolbachia del drosophila del adulto, pero puede ser adaptado para otros insectos. En algunos insectos el retiro de la pierna antes del aislamiento facilita la protuberancia de la hemolinfa. - [aislamiento leído de bacterias vivas del protocolo de los insectos del adulto]

Categoría: Protocolos Del Anticuerpo: Protocolos De Etiquetado Del Anticuerpo

Este protocolo describe un método químico simple de la oxidación para etiquetar los anticuerpos con yodo. Iodide-125 (provisto como NaI) se oxida para formar iodine-125 (I2), que ataca encadenamientos laterales del tyrosyl y del histidyl. Los anticuerpos yodados se detectan y se cuantifican fácilmente usando contadores o la película gammas. Se utilizan sobre todo en immunoassays, pero otras técnicas se pueden adaptar convenientemente al método de detección del yodo. - [anticuerpos de etiquetado leídos con protocolo del yodo]

Categoría: Protocolos De la Levadura: Protocolos Que se manchan De la Levadura

El protocolo describe nuestro método para preparar las células para la inmunofluorescencia, en la cual todas las incubaciones y coladas se realizan en platos del microtítulo. El protocolo se puede también adaptar fácilmente para preparar las células para la inmunofluorescencia en tubos del microfuge. - [Leído Grande-Escale El Protocolo De Immunocytology]

Categoría: Protocolos De la Biología De la Planta: Protocolos Del Aislamiento del RNA de la DNA De la Planta

El protocolo se basa en el protocolo estándar de Trizol para la purificación del RNA de las células animales usando Trizol (purificación del RNA de las células animales usando Trizol). En esta versión, adaptada para el uso con los tejidos finos de planta, un paso de progresión de la precipitación del isopropanol de la alto-sal se ha agregado al RNA del precipitado selectivamente, mientras que mantiene a los polisacáridos y a los proteoglycans en la solución. - [preparación leída del RNA del tejido fino de planta usando Trizol]

Categoría: Análisis Del Gene Del Reportero: Protocolos Del Análisis de GFP

El protocolo describe específicamente la adquisición de datos para una variante determinada de GFP (EGFP) o del verde de Oregon como fluorophore dispensador de aceite, pero puede ser adaptado para la adquisición de la imagen del otro chromophore. - [interacciones leídas de la proteína que sondan usando GFP y el TRASTE]

Categoría: Protocolos del RNA: Síntesis de RT-PCR y de la DNA

Este procedimiento primero fue descrito por Bertrand et el al para demostrar que los ribozymes podrían ser ines vivo enzimático activo. Adaptamos el método para mostrar que ciertos oligodeoxynucleotides podrían ordenar la actividad del ribonuclease endógeno H hender alquitrán - [RT mediado ligadura reversa leído - PCR]

Categoría: Protocolos De la Proteína: Protocolo Occidental De la Mancha blanca /negra

Adaptado de protocolos existentes por Vinh PhamLast modificado: 5 de junio de 2003. - [SDS-PAGE Leído Y Protocolos Que borran Occidentales]

Categoría: Protocolos De la Proteína: Electrophoresis De la Proteína: Protocolos Del Electrophoresis de SDS-PAGE

Geles de SDS-PAGE. Adaptado de David Bowtell - [geles leídos de SDS-PAGE]

Categoría: Biología de la célula y cultura de célula: Biología y cultura de la célula de vástago del ES

Células del Es Del Protocolo De Subcloning. Utilizó una forma adaptada de los protocolos alimentador-libres detallados en Xu et al. (Biotecnología 19:971â?"974, 2001 De la Naturaleza). Unidad De la Célula De Vástago de NIH - [Células Leídas del Es Del Protocolo De Subcloning]

Categoría: Protocolos De la Proteína: Precipitación Procols De la Proteína

Protocolo doc. de la precipitación de la acetona del TCA. Marinero Mate. 2006. Adaptado y modificado de Gruehler et del al., 2005. - [protocolo leído doc. de la precipitación de la acetona del TCA]