Protocolos De Etiquetado Del Anticuerpo

Una vez que los tejidos finos sean fijos y permeabilized, se agregan los anticuerpos. Estos anticuerpos se pueden etiquetar directamente o detectar por un reactivo secundario etiquetado. Para la detección indirecta, cualquier reactivo que ate específicamente al anticuerpo primario se puede "marcar con etiqueta" y utilizar para localizar el anticuerpo. Los reactivo posibles incluyen los anticuerpos de la contra-inmunoglobulina, la proteína A o G, o, si el primer anticuerpo se etiqueta con biotin, streptavidin. Pueden ser etiquetados con las enzimas o el oro. - [los anticuerpos obligatorios leídos al tejido fino seccionan protocolo]

Protocole para la detección de autoantibodies con los tetramers radiactivos del antígeno uno mismo-que ensamblan. - [detección leída de autoantibodies con protocolo radiactivo de los tetramers del antígeno Uno mismo-Que ensambla]

Este protocolo describe el acoplador covalente de anticuerpos al biotin. Los grupos del biotin atan con afinidad extremadamente alta al streptavidin y al avidin, que están disponibles juntada comercialmente con las enzimas, los tintes fluorescentes, o el yodo. A biotinylated el anticuerpo primario, por lo tanto, puede ser detectado con cualquiera de una variedad amplia de diversas escrituras de la etiqueta. La reacción del biotinylation es simple y suave, y hace inactivo raramente el anticuerpo. - [anticuerpos de etiquetado leídos con protocolo del biotin]

El etiquetado directo de anticuerpos purificados es el método de opción al simultáneamente visualizar dos o más anticuerpos de la misma especie, clase, o subclase. Esto permite que la localización de antígenos múltiples sea comparada en la misma célula, tejido fino, o muestra. Los anticuerpos primarios etiquetados son también útiles para mejorar relaciones de transformación de la fondo-a-lectura, y pueden ser esenciales para los immunoassays en los cuales la buena cuantificación es necesaria. - [anticuerpos de etiquetado leídos con protocolo de los fluorochromes]

Este protocolo describe un método químico simple de la oxidación para etiquetar los anticuerpos con yodo. Iodide-125 (provisto como NaI) se oxida para formar iodine-125 (I2), que ataca encadenamientos laterales del tyrosyl y del histidyl. Los anticuerpos yodados se detectan y se cuantifican fácilmente usando contadores o la película gammas. Se utilizan sobre todo en immunoassays, pero otras técnicas se pueden adaptar convenientemente al método de detección del yodo. - [anticuerpos de etiquetado leídos con protocolo del yodo]

Este método para marcar los anticuerpos con etiqueta monoclonal implica el crecer de hybridomas en la presencia de aminoácidos radiactivos. Este protocolo puede ser determinado útil cuando causa de etiquetado convencional de las técnicas el anticuerpo para perder actividad. Los anticuerpos etiquetados que resultan son esencialmente idénticos a los anticuerpos sin etiqueta. - [anticuerpos monoclonal de etiquetado leídos de Biosynthesis Protocol]